摘要：大多数医院门诊排队管理采用一般服务行业的排队系统来解决,针对门诊复杂的服务类型尚不够理想。文中探讨将排队系统构建于医院信息系统之上,能很好地解决门诊的排队问题,特别是服务类型最为复杂的医学检查与实验诊断,在解决排队问题的同时解决更多相关问题,使之成为完整的系统解决方案。

摘要：【目的】了解力学因素在骨组织重建过程中的作用,探讨高重力对成骨细胞(MC3T3-E1)增殖与凋亡的影响,为组织工程中研究高重力对骨组织重建的影响提供理论依据。【方法】将培养的MC3T3-E1细胞按高重力加载力不同分为对照组、5 G组、10 G组、15 G组、20 G组,实验组每次加载30 min连续加载3 d,对照组同步置于除G值外相同的环境中。【结果】MTT法检测显示,5 G组增殖显著增高,10 G组增殖无显著差异,15 G和20 G组增殖均显著降低。流式细胞术检测显示,5 G组凋亡率显著低于对照组,10 G、15 G、20 G组凋亡率都显著增高。凋亡相关指标:Bax基因,与对照组比较,5 G组表达显著下调,10 G、15 G组表达无显著差异,20 G组表达显著上调。Bcl2基因,与对照组比较,5 G组表达显著下调,10 G组表达显著上调,15 G、20 G组表达无显著差异。Bax/Bcl2基因表达比,与对照组比较,5 G组显著下调,10 G、15 G组无显著差异,20 G组显著上调。P53基因,与对照组比较,5 G组表达显著下调,10 G组无显著差异,15 G、20 G组表达都显著上调。【结论】成骨细胞对高重力刺激的响应可能存在一个"临界点","临界点"以下的高重力刺激可促进细胞增殖,抑制细胞凋亡;"临界点"以上的高重力刺激可抑制细胞增殖,并激活细胞凋亡。

摘要：IL-1β和IL-18是重要的促炎症细胞因子,在介导机体炎症反应中起重要作用。为了建立在体外定量检测猪细胞因子IL-1β和IL-18 mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,依据GenBank中登录的猪细胞因子基因IL-1β、IL-18及管家基因β-actin核苷酸序列,设计特异性引物,经RT-PCR从3D4猪肺泡巨噬细胞系中克隆和扩增了上述3个因子核苷酸片段,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性模板,建立了检测IL-1β、IL-18及β-actin SYBR GREEⅠ荧光定量PCR方法。该方法起始模板数与Ct值之间线性关系好,相关系数达到0.990以上;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;敏感性高,初始模板的检出下限达到了1μl 1.0×102拷贝;重复性好,组内变异系数均小于4%。

摘要：为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stx1b亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-tir-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。重组蛋白纯化后皮下途径免疫小鼠,能够诱导高滴度(105)的IgG,鼻腔内途径免疫小鼠不仅能够诱导高滴度(104)的IgG,还能诱导高达102的IgA。二免后攻击50LD50的EHECO157∶H7,相对于对照组,免疫组粪便中排菌量明显降低、排菌时间明显缩短。结果表明:该融合蛋白免疫原性良好,并且由Tir、Stx2b和Stx1b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(Stx)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。

摘要：将健康人文教育融合于专业教育中是医学院校实现健康人文教育的主要途径。本文从以健康人文理念为引导,提高专业教师专业与健康人文融合教育教学的自觉性;从课程设计入手,引导专业教师掌握专业与健康人文融合教育教学的技术策略;以实际行为示范,强化专业教师在专业与健康人文融合教育教学中的感染力;以考核评价为导向,强化健康人文融合于专业教育教学过程的质量和效果等四个方面介绍了医学院校专业教育中健康人文教育融合的方式方法。

摘要：为探讨羊痘病毒感染后机体的凋亡细胞因子mRNA表达水平的变化,深入探讨羊痘病毒免疫机制,本研究设计针对羊凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFR1和TNF-α特异性引物,建立羊凋亡细胞因子实时荧光定量方法。分别建立荧光定量PCR反应体系并进行优化。结果表明:Fas、FasL、TNFR1和TNF-α的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR各基因的溶解曲线均呈单一溶解峰。组内变异系数均小于2.00%。本研究建立的羊凋亡细胞因子SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法为凋亡细胞因子mRNA表达水平提供了技术平台。

摘要：目的本研究通过体外细胞实验,观察氟、砷单独及联合染毒对大鼠海马神经细胞氧化应激及细胞凋亡的影响。方法采用2因素3水平的析因设计,将体外培养的海马神经细胞分为9组,分别为对照(细胞培养液)组、低剂量砷(2μmol/L亚砷酸钠)染毒组、高剂量砷(10μmol/L亚砷酸钠)染毒组、低剂量氟(10μmol/L氟化钠)染毒组、高剂量氟(50μmol/L氟化钠)染毒组、低剂量砷(2μmol/L亚砷酸钠)+低剂量氟(10μmol/L氟化钠)联合染毒组、低剂量砷(2μmol/L亚砷酸钠)+高剂量氟(50μmol/L氟化钠)联合染毒组、高剂量砷(10μmol/L亚砷酸钠)+低剂量氟(10μmol/L氟化钠)联合染毒组及高剂量砷(10μmol/L亚砷酸钠)+高剂量氟(50μmol/L氟化钠)联合染毒组。采用MTT还原法检测细胞存活情况;采用微量酶标法测定细胞中谷胱苷肽(GSH)含量;采用硫代巴比妥法(TBA)测定谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;采用WST-I法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力;采用化学比色法测定丙二醛(MDA)含量及过氧化氢酶(CAT)活力;采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡率。结果与对照组比较,高剂量砷、高剂量氟、低剂量砷+高剂量氟、高剂量砷+低剂量氟以及高剂量砷+高剂量氟联合染毒组海马神经细胞MTT吸光度值明显降低(P<0.05);高剂量砷+低剂量氟联合组及高剂量砷+高剂量氟联合组细胞CAT活力明显降低(P<0.05);高剂量砷染毒组、高剂量氟染毒组、低剂量砷+高剂量氟联合组、高剂量砷+低剂量氟联合组及高剂量砷+高剂量氟联合组细胞GSH含量明显下降(P<0.05);高剂量氟染毒组、高剂量砷+低剂量氟联合组及高剂量砷+高剂量氟联合组细胞GSH-Px活力明显下降(P<0.05);高剂量砷染毒组、高剂量氟染毒组、低剂量砷+高剂量氟联合组、高剂量砷+低剂量氟联合组及高剂量砷+高剂量氟联合组细胞MDA含量明显升高(P<0.05);高剂量砷染毒组、高剂量氟染毒组、低剂量砷+高剂量氟联合组、高剂量砷+低剂量氟联合组及高剂量砷+高剂量氟联合组细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。结论氟、砷可导致大鼠海马神经细胞氧化应激并引起细胞凋亡率升高,这可能是氟、砷对动物学习记忆能力产生影响的重要原因。

摘要：目的：探讨急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia,APL）患者治疗前后循环内皮细胞（circulating endothelial cells,CECs）数量、表面抗原及生物学特性的变化,并分析其与临床指标的关系。方法：免疫磁珠结合三色流式细胞仪分选计数APL患者初诊及治疗后CECs的数量;免疫荧光染色检测APL患者初诊及治疗后CECs表面CD146、CD31、CD144、VEGFR-2、CD45及CD133的表达水平。体外培养CECs进行血管生成实验及细胞集落形成率的测定。结果：APL患者CECs在外周血白细胞〉10×10^-9/L及CD34阳性患者中数量明显增多（P〈0.05）,高危、低危及中危3组患者的CECs数量也呈现明显的差异（P〈0.05）。32例APL患者诱导化疗后均获得完全缓解,治疗后CECs数量及其表面CD133表达水平均明显下降（P〈0.05）。同时治疗后APL患者CECs体外形成血管数目及细胞的集落形成率均明显减少（P〈0.05）。APL患者CECs数量治疗后/治疗前的比值与As_2O_3治疗1周后的尿砷浓度呈现明显负相关性（P〈0.05）。结论：精确计数并深入了解CECs生物学特性可能有助于评价APL的预后及设计治疗策略。

摘要：目的建立凝血试验自动审核方案,验证并应用于常规凝血检验。方法采用实验室信息管理系统(LIS)、检测设备和中间软件联合构建自动审核实施方案。采用数据库模拟运行和人工审核的方式对历史检验报告进行自动审核规则验证。评估实施凝血自动审核方案后与人工审核之间实验室内周转时间(TAT)情况。结果构建的自动审核方案涉及9项凝血检验项目,在LIS中设计了13条自动审核规则。在2018年12月至2019年11月期间临床实践应用中,98.86%的检验报告执行了自动审核程序,检验报告自动审核通过率为73.66%,26.34%检验报告被系统拦截后人工审核。凝血检验单项平均通过率为89.26%,其中PT通过率(97.75%)最高,D-dimer通过率(69.38%)最低。实施自动审核后的实验室内TAT中位数和第90百分位值分别较未自动审核时缩短5 min和15 min。实施自动审核期间,自动审核的凝血检验报告TAT的中位数和第90百分位值较人工审核分别缩短22 min和27 min。结论构建的自动审核方案在临床实施后可缩短实验室内TAT,提高工作效率。

摘要：为了更好地保护和开发利用威宁绵羊这一优良地方品种,本实验利用威宁绵羊构建DNA池,设计4对引物扩增威宁绵羊IGF-1基因外显子及部分内含子序列。将PCR产物纯化并进行双向测序,通过DNAStar生物软件分析确定多态性位点。利用在线生物信息学软件分析多态位点对IGF-1基因RNA的二级结构、类胰岛素生长因子1的二级和三级结构的影响。结果表明,在扩增的IGF-1基因中筛选到3个SNPs:Intron1-A4387C、Exon2-T87C、Exon4-A27T,其中Exon4-A27T为错义突变,导致编码的精氨酸(Arg)变为丝氨酸(Ser);Exon2-T87C多态位点均未改变氨基酸的编码,为同义突变;Intron1-A4387C在内含子区,不参与氨基酸编码。