摘要：为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stx1b亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-tir-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。重组蛋白纯化后皮下途径免疫小鼠,能够诱导高滴度(105)的IgG,鼻腔内途径免疫小鼠不仅能够诱导高滴度(104)的IgG,还能诱导高达102的IgA。二免后攻击50LD50的EHECO157∶H7,相对于对照组,免疫组粪便中排菌量明显降低、排菌时间明显缩短。结果表明:该融合蛋白免疫原性良好,并且由Tir、Stx2b和Stx1b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(Stx)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。

摘要：目的优化舒血宁注射液生产过程中聚酰胺树脂柱精制过程。方法采用正交实验设计法,以聚酰胺层析流速、醇洗脱接取量、洗脱乙醇浓度为3个因素,考察对舒血宁注射液中各个含量成分转移率的影响关系。结果聚酰胺层析流速、醇洗脱接取量、洗脱乙醇浓度对舒血宁药液转移率均存在影响。结论最优精制工艺参数为聚酰胺层析柱流速为0.2倍柱体积/h,洗脱液接取量为提取物投料量9倍,洗脱乙醇浓度为75%。

摘要：目的评价以社区为基础的结核病重点人群肺结核患者主动发现干预措施的实施效果。方法采用多中心前瞻性队列研究设计,于2013—2015年在全国东部、中部和西部10个省的27个乡镇(社区),对常住人口中的65岁及以上老年人、已知糖尿病患者、已知HIV/AIDS者、既往结核病患者和活动性肺结核患者密切接触者五类结核病发病重点人群,每年开展1次以结核病防治核心信息健康宣教、肺结核可疑症状筛查和胸部X线检查为主要手段的患者主动发现,分析不同筛查手段的敏感度和特异度,以及在结核病重点人群中开展肺结核主动发现策略的效果和影响主动发现贡献率的相关因素。结果在2013—2015年期间,健康教育及肺结核症状筛查的干预完成率分别为97.8%(42684/43654)、91.2%(41732/45768)和88.1%(42441/48178);胸部X线检查的干预完成率分别为86.0%(37538/43654)、81.0%(37070/45768)和75.7%(36483/48178)。重点人群的结核病防治核心信息知晓率从2013年的34.2%(73066/213420)增加到2015年的67.2%(142629/212205),呈逐年上升趋势(Z_(趋势)=215.568,P<0.01)。只采用规划可疑症状和研究可疑症状进行筛查发现肺结核的敏感度较低[分别为11.6%(69/596)和11.7%(70/596)],特异度较高[分别为99.1%(125123/126261)和99.0%(125008/126261)];只开展胸部X线检查和同时进行研究症状筛查和胸部X线检查的敏感度均为90.7%(594/655),特异度分别为94.2%(104004/110436)和93.3%(103062/110436)。在发现的活动性肺结核患者中,三年主动发现的患者占全部发现患者的84.9%(556/655),2013年、2014年和2015年主动发现的贡献率分别为95.7%(244/255)、81.0%(200/247)和73.2%(112/153),呈逐年下降的趋势(Z_(趋势)=-6.403,P<0.01)。多因素分析结果显示,相对于15~24岁年龄组,55~64岁年龄组[OR(95%CI)=7.18(1.59~32.39)]和≥65岁年龄组[OR(95%CI)=13.52(3.31~55.16)]主动发现的贡献率较高;与东部地区相比,在西部地区[OR(95%CI)=2.44(1.38~4.29)]主动发现的贡献率较高。结论在社区结核病重点人群中开展每年1次肺结核患者主动发现干预与未开展相比能明显提高肺结核患者的发现水平,特别是在高年龄组和和西部地区其贡献率较高,但贡献率在三年的实施中逐年降低,因此,对同一类人群是否需要每年都采取主动发现的措施要考虑其贡献率的高低。

摘要：真空电子器件广泛应用于军事民用等领域,具有功率高、电子效率高等优点。近年来在固态电子器件迅猛发展的影响下,真空电子器件的小型化需求越来越迫切。本文研究了超材料慢波结构的高频特性,表明基模n=0空间谐波具有返波特性和高耦合阻抗。同时,分析了两端加载能量输入/输出装置的超材料慢波结构的传输特性,仿真结果表明该结构在2.82~2.86 GHz范围内具有通带。设计了一种S波段基于超材料慢波结构的圆形注反向切伦科夫振荡器,注波互作用的仿真研究表明,在注电压为52 kV、注电流为6 A的条件下,在2.84 GHz频率处具有68.5 kW的输出功率,电子效率约为22%。该超材料慢波结构的横向尺寸约为传统S波段慢波结构的1/7,该反向切伦科夫振荡器的长度约为传统S波段返波振荡器的1/4~1/3,且电子效率高于对应的传统返波振荡器。这些事实表明该反向切伦科夫振荡器具有小型化的优势。

摘要：数字签名技术是电子签章系统的技术基础。文中对数字签名原理、构成和公钥加密算法做了大量比较研究,在此基础上设计了一款适用有效的数字签名算法,并对算法中用到的大素数选取方法进行了优化。通过优化算法大大提高了数字签名加密的效率。实验证明该算法有效可行。

摘要：目的分段表达伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)gB基因,用于PRV疫苗免疫抗体评估试剂盒研究。方法分析gB抗原表位,设计4对特异性引物,从PRV新疆分离株中扩增gB基因的4个片段,分别命名为gB-1、gB-3、gB-4和gB-5基因,克隆到pGEM-T-easy载体并测序。再将4个gB基因片段融合到pGEX-6P-1原核表达载体中,表达并纯化。Western Blotting进行重组蛋白的抗原性检测。以纯化的重组蛋白为抗原建立间接ELISA方法,检测猪血清临床样品。结果构建的4种表达质粒均可在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE分析,表达分子量分别为75.05、53.86、49.96和49.72×103Da,其中gB-3、gB-4和gB-5表达量较高,表达产物主要存在于包涵体中。Western Bloting鉴定显示,4种融合蛋白均可被猪伪狂犬阳性血清特异识别。以gB-3、gB-4和gB-5建立的ELISA方法与IDEXX公司的gB-ELISA试剂盒符合率分别为40.9%、81.8%和81.8%。结论本研究成功表达了PRV的gB-1、gB-3、gB-4和gB-5重组蛋白,gB-3、gB-4和gB-5表达量较高;其中以gB-4和gB-5建立的间接ELISA方法与IDEXX公司的符合率较高。

摘要：目的探索染色体11q13.2(rs7931342,G)、8q24(rs13252298,G)和8q24(rs7837688,T)的常见变异与北京市区人群PCa患病风险的关联,并了解其与PCa患者中的基因型和临床表型、遗传、膳食习惯、年龄等的关系。方法采用病例-对照设计,包括124例PCa患者和138例年龄匹配的正常对照者,收集PCa患者年龄、临床表型、遗传、膳食习惯等信息,用聚合酶链式反应-高分辨率熔解曲线结合DNA测序技术,检测染色体11q13.2(rs7931342,G)、8q24(rs13252298,G)及8q24(rs7837688,T)基因型及等位基因频率在两组间的分布情况,并探讨各基因与患者的确诊年龄、BMI、Gleason评分、PSA浓度、肿瘤分期等临床特征之间的关联。采用MDR方法进行基因-基因交互作用分析。结果 11q13.2(rs7931342,G)、8q24(rs13252298,G)及8q24(rs7837688,T)的基因型、等位基因频率及由8q24(rs13252298,G)和8q24(rs7837688,T)构成的4种单倍型在病例组和对照间组间的分布差异均无显著性(P>0.05)。基因型-临床表型观察指标关联分析显示:8q24(rs13252298,G)位点与患病年龄和经常食用洋葱相关(P=0.030;P=0.040),应用Binary Logistic回归分析,发现11q13.2(rs7931342,G)位点PCa发病与BMI指数相关(P=0.020),8q24(rs13252298,G)位点PCa发病与饮茶、食用豆制品、食用洋葱相关(P=0.003、0.048、0.037),8q24(rs7837688,T)位点PCa发病与BPH病史或相关症状相关(P=0.039)。3个位点的交互作用分析显示,最佳模型仅包含1个位点(rs7931342,G),交叉验证一致性为10/10,检验平衡准确度为0.5420,交叉验证检验组P=0.6727。结论 11q13.2(rs7931342,G)、8q24(rs13252298,G)和8q24(rs7837688,T)位点可能与前列腺癌的发生无关联。

摘要：目的评价国产碘克沙醇注射液对进行经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的老年冠心病患者肾功能的影响。方法采用随机分组、单盲设计、阳性对照的多中心研究。于2013年7月至2014年3月在辽宁省5家医院选择60～75岁、拟行PCI的患者88例，随机分为试验组（应用江苏恒瑞医药股份有限公司生产的碘克沙醇注射液，44例）与对照组[应用通用电气药业有限公司生产的威视派克（碘克沙醇商品名），44例]。记录两组术前年龄、性别、体质量指数（BMI）及肾功能等基本临床资料，术后48h检测肾功能，从而比较两者对老年冠心病患者肾功能的影响有无差别。结果两组共入选88例患者，试验组与对照组均为44例。88例患者均顺利完成冠状动脉造影与PCI，成功率100％。两组年龄、BMI等基本临床资料无统计学差异（P〉0．05）。两组PCI前后肾功能指标相比均无统计学差异（P〉0．05），两组分别有1例患者术后当天出现恶心呕吐，于手术次日恢复正常；两组均未发生对比剂诱发性急性肾损伤及其他不良反应。结论国产碘克沙醇用于行PCI的老年冠心病患者是安全的。

摘要：建立用于从临床样品中检测EHEC O157:H7的二重PCR方法。根据GenBank登录EHEC O157:H7序列,通过对菌体和鞭毛抗原保守性核苷酸序列的比对和分析,分别设计编码O抗原rfbE基因和编码H抗原fliC基因各1对特异性引物,建立二重PCR检测方法,并以EHEC O157:H7纯培养和模拟制备的3种阳性样品为原材料,对方法的敏感性和特异性进行分析。运用成功建立的二重PCR,从带菌率最高的牛粪便中检测EHEC O157:H7,并进行菌株分离和鉴定。成功建立了rfbE与fliC的二重PCR方法,rfbE与fliC引物比例为2.5∶1,PCR循环参数中退火温度为56℃,扩增片段长度rfbE为812 bp,fliC为625 bp。检测阳性临床样品检测敏感性可以达到10 cfu/g。检测24株非EHEC O157:H7大肠杆菌和15株非大肠杆菌,只有EHECO157:H7能够扩增出特异性的rfbE条带,EHEC O157:H7和EPEC O55:H7能够扩增出fliC。只有EHEC O157:H7能够同时扩增出rfbE与fliC 2条目的条带。从63份牛粪便样品中分离到4株EHEC O157:H7:生化试验表明4株EHEC O157:H7具有典型EHECO157:H7的生化特性;药敏试验表明4株EHEC O157:H7具有较为广谱的耐药性;rfbE序列分析与GenBank序列同源性介于97.3%～99.2%之间,fliC序列与GenBank序列同源性介于97.6%～100%之间;4株EHEC O157:H7对Balb/c小鼠的致病性有差异,EHEC O157:H728#和EHEC O157:H738#致病性强,EHEC O157:H73#和EHEC O157:H717#较弱。以rfbE和fliC为目的基因成功建立了二重PCR,敏感性和特异性良好,可用于临床样品的检测,提高细菌分离率。

摘要：目的:对高级别生物安全实验室的化学淋浴系统的消毒效果及运行参数进行研究。方法:通过目检法和生物检测法对高级别生物安全实验室的淋浴系统的消毒效果进行验证,以确定化学淋浴系统的运行参数。结果:在保证化学淋浴系统消毒效果合格的前提下,确定了对实验人员和箱体消毒时不同的冲洗水压、冲洗时间及消毒液的种类和浓度。结论:该研究对于保证高级别生物安全实验室的化学淋浴系统安全可靠运行具有重要意义,为化学淋浴系统的设计提供了有效的参考。