摘要：目的截短表达小反刍兽疫病毒M蛋白基因并将其用于多抗血清的制备。方法之前有研究未能表达完整的M蛋白,而若在抗原性较弱的区域将其一分为二,以截短的形式进行表达,却能达到较理想的水平。因此根据GenBank上公布的PPRV M基因的序列,设计1对特异性引物,扩增出480bp的目的基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,得到重组表达质粒pET-32a-PPRV-M1,后转化至Rosetta感受态细胞中,IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE和Western blot试验对重组蛋白进行鉴定,将纯化后的重组蛋白免疫6周龄BALB/c雌鼠,制备多克隆抗体血清。结果经SDS-PAGE及Western blot鉴定,证明截短的M基因的蛋白主要以包涵体形式高效表达并具有良好的反应原性。结论成功克隆表达了截短的小反刍兽疫病毒M基因的蛋白并制备了多抗血清,为建立血清学相关的检测方法及临床治疗奠定了基础。

摘要：目的对发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)RNA PCR扩增引物进行优化,提高患者血清中SFTSV核酸检测的灵敏度和特异度。方法自行设计(L1、M1、S1)并参考文献报道(L2、M2、S2)选用引物12对,分成6组,巢式PCR方法分别扩增22例发热伴血小板减少综合征(SFTS)确诊病例和20例正常人血清中SFTSV RNA的L、M和S片段,基因克隆后进行DNA测序,计算不同引物扩增的灵敏度与特异度并进行比较,研究病毒检出率与血清采集时间的关系。结果不同引物RT-PCR扩增SFTS患者血清中SFTSV RNA的L、M和S片段的灵敏度不同。从生物学意义上看,S片段灵敏度最高,其次是L片段,未扩出M片段。血清中病毒RNA检出率,7 d内为64.3%,7～14 d为37.5%,应用确切概率法分析,P>0.05(=0.377),二者差异无统计学意义。正常人血清中未扩增出SFTSV RNA任何片断,所有引物检测的特异度均100%。结论 PCR检测SFTS患者血清中SFTSV RNA时,可优先选择S1引物。

摘要：目的探讨超薄臂内侧穿支皮瓣游离移植修复手部皮肤深度缺损的疗效。方法采用超薄臂内侧穿支皮瓣游离移植修复16例手部皮肤深度缺损患者。皮肤缺损面积4.0 cm×1.5 cm~8.0 cm×5.0 cm,皮瓣设计切取面积4.0 cm×2.0 cm~8.0 cm×6.0 cm。结果16例皮瓣中15例顺利成活,1例术后出现血管危象,经探查修复手术后成活。患者均获得随访,时间3~20个月。移植皮瓣外形、色泽、弹性良好,不需要二期修薄。末次随访时,手部关节活动不受限,无手部功能障碍;皮瓣两点辨别觉为5~10 mm。结论超薄臂内侧穿支皮瓣游离移植修复手部皮肤深度缺损,供区较隐蔽,皮肤色泽与周围接近,皮瓣质地好,无需修薄,便于恢复受区外形与功能,是修复手部软组织缺损的较理想方法。

摘要：湖北省农业面源污染负荷及评价系统的编码语言为C#语言,在Visual Studio 2010环境下编译,数据库通信及操作采用***技术,Excel文件操作采用NPOI技术。该系统将湖北省农业面源污染数据及种植模式数据集中到一个平台进行数据管理,并从不同角度对农业面源污染数据进行展示、分析统计、评价。系统实现依据登录用户等级展示用户权限范围内的数据及分析评价结果。系统可以对不同农业污染源产生的污染负荷进行估算。系统的估算结果可以保存至文档,展示的数据都可以导出在Excel文件,用户可以通过导入Excel文件新增数据。

摘要：宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究根据3种真菌基因内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)区域的序列差异设计4条引物,通过优化多重PCR反应条件,建立了一种可同时快速检测这3种真菌的多重PCR,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286、596、188 bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6、8.8、13.6pg/μL;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示阳性检出率分别为74.07%(20/27)和83.72%(36/43);采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56);两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本研究建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。

摘要：目的研究建立实时荧光定量(RFQ)-PCR法测定TRAIL mRNA含量的方法,探讨其在隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中表达的检测价值,并分析隐球菌性脑膜炎患者免疫指标与TRAIL的相关性。方法设计特异性的引物和探针,以人基因GAPDH为内参照,用实时定量PCR的方法检测35例健康人和35例隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL mRNA的表达水平,采用特定蛋白分析仪测定IgG、IgA、IgM、C3、C4。结果与健康人比较,隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL mRNA的表达明显下降(P<0.01)。隐脑患者血清中的C3和IgG显著下降(P<0.01),且与TRAIL的变化成正相关。结论隐球菌性脑膜炎患者TRAIL下降,提示TRAIL可能参与隐球菌性脑膜炎的疾病进程,这为有效治疗隐球菌性脑膜炎提供了新的线索。

摘要：从提供全程支持城市环境地质调查评价主流程信息化的技术手段出发,依据城市环境地质调查评价规范,制定了统一的数据库标准,对城市环境地质调查信息化建设的总体框架进行了设计,分析了城市环境地质调查评价信息系统组成、功能及应用模式,重点研制了为调查评价各过程服务的相应计算机分析处理系统,并得到了实际的推广应用。

摘要：目的探讨HCV RNA对HIV和HCV合并感染者接受高效抗反转录病毒治疗（highly active antiretroviral therapy，HAART）后疗效、肝脏功能和血脂的影响。方法招募我国河南既往有偿供血人群中接受HAART治疗的HIV／HCV合并感染者275例，每6个月随访一次，定期检测HCV RNA、HIV RNA、CD4T淋巴细胞计数、肝脏功能指标和血脂等实验室指标，采用卡方检验、成组设计秩和检验比较HCV RNA阳性组和HCV RNA阴性组HAART治疗后HIV病毒抑制率、免疫学应答、肝损伤和血脂的差异。结果HAART治疗6月以上患者中，HCV RNA阳性组和HCV RNA阴性组HIV完全抑制率差异无统计学意义（45．6％vs．38．5％，Х^2=1．150，P〉0．05）；HAART治疗前（286个／μl vs．209个／μl，Z=0．734，P=0．463）、治疗后6个月（310个／μl vs．362个／μl，Z=0．562，P=0．574）、12个月（378个／μl vs．289个／μl，Z=1．091，P=0．275）、18个月（363个／μl vs．288个／μl，Z=1．435，P=0．151）、24个月（413个／μl vs．348个／μl，Z=0．939，P=0．348）CD4^＋T淋巴细胞计数在HCV RNA阳性组和HCV RNA阴性组间差异无统计学意义。HCV RNA阳性组血清ALT（55．0U／L vs．29．5U／L，Z=6．789，P〈0．01）、AST（46．0U／L vs．33．0U／L，Z=4．890，P〈0．01）、TBIL（9．3mmol／L vs．7．2mmol／L，Z=3．748，P〈0．01）水平显著高于HCV RNA阴性组；HCV RNA阳性组HAART治疗后发生肝损伤的风险显著高于HCV RNA阴性组（调整后优势比aOR=3．8，P〈0．01）。HIV／HCV合并感染者HCV RNA阳性组TG水平显著低于HCV RNA阴性组（1．2mmol／L vs．1．4mmol／L，Z=1．936，P=0．043）、而HDL-C水平显著高于HCV RNA阴性组（1．5mmol／L vs．1．3mmol／L，Z=2．251，P=0．024）。结论HCV RNA对HIV／HCV合并感染者HAART治疗后HIV病毒抑制率无影响，亦不影响HAART治疗后CD4^＋T淋巴细胞的恢复；HCV RNA是HIV／HCV合并感染者HAART治疗后肝损伤的独立危险因素，但可能减轻HAART治疗引起的血脂异常。

摘要：根据用二次旋转回归设计方法建立的合金剂与硬度、磨损体积之间的回归方程,利用遗传算法对其进行了最优解寻优,并对寻优结果作了分析比较。GA优化得到了合金剂最佳配比,且相同约束条件下,其优化结果优于混合罚函数法。

摘要：目的克隆羊口疮病毒QH02株ORF011基因并进行序列分析及原核表达、鉴定。方法提取羊口疮病毒QH02株的DNA,根据GenBank中(GU320351.1)的序列设计并合成引物,PCR扩增ORF011基因。将测序正确的序列用生物信息学软件对其基因及蛋白的结构进行预测,并将基因构建至pET-32a(+)原核表达载体,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),挑取阳性克隆测序正确后用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside, IPTG)诱导表达,经十二烷基硫酸钠-十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)、Western-blot验证重组蛋白反应原性。结果 PCR扩增得到1 137 bp的ORF011基因片段,重组蛋白在大肠埃希菌中以包涵体的形式存在,重组蛋白相对分子质量为60×10~3,且纯度较高,Western-blot检测结果表明目的蛋白具有较好的反应原性。结论构建的原核表达系统可以成功表达B2L蛋白,经Western-blot验证具有良好的反应原性,可作为羊口疮防控产品研发的候选分子。