摘要：为获得产气荚膜梭菌α毒素(CPA)的C末端(CPAC)与中和抗原表位NE(ARGFAK)的串联融合蛋白并评价其免疫原性,对已知的A型产气荚膜梭菌CPAC及NE的编码基因进行优化设计,并将两个基因的三拷贝序列串联,经人工合成获得基因片段GCPAC3NE3。将该片段克隆至原核表达载体p ET30a(+)中进行表达与纯化,获得重组蛋白。利用Western blot方法检测重组蛋白与A型产气荚膜梭菌毒素抗血清的反应性。随后,以纯化的重组蛋白免疫家兔,根据《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测家兔血清的中和抗体效价。在二免后21 d,以1个MLD的A型产气荚膜梭菌毒素对家兔进行攻毒。结果表明重组蛋白主要以包涵体的形式存在表达且能与A型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应。每毫升的一免抗血清可中和40个最小致死量(MLD)、二免抗血清可中和80个MLD的A型产气荚膜梭菌毒素;1个MLD的A型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组4/4死亡,免疫组得到了100%(4/4)的保护。以上结果说明,重组蛋白具有良好的免疫原性,从而为A型产气荚膜梭菌病基因工程疫苗的研制提供了重要的实验数据。

摘要：目的探讨预防高度膝关节外翻畸形人工膝关节置换术出现合并症的手术方法和技巧。方法21例高度膝关节外翻畸形患者,应用膝关节髌骨外侧手术入路Z形切开,假体安放旋转定位,以膝关节周围韧带平衡后下肢力线为基准。膝关节外翻的软组织平衡方法:膝关节屈曲位和伸直位外侧间隙均紧张,在屈曲膝关节90°状态位,松解股骨外髁上外侧副韧带、关节囊后外侧角、腘肌腱;伸直位网格状松解髂胫束上方。屈曲位良好而伸直位紧张,松解髂胫束、外侧副韧带、后关节囊;屈曲位紧张伸直位良好,松解腘肌腱、外侧副韧带、关节囊后外侧角。结果21例均获随访,时间9～28个月,2例迟发腓总神经麻痹,3个月后恢复。手术切口一期愈合。KSS评分术前为(43.3±4.1)分,术后12个月为(83.8±5.2)分,24个月为(87.4±4.5)分。结论应用人工膝关节置换手术治疗高度外翻膝关节畸形,难于膝关节内翻,采用膝关节外侧手术入路和相应设计的手术方法,能够很好解决外翻膝关节人工关节置换手术出现的合并症。

摘要：目的:了解上海市嘉定区4~5年级小学生心理健康状况,探索影响小学生心理健康的危险因素,为实施心理干预提供理论依据。方法:采用分层整群抽样方法,对嘉定区4所学校4~5年级802名小学生进行问卷调查,采用“心理健康诊断测验”量表测评学生心理状况。结果:全量表中心理问题检出率为16.6%,分量表中学习焦虑检出率最高,为11.8%。分析结果显示:女生在恐怖倾向上的检出率(10.1%)高于男生(4.5%),随迁子女学校的学生在学习焦虑和自责倾向上的检出率(16%、6.3%)高于公办学校的学生(7.4%、3.3%),外地户口学生的学习焦虑检出率(13.3%)高于本地户口的学生(7.0%),本地户口学生身体症状的检出率(9.1%)高于外地户口学生(5.2%),差异均有统计学意义(P<0.05)。二元逐步logistic回归分析结果显示与父亲关系一般(OR=1.774,95%CI:1.061~2.968)和不知道如何寻求心理帮助(OR=1.707,95%CI:1.140~2.555)是影响学生心理健康的危险因素。结论:嘉定区小学生的心理健康状况问题不容忽视,学生的心理健康水平与父亲亲子关系及是否知道如何寻求心理帮助相关,家长和学校应共同努力,守护孩子的心理健康。

摘要：中国南方常压页岩气资源潜力大,主要分布于四川盆地周缘构造复杂区及盆外褶皱带,具有地表、地下双复杂地质条件,地震采集品质差、成像精度低、甜点参数变化规律不清。本文系统总结了渝东南地区常压页岩气地震采集、成像处理、储层预测等方面的研究成果与技术进展:①形成了变密度三维观测系统设计技术、灰岩地表复杂山地地震激发接收技术,确保复杂地下构造反射波场充分采样,提升采集资料品质,提高施工效率。②完善了复杂山地地震叠前预处理技术、盆缘过渡带复杂构造成像技术、盆外褶皱带向斜构造成像技术,成果剖面信噪比高,有效频带宽,构造成像精度高。③基于岩石物理特征研究,实现优质页岩厚度、地层压力系数、脆性的定量预测;基于统计岩石物理,实现页岩有机碳含量、含气量、孔隙度的定量预测;利用有限元应力场模拟技术,揭示古应力场演化,实现多期构造改造叠加作用形成裂缝的定量预测;采用组合弹簧模型今应力场预测技术,明确今地应力场分布规律。通过攻关研究,有效指导了常压页岩气甜点预测与勘探开发,为南川常压页岩气田的发现提供了依据。下步应重点攻关基于5G无线节点接收的更加科学合理的地震采集技术、复杂山地高陡构造高精度自动化成像处理技术,以及“地质—工程—经济”一体化的甜点地震评价方法。

摘要：介绍了蒙皮涂层耐沾污性的影响因素以及无光蒙皮面漆耐沾污的难点。对比了丙烯酸树脂体系无光、半光、高光漆膜的耐沾污性,并研究了氟碳树脂的添加量对无光漆膜耐沾污性的影响。结果表明:无光丙烯酸树脂体系的漆膜因消光粉添加量高,其表面粗糙度大,导致耐沾污性较差;在丙烯酸树脂体系中加入氟碳树脂,可提高无光漆膜的耐沾污性;且当丙烯酸树脂与氟碳树脂的比例接近1:1时,既能满所需的性能要求,又能降低成本。

摘要：通过粒子模拟对平顶型正弦波导返波管的器件性能进行预测,结果表明:在工作电流为9mA的条件下,调节工作电压从15~25kV,该返波管可以在207.82~233.44GHz的频带内产生大于1.96 W的输出功率。

摘要：对金融网络中异常资金流动的可视化研究是学术界和中国反洗钱监测分析中心一直关心的问题。金融网络的可视化能够提高监测和侦破效率。在金融网络仿真模拟平台的基础上,设计了账号节点的可视化交易网络图。该网络图给出了多个账号节点合理的布局显示方法,并从监测准则、显示方式、账号节点的曲线图、具体的资金流动链等方面详细地表示了账号节点之间的交易关系,使之从不同的角度实现了对资金异常流动的图形可视化。并在较大数量账号的显示方面提出了一种新的观点。

摘要：为获得并评价重组产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)三点突变体蛋白的毒力及免疫活性,对已知的D型产气荚膜梭菌ETX编码基因进行优化设计,同时引入包括第30和196位酪氨酸突变为丙氨酸,及第106位组氨酸突变为脯氨酸共3个氨基酸突变,并在该基因5'端添加Th细胞表位(T)和鞭毛蛋白(flagellin)N末端编码序列,经人工合成获得基因片段GTFNETXm3。随后,将该基因片段克隆至原核表达载体p ET30a-(+),转染BL21(DE3)菌诱导表达、纯化,从而获得重组蛋白,进而利用Western blot方法检测重组蛋白与D型产气荚膜梭菌抗血清的反应性,并检测其对犬肾细胞系(MDCK细胞)及小鼠的毒力。最后,将重组蛋白与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,免疫4只健康家兔,根据《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测一免及二免后兔血清的中和抗体效价。结果显示,重组蛋白主要以包涵体的形式存在,且能与D型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应;100μg/m L的重组蛋白未显示细胞毒性;6.25 mg/kg剂量的重组蛋白对小鼠无致死性;每毫升的一免抗血清可中和80~120个最小致死量(MLD)、二免抗血清可中和750~1100个MLD的D型产气荚膜梭菌毒素;用1个MLD的D型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔4/4保护。试验表明,产气荚膜梭菌ETX三点突变体的毒力基本消失,且保留了良好的免疫原性,是D型产气荚膜梭菌病基因工程亚单位疫苗的理想候选抗原蛋白。

摘要：为获得产气荚膜梭菌α毒素(CPA)的重组突变体,并评价其毒力和免疫原性,对已知的产气荚膜梭菌CPA编码基因进行优化设计,同时引入包括第56位和第130位的天冬氨酸(D)突变为甘氨酸(G),及第275位的酪氨酸(Y)和第336位的天冬氨酸(D)突变为天冬酰胺(N)的4个氨基酸突变。此外,在该基因5'端添加Th细胞表位(T)和鞭毛蛋白(flagellin)N末端编码序列,经人工合成获得基因片段GTFNCPAm4。将GTFNCPAm4克隆至原核表达载体p ET-30a(+)中进行表达与纯化,获得重组蛋白rTF_NCPA_(m4)。利用Western blot方法检测rTF_NCPA_(m4)与产气荚膜梭菌A型毒素抗血清的反应性,并检测该蛋白的卵磷脂酶和溶血活性以及对小鼠的毒力。随后,将重组蛋白与Montanide ISA 201佐剂以1∶1(V/V)的比例混合乳化,免疫家兔,检测兔血清的中和抗体效价。二免后21 d,对家兔通过耳缘静脉注射1个MLD剂量的A型产气荚膜梭菌毒素,以检测rTF_NCPA_(m4)对家兔的免疫保护效果。结果表明,rTF_NCPA_(m4)主要以包涵体的形式表达,且能与A型产气荚膜梭菌毒素产生血清反应;体外实验显示,rTF_NCPA_(m4)无卵磷脂酶和溶血活性;小鼠安全性实验显示,5.5 mg/kg剂量的rTF_NCPA_(m4)对小鼠无致死性;免疫重组蛋白后,每毫升的一免抗血清可中和10个MLD、二免抗血清可中和40个MLD的A型产气荚膜梭菌毒素;1个MLD的A型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔得到了100%(4/4)的保护。以上数据说明,表达的CPA重组突变体蛋白具有良好的安全性和免疫原性,为A型产气荚膜梭菌基因工程亚单位疫苗的研制提供了重要的实验数据。

摘要：采用巢式PCR方法获得未见报道的绵羊Nectin4基因。根据GenBank上登录的牛的Nectin4mRNA序列信息设计并合成10对引物;从绵羊肺支气管组织中提取总RNA,采用随机引物和Oligo(dT)将其反转录为cDNA;利用巢式PCR原理和PCR引物错配导致非特异反应的特点,改变常规PCR反应条件,将10对引物分为2组,通过两轮PCR即获得大小片段相符的片段;TA克隆后测序证实已成功获得绵羊Nectin4基因的完整ORF,证明本方法可作为一种获取未知基因的方法,较RACE等其他传统技术有明显优势;构建了重组表达质粒pCMV-Myc-Nectin 4,在CHO细胞的细胞质中获得高效表达,经Western-blot分析,表达的Nectin 4蛋白的大小与预期符合。绵羊Nectin4基因的成功扩增为后续对其在病毒入侵中的功能进行研究奠定了基础。