摘要：根据NCBI上报道的基因序列设计引物,以长野芽孢杆菌(Bacillus naganoensis)ATCC53909的染色体DNA为模板,PCR扩增普鲁兰酶编码基因pulB。将此基因与表达载体pWB980连接构建重组质粒pWB-pulB,并转化枯草芽孢杆菌WB600。SDS-PAGE结果显示,在100 kD处有特异性条带,经测定重组转化子粗酶液酶活力达10.94 U/mL。酶学性质分析表明,其最适反应温度为60℃,最适反应pH为5.0,且在温度30-60℃及pH4.0-6.0范围内稳定,适合淀粉加工行业的应用。

摘要：本试验旨在探讨不同因素对高温脱脂豆粕蛋白提取率的影响。以高温脱脂豆粕为材料,传统的碱溶酸沉法与超声辅助手段相结合,通过单因素和正交试验设计,对影响其蛋白提取率的提取温度、水料比、pH、提取时间、粉碎细度、超声时间和超声功率等因素进行研究。结果表明,1)能显著提高蛋白提取率的各单因素条件分别是:粉碎细度≥40目,pH≥9,提取温度≥30℃,水料比≥20∶1(mL/g),超声功率300～400 W,超声时间≥5 min。2)各因素对大豆蛋白提取率影响的次序为:提取时间>超声功率>水料比>超声时间>粉碎细度>提取温度>pH。由此可见,在一定范围内,蛋白提取率随着各因素设置水平的提高而提高;高温脱脂豆粕蛋白提取的最优条件组合为:提取时间45 min、超声功率500 W、水料比25∶1(mL/g)、超声时间15 min、粉碎细度60目、提取温度45℃、pH 9.0。

摘要：采用超声波预处理玉米淀粉,研究超声对玉米淀粉分子质量分布的影响,再将超声与传统湿法阳离子淀粉制备工艺结合起来,研究超声预处理法制备阳离子淀粉的工艺条件。采用Box-Behnken中心组合响应面设计,对工艺条件进行优化,并分析超声功率、超声时间、醚化温度、醚化pH值对反应效率的影响。结果表明:超声处理降低了支链淀粉分子质量,提高了阳离子淀粉的反应效率。超声预处理法制备阳离子淀粉的最佳工艺条件为:醚化温度42.58℃,醚化pH值12.03,超声功率150 W,超声时间47.11 min。在此试验条件下实际测得的取代度为0.051 2,反应效率为74.25%。

摘要：根据金黄色葡萄球菌表面蛋白SdrD基因序列设计特异性引物,以金黄色葡萄球菌标准菌株基因组为模板进行PCR扩增,获得了大小为2 043bp的基因片段。将基因片段连接至表达载体pET26b,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达。SDS-PAGE结果表明,SdrD基因获得了较好的表达,重组蛋白的分子质量约为99ku。利用免疫亲和层析对目标蛋白进行纯化,获得了纯度较高的目标蛋白。用该蛋白免疫新西兰白兔制备了多克隆抗体,抗体效价达到1∶23 000,为金黄色葡萄球菌基因工程疫苗的开发与性能评价,以及该致病菌免疫检测技术的开发奠定了基础。

摘要：采用田间裂区设计的方法,研究了不同灌溉方式和氮肥用量对寒地粳稻干物质累积与运转的影响。结果表明,灌溉方式和氮肥用量对抽穗期、抽穗期后、成熟期的干物质累积量、茎鞘物质输出率和转化率的影响达显著水平,且互作效应显著。轻干湿交替灌溉方式结合适量的氮肥用量可显著提高抽穗期、抽穗期后、成熟期的干物质累积量、茎鞘物质的输出率和转换率;中、重干湿交替方式下,增加氮肥用量虽可提高干物质累积量,但不利于抽穗期至成熟期干物质累积和茎鞘物质的转运。减少氮肥用量可减缓水分胁迫对干物质累积及转运控水效应和互作效应的负效应。本试验表明,轻干湿交替灌溉方式结合150-225 kg·hm^-2的氮肥用量的方式为本试验条件下最优的水、氮互作方式;而中、重干湿交替灌溉方式,氮肥用量应减为75-150 kg·hm^-2,以缓解控水效应和互作效应的负效应。

摘要：为了探索微生物除臭剂对畜禽粪便环境污染的治理效果,本研究利用平板划线分离法从5份样品中分离出130株菌株,通过氨气和硫化氢选择性培养基定性初筛和硼酸吸收法、锌胺络盐吸收比色法定量复筛相结合的方法,分别筛选出了可高效抑制氨气、硫化氢释放的菌株5株和3株,其中命名为BX3的菌株对氨气和硫化氢的去除率分别达到80.07%和76.92%;采用L8(27)正交试验优化设计其高效除臭组合,结果表明,"AF2+DZ1+BX3+DZ3+BZ1+EZ3+AX4"组合氨气和硫化氢的释放量显著或极显著低于其他组合,为最佳组合;与空白对照相比,第5天时氨气和硫化氢的去除率达到82.14%和80.84%。对最佳组合除臭发酵工艺研究,在接种量分别为10%和15%,含水率40%和30%,麸皮添加量为10%时氨气和硫化氢的释放量最小。筛选的微生物在除臭剂制备及治理畜禽粪便对环境污染方面具有较大的应用潜力。

摘要：7SGH山地果园双轨运输机以其载重爬坡能力强和无需开垦山路等特点成为山地果园运输农资的重要装备,但运输机的振动会对支撑轨道的稳定性造成影响,运输的货物也会因此受损。本研究通过利用Econ振动分析仪测量运输机7个关键部位在不同载重工况下的X、Y、Z方向的振动参数。基于时域信号进行FFT傅里叶变换,得出载货滑车振幅峰值主要集中在146~224Hz,其振动幅度为0.022~0.026 G,而0~10 Hz频率段振幅小于0.008 G。运输机在轨道平面法向Z方向的振动最大。考虑到运输机启动和制动等对钢丝绳的惯性冲击,基于LabVIEW设计一套钢丝绳安全测试系统,测试表明增加钢丝绳避振装置可以使牵引钢丝绳的惯性冲击拉力降低32%、振动波动降低62.5%,从而减轻了钢丝绳振动疲劳损伤,并且提高了运输机的安全性和运输效率。

摘要：以鸭肝蛋白酶解物为原料,以白砂糖、果胶为辅料制备营养丰富的动物源蛋白多肽饮品。在鸭肝多肽饮品稳定性单因素试验基础上,通过响应面试验设计对主要影响鸭肝多肽饮品稳定性的因素进行优化。结果表明,在鸭肝多肽添加量2.0%、白砂糖添加量8%、果胶添加量0.09%(均为质量分数)时饮品的稳定性最高,稳定系数高达99.1%;氨基酸组成结果表明,鸭肝多肽含有丰富的氨基酸,具有较高的营养价值;经高压灭菌后,放置30 d未检测到大肠杆菌、霉菌及致病菌;感官评价实验表明,多肽饮品均一、稳定性较好;抗氧化结果显示,鸭肝多肽饮品对和2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基清除及二价铁螯合能力的IC50值分别为0.035 mg/m L和0.101 mg/m L。以上研究表明,此多肽饮品具有较好的稳定性和抗氧化性,该研究为肉品加工副产物鸭肝的深加工和高值化开发提供了一定的参考依据。

摘要：为了研究轮毂比对轴流式叶轮水力性能的影响,针对比转数为743的叶轮,采用4种不同的轮毂比进行优化设计,得到4副不同轮毂比的叶轮.轴流式叶轮的优化设计应用多学科优化软件i SIGHT,采用梯度优化算法的序列二次规划法SQP,改变各翼型断面的叶栅稠密度和翼型安放角的大小,保证设计流量和设计扬程不变,实现效率最优.优化过程中应用数值模拟软件CFX,采用基于雷诺平均的N-S方程和标准k-ε模型,预测叶轮的扬程、效率和必需汽蚀余量值.通过数值模拟计算得到不同轮毂比叶轮的性能曲线.分析了同一比转数下,不同轮毂比对轴流式叶轮水力性能的影响.结果表明:轮毂比越大,叶轮效率越高,汽蚀性能越差,但是轮毂比对汽蚀性能的影响比较显著,必需汽蚀余量最大差别达0.9 m,对效率的影响较小,最高效率差别只有0.3%左右;轮毂比越大,扬程性能曲线斜率越大,最大扬程越高,马鞍区扬程范围越大,同时随着轮毂比增大,高效区范围较窄,并往小流量侧分布.

摘要：[目的]通过对毛竹(Phyllostachys edulis(Carri.)H. deLehaie)CPD基因的分子特征和表达模式进行研究分析,为揭示CPD在参与毛竹笋生长调控、光诱导以及响应胁迫过程中的作用提供参考依据。[方法]在毛竹基因组数据库(BambooGDB)中查找CPD的同源序列,设计引物并克隆PeCPD。通过生物信息学的方法分析PeCPD的基因结构、顺式调控元件、其编码蛋白的基本理化性质、保守结构域、进化关系以及该基因在不同组织中的表达模式等,利用实时定量PCR方法分析该基因在不同高度笋、昼夜节律光照条件下以及干旱、低温胁迫处理下叶片和根中的表达模式。[结果]获得了毛竹CPD同源基因PeCPD(PH01003419G0030),cDNA全长为1 584 bp,包含5′和3′端非编码区分别为110 bp和64 bp,编码区为1 410 bp,对应的基因组长度为2 796 bp,外显子和内含子数量分别为6个和5个。克隆获得了PeCPD编码区,与BambooGDB中PH01003419G0030序列完全一致,编码一个470 aa的蛋白,分子量约为52.2 kDa,理论等电点为9.063。同时获得了PeCPD上游序列(1 999 bp),与数据库中序列完全一致,分析发现,其中除了启动子基本元件外,还含有多种与环境相关的作用元件,如参与低温应答的LTR、干旱响应的MBS和光响应元件AE-box、TCT-motif等。基于CPD氨基酸序列的系统进化分析表明,毛竹与水稻、玉米、谷子和二穗短柄草等单子叶植物聚类到一个大的分支,其中与二穗短柄草的亲缘关系最近。基于转录组数据的基因表达热图分析发现,PeCPD在毛竹7个不同组织中的表达存在明显差异,其中在20 cm笋中的表达量最高,根中表达量最低。实时定量PCR分析表明,随着笋的增高,PeCPD表达量呈上升趋势;在昼夜节律光照条件下,PeCPD表达量随着光照时间延长而上升,随着黑暗时间延长而下降;干旱和低温胁迫条件下,叶片和根中PeCPD的表达量均呈先上升后下降的趋势。[结论]从毛竹中获取得到了CPD同源基因PeCPD,该基因为组成型表达,且随着笋的增高其表达量呈上升趋势,可能通过参与BRs的生物合成对竹笋的生长起调控作用;PeCPD在叶片中的表达呈现昼夜节律变化,表明该基因可能会参与毛竹的光形态建成;干旱和低温胁迫条件下,PeCPD表达量的变化有助于提高毛竹适应逆境胁迫的能力。