摘要：目的建立多色荧光丙型肝炎基因分型检测方法。方法针对HCV5'NCR区特异性基因设计一对通用引物和Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ型特异性探针,Ⅰ型和Ⅲ型探针标记FAM荧光染料,Ⅱ/Ⅳ型标记VIC荧光染料,分别建立Ⅰ/Ⅱ型和Ⅲ/Ⅳ型两管双色荧光PCR扩增系统。分别采用测序和本研究方法对97份丙型肝炎阳性血清进行分型,比较两种方法分型结果的一致性,并对双色荧光法检测的2889例HCV分型结果进行分析。结果在97份丙型肝炎阳性血清中,双色荧光法分出Ⅰ型65例(67.0%),Ⅱ型25例(25.8%),Ⅲ型2例(2.1%),Ⅰ/Ⅱ混合型3例(3.1%),有2例HCVRNA定量为(1～3)×103IU/ml弱阳性标本未分出型;测序法分出Ⅰ型61例(62.9%),Ⅱ型24例(24.7%),Ⅲ型2例(2.1%),Ⅰ/Ⅱ混合型2例(2.1%),有8例HCVRNA定量结果为(1～5)×103IU/ml的阳性标本测序法未分出型,有1例Ⅰ/Ⅱ混合型标本测序无法判断,而荧光法分型明确。我院采用本研究建立的方法检测2889例临床丙型肝炎标本,2268份分出基因型,其中Ⅰ型1545例(68.1%),Ⅱ型702例(31.0%),Ⅰ/Ⅱ混合型18例(0.8%),Ⅲ型3例(0.1%),高HCV载量血清全部涵盖在Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型中,未发现Ⅳ型和其他型的病例。结论本研究建立的双色荧光HCV基因分型的方法具有良好的敏感性、特异性、可重复性且省时省力,由于近99%的HCV阳性血清为Ⅰ/Ⅱ型,所以临床可选择Ⅰ/Ⅱ型试剂进行常规检测,对高病毒载量而非Ⅰ/Ⅱ型的标本可采用Ⅲ/Ⅳ型试剂进一步分型明确。

摘要：目的监测我国不同地区10所教学医院分离的社区和院内常见病原菌的耐药性。方法按设计方案收集10所教学医院中分离出的肺炎链球菌、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌；菌株经中心实验室复核后，采用Etest法测定抗菌药物对肺炎链球菌的最低抑菌浓度（MIC），用琼脂稀释法测定抗菌药物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的MIC，数据输入WHONET5．4软件进行耐药性分析。结果在收集的353株肺炎链球菌中，青霉素敏感肺炎链球菌（PSSP）占74．2％，青霉素中介肺炎链球菌（PISP）占9．6％，耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）占16．2％；不同医院分离的肺炎链球菌对青霉素的敏感性也不尽相同，在测试的β-内酰胺类药物中，头孢呋辛的敏感性较低，为0～76．7％，头孢曲松和阿莫西林／克拉维酸的敏感性较高，PSSP组中分别为98．1％和98．9％，PISP组中分别为61．8％和64．7％，PRSP组中分别为15．8％和10．5％；267株大肠埃希菌产超广谱p内酰胺酶（ESBLs）的比率为56．2％，206株肺炎克雷伯菌为42．7％，对于产ESBLs菌株，头孢噻肟和头孢曲松的敏感性均较低，而头孢他啶的敏感性在测试的伊内酰胺类药物中相对较高；177株MSSA的β-内酰胺酶产酶率为73．4％，测试的β-内酰胺类抗菌药物对MSSA表现出很好的抗菌活性，敏感率98．9％～100．0％，环丙沙星和左氧氟沙星的敏感率分别为80．8％和88．1％。结论对于肺炎链球菌，氟喹诺酮类药物保持了较高的体外抗菌活性，头孢曲松和阿莫西林／克拉维酸在β-内酰胺类药物中表现较好；对于MSSA以及非产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，β-内酰胺类药物均表现出较高的抗菌活性，对于产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，头孢噻肟和头孢曲松的敏感性均较低，而头孢他啶、头孢吡肟和头孢哌酮／舒巴坦的敏感性相对较高。

摘要：目的对乙状窦后入路的骨瓣设计进行改良研究,寻找一种安全、快速、有效、并发症少的骨瓣开颅技术。材料成人颅骨标本10例,福尔马林固定尸头标本15例,新鲜头颅标本3例。高速磨钻。电动开颅钻。照像器械:Sony S-75数码相机。Leica M500-N,Opton手术显微镜。方法确定横窦和乙状窦的交界内下缘(A点)和星点(枕乳缝和人字缝交叉点,S点)的解剖关系;乙状窦垂直部和水平部交汇处内下缘(B点)和枕乳缝乳突基底水平处(C点)的关系。测量A-S和B-C点的距离。在距星点内侧3cm处横窦的下缘钻孔M点,测量星点和枕外粗隆-星点连线的垂直距离。结果1.横窦和乙状窦交点的位于星点外下方,横断面上,平均距离为10.8±1.1mm。在矢状位方向,平均距离为3.5±0.7mm。且颅骨和头颅标本无明显的统计学差异。2.乙状窦水平段和垂直段交点(B点)位于乳突基底水平枕乳缝点(C点)的外下方,在横断面上平均距离5.8±1.8mm。矢状位方向距离为8.4±0.8mm.头颅标本所测得的数据和颅骨的数据在统计学上无显著差异。3星点内侧3cm处横窦下缘(M点)和枕外粗隆-星点连线的垂直距离(M-P)左右存在差异,左侧1.2±0.3mm,右侧4.2±0.4mm.右侧高于左侧。结论行乙状窦后入路骨瓣开颅时,取星点外下方、枕乳缝乳突基底外下方为钻孔点是安全、快速的方法;在横窦下方钻孔时要注意左右横窦高度的。

摘要：胜利海上埕岛油田馆陶组为河流相沉积的高渗透、高饱和、稠油、疏松砂岩油藏。根据开发方案设计和数值模拟研究 ,馆陶组在地层压力降至饱和压力附近转注 ,开发效果和经济效益最好。由于实施注水工程滞后两年 ,油藏进入溶解气驱阶段 ,原制定的注水时机、注采比用 1 .0等技术政策已不能符合油田的实际情况 ,在对储层发育状况及馆陶组开采特征进一步认识的基础上 ,应用跟踪数值模拟技术 ,对埕岛油田馆陶组注水开发技术政策进行了优化和完善 ;实施注水后 ,通过强化跟踪分析 ,及时调整 。

摘要：中国南方常压页岩气资源潜力大,主要分布于四川盆地周缘构造复杂区及盆外褶皱带,具有地表、地下双复杂地质条件,地震采集品质差、成像精度低、甜点参数变化规律不清。本文系统总结了渝东南地区常压页岩气地震采集、成像处理、储层预测等方面的研究成果与技术进展:①形成了变密度三维观测系统设计技术、灰岩地表复杂山地地震激发接收技术,确保复杂地下构造反射波场充分采样,提升采集资料品质,提高施工效率。②完善了复杂山地地震叠前预处理技术、盆缘过渡带复杂构造成像技术、盆外褶皱带向斜构造成像技术,成果剖面信噪比高,有效频带宽,构造成像精度高。③基于岩石物理特征研究,实现优质页岩厚度、地层压力系数、脆性的定量预测;基于统计岩石物理,实现页岩有机碳含量、含气量、孔隙度的定量预测;利用有限元应力场模拟技术,揭示古应力场演化,实现多期构造改造叠加作用形成裂缝的定量预测;采用组合弹簧模型今应力场预测技术,明确今地应力场分布规律。通过攻关研究,有效指导了常压页岩气甜点预测与勘探开发,为南川常压页岩气田的发现提供了依据。下步应重点攻关基于5G无线节点接收的更加科学合理的地震采集技术、复杂山地高陡构造高精度自动化成像处理技术,以及“地质—工程—经济”一体化的甜点地震评价方法。

摘要：为了研究猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)Cap蛋白能否模拟PCV2在体外刺激外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),使猪白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)和IL-17A基因转录水平发生变化,试验根据IL-21和IL-17A的基因序列,设计引物,利用实时荧光定量PCR检测IL-21和IL-17A基因的转录水平。为进一步分析IL-21和IL-17A转录调节的机制,研究还通过实时荧光定量PCR检测了PD-L1的转录水平。结果表明:PCV2 Cap蛋白和PCV2在体外均能刺激PBMCs,导致IL-21、IL-17A和PD-L1基因的转录水平升高,其中PCV2 Cap蛋白导致的IL-21基因转录水平升高更多,几乎是PCV2刺激时表达量的2倍,IL-17A基因的转录水平基本和PCV2刺激时保持一致;PCV2 Cap蛋白能模拟PCV2刺激PD-L1基因转录水平发生变化,但是与PCV2感染时转录水平变化趋势并不完全一致,PCV2刺激时PD-L1的转录水平更高,预示着PD-L1基因与IL-21和IL-17A基因的转录可能存在一定的调节关系。

摘要：浸渍液的制备是湿磨法玉米淀粉工艺下游生产的关键工序。通过分析玉米淀粉工艺中制亚硫酸系统存在尾气排放和能量浪费的问题,对制亚硫酸工艺技术现状进行了工艺探讨,分析对比了几种工艺方案,并应用化工流程模拟软件Aspen Plus对改进制亚硫酸系统进行模拟,基于灵敏度分析考察了过程水流量和过程水SO2含量对制酸效果的影响,得出适用于低酸浸渍液制备的操作条件。模拟结果可以为实际工业设计和操作过程提供参考依据。

摘要：目的检测新疆伊犁地区天然牧场放养马群脑组织中亨德拉病毒(Hendra Virus,HeV)的核酸片段,调查该地区马群中枢神经系统HeV感染流行状况。方法针对HeV高度保守区核蛋白(N)基因设计特异性引物和探针,采用一步法实时荧光定量RT-PCR检测中枢神经系统感染样本中低浓度HeV RNA的方法,检测新疆伊犁草原地区天然放养且未接种HeV疫苗的183例马匹脑组织。结果最低特异性检出浓度可低至2.6×102copies/μL,与其他单股负链RNA病毒如同属的尼帕病毒(NiV)无交叉反应,对183例马脑组织进行一步法实时荧光定量RT-PCR检测,未检出阳性样本。结论初步流行病学研究尚未发现我国新疆伊犁地区天然牧场放养马匹中存在HeV感染的证据,提示该地区短时间内爆发亨德拉病毒感染的可能性小。

摘要：目的探讨纯化的重组结核分枝杆菌多表位肽激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic Tlymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型结核疫苗的设计打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的重组表达多表位肽刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生的增殖反应和细胞毒活性,初步鉴定重组多表位肽的免疫原性。结果以刺激系数(SI)>3为界,多表位肽(10μmol)能刺激全部10例HLA-A*0201阳性(A2+)结核菌素阳性(PPD+)健康个体的PBMC发生增殖,SI为46.2±5.6;增殖反应明显高于单肽(平均SI为10.2±2.3)以及PPD(平均SI为15.6±3.6)引起的细胞增殖反应(P<0.01)。在多表位肽诱导的CTL细胞毒活性分析中以负载抗原肽(10μmol)的T2细胞作为靶细胞,多表位肽诱导的CTL作为效应细胞,多表位肽能诱导全部的10例A2+PPD+健康个体中CTL杀伤活性,平均活性分别为(86.2±9.6%),显著高于单肽[平均为(25.4±3.6)%]和PPD[平均为(22.6±2.8)%](P<0.01)。结论重组优化多表位肽在细胞水平具有较好的免疫原性,能有效刺激PBMC产生细胞增殖反应和细胞毒活性。

摘要：目的研究围手术期应用桃红四物汤对股骨粗隆间骨折老年患者术后患肢肿胀恢复的影响。方法 2014年1月—2016年12月,该研究采用前瞻性随机对照临床实验设计方法,方便选取太仓市中医医院骨伤科60例股骨粗隆间骨折患者,随机分为实验组与对照组各30例。分别观察两组术后第1、3、7、10天患肢肿胀情况。结果实验组术前、术后第1、3、7、10天肢体肿胀为(36.75±5.24)、(48.20±4.69)、(41.45±6.11)、(30.60±4.87)、(17.15±5.06)cm,对照组术前、术后第1、3、7、10天肢体肿胀为(34.30±4.69)、(46.65±5.62)、(35.80±3.09)、(21.10±3.11)、(13.15±3.15)cm。实验组与对照组比较,患肢肿胀恢复的影响在第3、7、10 d,两组差异有统计学意义(P=0.022、0.031、0.004,P<0.05)。结论桃红四物汤对术后患肢肿胀消除效果显著,值得临床推广应用。