摘要：目的应用蛋白质组技术筛选人食管癌(esophageal cancer,EC)顺铂耐药相关蛋白。方法采用顺铂(cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)浓度递增法、间歇作用方式建立EC9706顺铂耐药细胞系(EC9706/CDDP),应用细胞培养稳定同位素标记(cell culture and stable isotope labeling,SILAC)、质谱(mass spectrometry,MS)筛选和鉴定食管癌耐药相关的蛋白。结果共鉴定出耐药相关的74种差异表达蛋白,其中53种在EC9706/CDDP中表达显著升高和21种表达明显降低。结论筛选的EC9706/CDDP耐药相关蛋白对进一步阐明肿瘤多药耐药分子机制具有重要理论意义和应用价值,并为逆转多药耐药表型的药物设计提供了新的分子靶点。

摘要：本研究探讨了L-茶氨酸对氧化应激断奶仔猪生长性能、抗氧化能力及免疫功能的影响。试验采用2×2二因素设计,160头断奶仔猪(7.53kg±0.51kg)随机分为4个处理组:1组(日粮中不添加L-茶氨酸,腹腔注射5mL生理盐水);2组(日粮中不添加L-茶氨酸,腹腔注射8 mg/kg体重敌快死);3组(日粮中添加1 000mg/kg L-茶氨酸,腹腔注射5mL生理盐水);4组(日粮中添加1 000mg/kg L-茶氨酸,腹腔注射8mg/kg体重敌快死)。预试期7d,正试期28d。结果显示:(1)与1组相比,2组仔猪平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)显著降低,而料重比显著升高(P<0.05);与2组相比,4组仔猪ADG显著增加(P<0.05)。(2)与1组相比,2组仔猪血清丙二醛(MDA)含量显著增加,而总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著下降(P<0.05),3组仔猪血清MDA显著降低,而T-AOC显著增加(P<0.05);与2组相比,4组仔猪血清MDA含量显著降低,而T-AOC和GSH-Px活性显著上升(P<0.05)。(3)与1组相比,2组仔猪血清IgA、IgG、IL-2、IL-4水平显著增加,C3和C4水平显著下降(P<0.05),3组仔猪血清IgA、IgG和IL-4水平显著降低,而C3和C4水平显著增加(P<0.05);与2组相比,4组仔猪血清IgA、IgG、IL-2、IL-4水平显著降低,而血清C3水平显著增加(P<0.05)。结果表明,注射敌快死可引发仔猪氧化应激,造成生长性能下降、体液免疫能力下降;日粮中添加1 000mg/kg L-茶氨酸可缓解仔猪氧化损伤,提高氧化应激仔猪的生长性能、抗氧化能力和体液免疫能力。

摘要：目的调查四川省老年人心理健康状况,分析其影响因素,在积极老龄化视域下为改善老年人心理健康状况提供依据和对策。方法 2019年3—8月对四川省658名老年人采用自行设计一般情况问卷和老年人心理健康自评工具开展调查。结果老年人心理健康总分为48.76±7.31,调查对象中有444名老人(67.5%)存在轻度及以上的心理问题,其中300名老人(45.6%)存在轻度心理问题,144名老人(21.9%)存在中度心理问题。多元回归分析结果显示,养老模式、年龄、文化程度、原职业和个人经济保障均是老年人心理健康状况的影响因素(均P<0.05)。结论四川省老年人的心理健康状况不容乐观,受养老模式、年龄、文化程度及职业和经济保障等多种因素的影响。应提高对老年人心理健康的重视程度,尤其是社区居家养老、高年龄段、低文化程度、职业为体力劳动者及低收入的老年人作为心理健康干预的重点对象,在积极老龄化视域下给予有效的心理咨询和心理疏导,发挥其巨大潜能,改善心理健康状况,从而实现老有所乐。

摘要：黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根据黑曲霉脂肪酶LIP的氨基酸序列及毕赤酵母密码子的偏爱性,设计合成26条相互重叠20 bp的引物,通过组装PCR分别合成lip基因的4个片段lipA1(300bp)l、ipA2(237 bp)l、ipA3(234 bp)和lipA4(210 bp)。再以基因头lip1和基因尾lip26为引物,以lipA1l、ipA2l、ipA3和lipA4混合物为模板进行第二轮PCR扩增,得到的产物经加A处理后,连接到载体pMD18-T上,挑取重组子测序。通过PCR扩增对人工合成的基因进行校正,得到完全正确的lip基因。将优化后的基因克隆到表达载体pPIC9K上,获得的重组质粒pPIC9K-lip经线性化后转化毕赤酵母GS115菌株,构建分泌型表达LIP的酵母工程菌,G418梯度筛选,得到高拷贝稳定整合菌株。为重组黑曲霉脂肪酶的规模化制备奠定了基础。

摘要：目的　应用微矩阵 (microarray)技术 ,结合生物信息学 (bioinformatics)技术筛选并克隆丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白5A(NS5A)的反式激活基因 ,阐明慢性HCV感染、肝纤维化及肝细胞癌 (HCC)的等相关疾病的发病机制。方法　根据HCV H病毒株序列设计、合成序列特异性的引物。以含有全长HCV H株cDNA的pBRTM 3 0 11质粒DNA作为模板 ,进行多聚酶链反应 (PCR)扩增 ,获得的HCVNS5A编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定 ,构建真核表达载体pcDNA3 1(-) NS5A。以pcD NA3 1(-) NS5A转染肝母细胞瘤细胞系HepG2 ,提取总RNA ,逆转录为cDNA后进行表达谱基因芯片分析。应用分子生物学技术 ,结合生物信息学技术 ,克隆HCVNS5A反式激活作用的新的靶基因。结果　构建了真核表达载体pcDNA3 1(-) NS5A ,经过限制性内切酶作图分析和核苷酸序列分析证实正确无误。以pcDNA3 1(-) NS5A转染HepG2后提取总RNA ,逆转录后进行表达谱基因芯片技术分析。应用分子克隆技术结合生物信息学技术克隆NS5A反式激活的新型靶基因 ,命名为NS5ATP13 ,在GenBank中登录 ,登录号为D2 12 62。NS5ATP13基因的编码序列全长为 2 10 3个核苷酸 (nt) ,编码产物由 70 0个氨基酸残基 (aa)组成。结论　丙型肝炎病毒NS5A基因产物具有显著的反?

摘要：将基于BP网络的PID控制方法用于气动位置比例系统的控制 ,设计实现了用微机控制的比例阀—无杆气缸缓冲定位系统 实验表明 ,该控制方法具有较强的鲁棒性 。

摘要：目的了解甘肃省、宁夏回族自治区和内蒙古自治区吸毒成瘾人群主要医疗用药物滥用的获得途径,为规范医疗用药品监管提供科学依据。方法采用自行设计的调查问卷,对北方三省区强制隔离戒毒所内抽取的5 677例吸毒成瘾者,开展流行病学调查。结果复方地芬诺酯片、曲马多、三唑仑和地西泮主要来源于正规药店和正规诊所,且以私下购买为主;盐酸哌替啶主要来源于朋友、黑市和医院。结论应高度关注医疗用药物存在的滥用风险,加强有滥用潜力医疗用药物的共治监管,消除在基层销售和使用环节的监管盲区,最大限度减少特殊药品的流弊。

摘要：目的:构建含结核分枝杆菌38kD蛋白基因的真核表达载体并转染HEK293T细胞,高效表达分泌性38kD蛋白。方法:设计合成的结核分枝杆菌38kD基因被克隆到T载体,然后亚克隆到真核表达载体pcDNA3.0,经酶切鉴定正确后,PEI转染法导入293T细胞,换不含血清的DMEM培养基培养3 d后收集细胞及上清,采用Western印迹检测38kD蛋白的表达。结果:酶切结果显示,获得正确的含38kD基因的重组表达载体;Western印迹结果显示表达载体导入293T细胞中后能在细胞及上清中检测到38kD蛋白表达。结论:构建了含重组结核分枝杆菌38kD蛋白基因的真核表达载体pcDNA3.0-38kD,该载体可在哺乳动物细胞HEK293T中高效分泌性表达38kD蛋白,为结核病诊断试剂盒研发奠定了基础。

摘要：为实现同区域内全户内变电站设计、施工同步进行,避免后期噪声治理的高投入,监测西北某330kV户内变电站主要声源设备,分析其源强及频谱特征。采用Sound PLAN噪声软件对330kV/110kV合建户内变电站建立三维仿真模型,预测分析主要声源对站外声环境的影响,进行降噪设计兼顾去工业化设计,结果表明拟建330kV/110kV合建户内变电站站界及站外声环境敏感目标均能满足相应标准要求,为同类工程噪声控制提供参考。

摘要：考虑到海南基本地形结构与气候条件,阐述在该区域修路的难点,设计一种沥青混凝土路面工程使用技术。经过前期准备分别按照3%和5%两种孔隙率级配配制沥青混凝土,将这两种沥青混凝土分别在固定区域搅拌,运输到施工区域摊平后,使用两种压路机相互配合将沥青混凝土路面压实后通车。检测该施工技术下,沥青混凝土路面的抗水损伤、车辆荷载力学性能以及在高温下的耐久性。试验结果显示,使用该沥青混凝土路面工程施工技术后,5%孔隙率级配的沥青混凝土路面具有较高抗水损伤性能与车辆荷载力学性能;5%孔隙率级配的沥青混凝土受到持续高温影响,应力升高路面会出现细小裂缝,地下10m区域应力升高最为严重,裂缝的出现会降低沥青混凝土路面的耐久性。