摘要：采用溶胶—凝胶旋涂技术在玻璃衬底上制备Al∶ZnO薄膜(AZO)。在500℃条件下,利用氮气和氢气两种气氛分别对样品进行热处理,并对热处理后的薄膜特性进行研究。结果表明,上述两种气氛下所制薄膜都具有六方纤锌矿结构与C轴择优取向性;扫描探针显微结果表明,氮气气氛下薄膜形貌呈金字塔形,与氢气气氛所制薄膜差异明显;紫外可见光透射光谱图结果表明,氢气气氛下所制薄膜可见光透过率超过60%,高于氮气气氛所制样品,这可能与薄膜表面形貌有关。

摘要：背景:急性髓系白血病采用化疗方案效果欠佳,而异基因造血干细胞移植虽然是最有效的治疗方法,但寻找到HLA相合的供者概率较低,且易发生严重并发症。目的:评价自体造血干细胞移植对急性髓系白血病的改善效果。设计、时间及地点:回顾性病例分析,于1989-01/2007-03在解放军总医院血液科完成。对象:选取急性髓系白血病患者77例,中位年龄27.6岁,均同意行自体造血干细胞移植,实验经医院医学伦理委员会批准。单次造血干细胞移植72例,其中自体外周血造血干细胞移植21例、自体骨髓移植51例;移植前CR1期69例,CR2期2例,CR3期1例。双次造血干细胞移植5例,其中均为自体骨髓移植1例,其余4例分别为首次进行骨髓移植和第2次进行自体外周血造血干细胞移植,移植前均为CR1期。方法:骨髓移植患者按单个核细胞(0.8～1.5)×108/kg采集骨髓细胞,外周血干细胞移植患者在联合化疗后行粒系-巨噬集落刺激因子动员,当白细胞>5.0×109L-1时采集造血干细胞。骨髓移植及外周血干细胞移植患者回输单个核细胞中位数分别为2.62×108/kg,4.03×108/kg。25例患者行TLI预处理方案,47例患者行TBI预处理方案,5例患者行不含TBI的高剂量化疗预处理方案。9例患者给予移植后治疗,接受VP/MM维持化疗3例,接受白细胞介素2+干扰素α免疫维持治疗4例,三者联合维持化疗2例。移植后每3个月进行随访,定期检测血常规、骨髓象等变化。主要观察指标:移植后造血重建情况、存活情况以及维持治疗对患者骨髓功能的影响。结果:所有患者均获得髓系造血重建。72例单次自体造血干细胞移植患者无病存活42例,其中移植前CR1期41例,CR3期1例,至今无病存活率58.3%;5例双次自体造血干细胞移植患者至今无病存活4例。定期进行血象和骨髓象复查,均未发现移植后维持治疗对患者骨髓功能有明显影响,患者对维持治疗的耐受性良好。结论:自体造血干细胞移植治疗急性髓系白血病安全有效,可改善难治急性髓系白血病患者预后。

摘要：肿瘤免疫治疗是继手术、放疗和化疗之后第4种有效的癌症治疗方法,免疫检查点阻断疗法是其中最有效的策略之一.PD-1/PD-L1是目前最受关注的免疫检测点(immune checkpoint)蛋白,以其为代表的免疫检测点抗体抑制剂已经应用到临床并取得良好的治疗效果.本研究针对PD-1/PD-L1相互作用,用ELISA方法建立了PD-1/PD-L1抑制剂活性筛选模型,并用已知抑制剂对实验模型的有效性进行了验证.最后利用该模型对32个植物来源的天然产物样本进行了活性筛选,发现其中2个来自于苍耳和落葵薯的提取物样品对PD-1/PD-L1有一定抑制作用.

摘要：利用溶胶—凝胶旋涂技术在玻璃衬底上制备了不同铝掺杂量ZnO薄膜,再利用氮气气氛在500℃条件下对样品进行热处理。利用X射线衍射仪(XRD)、扫描探针显微镜(SPM)和紫外一可见光谱仪对薄膜结构形貌及光学性能进行分析表征。结果表明,所制薄膜具有六方纤锌矿结构,且随着掺杂量的变化,薄膜择优取向发生转变;薄膜可见光透过率与掺杂量呈负相关关系,掺杂量越高,可见光透过率越低;SPM结果显示在***%铝掺杂量下的样品表面出现柱状结构形貌,且晶粒粒度最小,表面粗糙度最低,表明薄膜表面形貌形成过程与铝掺杂量密切相关。

摘要：目的研究小干扰RNA片段（shRNA）对三氧化二砷（ATO）耐药的白血病细胞株K562／AS2细胞的TopoⅡα、TopoⅡβ基因表达及其功能的影响。方法设计并合成针对TopoⅡα和TopoⅡβ基因序列的shRNA各3对，在脂质体的介导下转染K562／AS2细胞；用荧光实时定量聚合酶链反应（PCR）分析TopoⅡα、TopopⅡβ mRNA的表达水平；流式细胞术检测TopoⅡα、TopoⅡβ蛋白表达。结果针对TopoⅡα—shRNA、TopoⅡβ的shRNA作用于K562／AS2细胞24h后，TopoⅡα mRNA水平和蛋白水平最大下调为（78．22±0．01）％、（31．17±1．27）％（P〈0．05），TopoⅡβ mRNA水平和蛋白水平最大下调为（57．36±0．01）％、（23．98±1．22）％（P〈0．05）。结论转染24h后针对TopoⅡ的shRNA可抑制对ATO耐药的白血病细胞株K562／AS2细胞TopoⅡ基因的表达。

摘要：目的预测及鉴定新的HLA-A*0201结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Ag85A中的CD8+CTL优势表位。方法应用数据库SYFPEITHI预测可能存在的HLA-A*0201的限制性CD8+CTL表位,并经流式细胞术分析抗原肽与HLA-A*0201的亲和力、经时间荧光分辨法检测结核(TB)患者外周血单个核细胞(PBMCs)对抗原肽的增殖反应,再通过细胞毒实验研究抗原肽诱导的T细胞毒杀伤活性,逐步鉴定Ag85A的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。结果位于Ag85A氨基酸序列(48-56)的肽表位与HLA-A*0201分子具有较高的亲和力,并能刺激HLA-A*0201阳性结核患者PBMC增殖,诱导产生具有特异性杀伤活性的CTL。结论肽6(GLPVEYLQV,48-56aa)是Mtb抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CD8+CTL的优势表位,这为今后进一步研究结核杆菌,作为设计结核疫苗的候选表位奠定了一些基础。

摘要：　目的　构建泡球蚴18(Em18)基因的原核表达质粒,获得高效表达、有生物活性的Em18重组蛋白,为包虫病诊断试剂的研制奠定基础。　方法　用DNAman软件设计引物,分别在引物5′端和3′端添加EcoRⅠ和 XhoⅠ酶切位点,以pMD18 T/Em18原核表达质粒为模板,PCR扩增Em18基因片断,经酶切,克隆入原核表达载体 pET 41a(+),构建原核表达质粒 pET41a Em18;转化大肠埃希菌BL21(DE3),酶切、PCR及测序鉴定其插入序列的正确性。经 IPTG诱导表达 rEm18 GST重组蛋白和GST重组蛋白,用谷光甘肽 Sepharose 4B亲合层析柱分别进行纯化,通过 SDS PAGE和Western blot试验分析鉴定。　结果　测序表明构建的 pET41a Em18 原核表达质粒均为正确连接,插入 Em18 基因片断为486 bp。SDS PAGE检测表明Em18基因以 rEm18 GST重组蛋白的方式得到成功表达,在相对分子质量单位 50ku处有表达条带;Western blot分析显示,rEm18 GST重组蛋白能被泡型棘球蚴病人阳性血清识别,具有良好的抗原性。　结论　成功构建了 pET41a Em18原核表达质粒,获得的 rEm18 GST重组蛋白具有生物活性和抗原性,有望应用于泡型包虫病诊断试剂的研制。

摘要：目的探讨纯化的重组结核分枝杆菌多表位肽激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic Tlymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型结核疫苗的设计打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的重组表达多表位肽刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生的增殖反应和细胞毒活性,初步鉴定重组多表位肽的免疫原性。结果以刺激系数(SI)>3为界,多表位肽(10μmol)能刺激全部10例HLA-A*0201阳性(A2+)结核菌素阳性(PPD+)健康个体的PBMC发生增殖,SI为46.2±5.6;增殖反应明显高于单肽(平均SI为10.2±2.3)以及PPD(平均SI为15.6±3.6)引起的细胞增殖反应(P<0.01)。在多表位肽诱导的CTL细胞毒活性分析中以负载抗原肽(10μmol)的T2细胞作为靶细胞,多表位肽诱导的CTL作为效应细胞,多表位肽能诱导全部的10例A2+PPD+健康个体中CTL杀伤活性,平均活性分别为(86.2±9.6%),显著高于单肽[平均为(25.4±3.6)%]和PPD[平均为(22.6±2.8)%](P<0.01)。结论重组优化多表位肽在细胞水平具有较好的免疫原性,能有效刺激PBMC产生细胞增殖反应和细胞毒活性。

摘要：为探究不同植物群落内PM_(2.5)中重金属质量浓度的时空变化规律及影响因素,选择2017年3月、4月(春季)和2017年2月、12月(冬季),于浙江农林大学东湖校园选取常绿灌丛、常绿阔叶林、针阔混交林、落叶阔叶林和疏林草地5种群落作为研究对象,采用智能中流量TSP采样器采集空气中的PM_(2.5),通过电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测样品上重金属的组成及质量浓度。结果表明:在5种植物群落内,PM_(2.5)中11种重金属的总质量浓度平均值为冬季(897.14±90.39 ng·m^(-3))>春季(599.24±59.36 ng·m^(-3));春、冬季,PM_(2.5)的质量浓度和PM_(2.5)中重金属的总质量浓度平均值的空间变化基本一致,均为疏林草地最高,常绿阔叶林最低,PM_(2.5)中重金属的总质量浓度平均值为疏林草地(841.96±77.65 ng·m^(-3))>常绿灌丛(799.21±73.97 ng·m^(-3))>落叶阔叶林(774.40±76.44 ng·m^(-3))>针阔混交林(703.68±69.30 ng·m^(-3))>常绿阔叶林(621.70±64.63 ng·m^(-3));Cr、Mn、Cu、As、Sb、Zn和Pb 7种重金属质量浓度的季节变化明显(P0.05)。风景园林师规划和设计城市绿地时,应选取抗污染能力和适应能力强的树种,合理构建植物群落结构,保持林下空间的通透性。

摘要：为了获得超声辅助提取蛹虫草废菌质中类胡萝卜素的最适工艺参数,在筛选出最适提取溶剂的基础上,通过单因素和响应面法进行优化。通过单因素试验确定最适单因素条件:乙醇浓度70%、料液比1∶60、超声功率400W、超声时间20 min、提取时间15 min、提取温度50℃。在单因素试验基础上,选取乙醇浓度、超声功率、提取温度为自变量,类胡萝卜素提取率为响应值,采用Box-Behnken试验设计建立回归模型。根据回归模型,在料液比1∶60、超声时间20 min、提取时间15 min的条件下,确定类胡萝卜素最高提取率的优化组合为乙醇浓度71%、超声功率418 W、提取温度51℃。在此条件下,类胡萝卜素提取率的预测值为626.80μg/g,验证试验所得类胡萝卜素提取率为637.50μg/g。回归方程的预测值和试验值差异不显著,所得回归模型拟合程度较好,具有一定的实践指导意义。