摘要：目的探讨DNA分枝结构特异性内切酶-1(FEN1)基因敲低细胞株及对照细胞株的差异表达基因,用实时荧光定量PCR方法进行结果验证。方法从293T野生型及293T FEN1敲低细胞株中提取RNAs,并反转录成cDNA;挑选10个转录组测序中差异表达的基因,设计引物,利用SYBR Green染料法,定量检测挑选基因的表达情况。结果挑选的10个差异表达基因中,成功扩增了其中7个基因;通过实时荧光定量PCR方法对两组细胞的7个基因进行定量检测发现,与转录组测序结果相比较,其中有2个没有明显差异,另外5个基因荧光定量方法的检测结果与转录组测序结果一致。结论在细胞内基因表达水平检测中,为提高转录组测序结果的可靠性,还需通过实时荧光定量PCR方法对其结果进一步验证。

摘要：目的探讨出院满1年脑卒中患者的健康行为水平现状,分析其影响因素。方法采用自行设计的一般资料问卷和脑卒中患者健康行为量表,对2019年8—12月在广东省深圳市第二人民医院脑卒中护理门诊就诊的106例出院满1年的脑卒中患者进行问卷调查。结果出院1年后脑卒中患者的总体健康行为处于中等偏上水平。单因素分析中,不同性别、文化程度、婚姻状况、月收入和合并慢性病种类脑卒中患者健康行为评分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,性别、文化程度、婚姻状况是健康行为的影响因素(P<0.05),能解释健康行为水平变异量的30.8%。结论出院后1年的脑卒中患者的健康行为水平整体较高,但运动和责任方面有待提高;在健康教育时,应对男性、文化程度水平低以及离异或丧偶人群着重关注,帮助建立坚持健康行为,减少疾病的再复发,提高生活质量。

摘要：背景:当前针对患者骨健康/骨密度相关疾患结局指标的影响,传统太极功法干预仍然存在较大的争议,亟待作进一步探讨。目的:系统评价传统太极功法干预对改善骨密度流失的临床疗效与安全性。方法:通过计算机对中国知网CNKI、万方、维普VIP和中国生物医学文献数据库、以及国外数据库PubMed、MEDLINE、EMbase、CochraneLibrary等进行全面检索;配合对大学图书馆的馆藏期刊进行手工检索,检索时间截于2019年1月;系统搜集传统太极功法(包括太极拳、太极推手、太极柔力球等)干预对骨健康/骨密度相关疾患结局指标影响的随机对照研究(RCT)文献。参考Cochrane系统评价方法进行文献筛选、资料提取以及方法学质量评价;并采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果与结论:共纳入14篇文献(16个RCT研究),Meta分析结果表明:接受传统太极功法干预后,脊柱腰椎L2-4骨密度(SMD=0.40,95%CI[0.16,0.65],P=0.001)、以及股骨颈骨密度(SMD=0.75,95%CI [0.27,1.24],P=0.002)改善方面均优于对照组;然而在Ward’s三角骨密度(SMD=0.50,95%CI[-0.10,1.10],P=0.10)、股骨干骨密度(SMD=0.16,95%CI[-0.11,0.44],P=0.25)、股骨近端转子骨密度(SMD=0.54,95%CI[-0.01,1.09],P=0.05)、以及桡骨远端1/3处骨密度(SMD=0.20,95%CI[-0.26,0.66],P=0.040)与对照组比较,组间差异无统计学意义;且传统太极功法干预尚未发现严重不良事件。当前证据发现,传统太极功法干预在特定人群(例如老年人、骨质疏松人群、围绝经期与绝经后妇女)脊柱腰椎、股骨颈等部位的骨密度流失改善方面疗效明确,不良反应较少。鉴于纳入文献数量偏少以及研究本身局限性,有待开展高质量的、设计严谨的临床试验予以进一步验证。

摘要：以土壤线虫群落组成及结构为研究对象,研究我国黄淮海平原冬小麦样地土壤线虫群落对施肥量变化的动态响应模式.实验采用随机区组设计,设置4种施肥处理,分别为N1:50 kg N·ha-1·yr-1, N2:100 kg N·ha-1·yr-1, N3:150 kg N·ha-1·yr-1及N4:300 kg N·ha-1·yr-1.实验结果表明,随着施肥量的增加,冬小麦的生物量显著增加,但土壤pH值显著下降.土壤线虫的种群密度在冬小麦拔节期达到峰值.随着施氮量的增加,土壤线虫的数量显著增加,但群落的物种丰富度显著下降.施肥量的变化对食细菌性线虫没有影响,但显著降低了杂-捕类线虫的相对数量,N2处理显著提高了植食性线虫的相对数量,而N4处理显著降低了食真菌性线虫的相对数量.以上实验结果表明,土壤线虫群落中不同营养类群对施肥量变化的响应并不相同.随着施肥量的增加,土壤线虫群落趋向简单化.以上实验结果对于寻求我国黄淮海平原冬小麦产区最佳施肥方案及田间虫害防控具有一定指导意义.

摘要：目的构建包含FANCJ野生型(wt)及其突变体N196S蛋白的真核表达载体,并对纯化的野生型蛋白及突变体蛋白进行活性检测。方法从HEK293T中提取RNA,并反转录为cDNA,使用带有3xFlag标签序列的特异性引物通过PCR方法扩增出人FANCJ编码区全长,并克隆到plvx-EF1-MCS-PGK-PURO载体上;突变体N196S利用NEBaseChanger TM引物设计工具,并利用NEB公司的点突变构建试剂盒Q5? SiteDirected Mutagenesis Kit技术进行操作。重组的FANCJ及突变体N196S表达质粒通过脂质体polyJet转染到HEK293T细胞中进行表达。使用免疫沉淀及竞争洗脱的方法纯化FANCJ及N196S突变体蛋白。利用荧光标记DNA底物的方法检测FANCJ及N196S突变体蛋白的DNA解旋酶活性。结果 FANCJwt基因及N196S突变体全长编码序列成功构建到plvx-EF1-MCS-PGK-PURO载体上,蛋白质印迹法(Western blot)及PAGE胶银染方法成功检测到了FANCJwt及N196S突变体蛋白的表达、纯化,荧光标记Oligo DNA底物方法发现FANCJwt与N196S突变体蛋白DNA解旋酶活性存在差异。结论成功构建了FANCJwt及N196S突变体真核表达载体,通过生化实验发现FANCJ及N196S突变体蛋白存在差异的DNA解旋酶活性。