摘要：目的根据药物构效关系,设计合成出一系列结构新颖的V2受体拮抗剂,以期筛选出高效低毒的此类化合物,为进行下一步的临床前研究创造条件,为新药的创制奠定基础。方法根据“me-too”的设计思路合成一定数量结构新颖的V2受体拮抗剂。通过核磁共振氢谱(~1H-NMR)、高分辨质谱(HRMS)等手段进行结构确证,并且测定了熔点、纯度等相关理化常数。通过表达人类V2受体的细胞模型和大鼠利尿模型进行生物活性评价。结果设计合成出12个未见文献报道的目标化合物(A1~A12),以托伐普坦为阳性对照药,其中A6,A7,A11等化合物表现出较强的生物活性,并且具有作用持续时间更长的特点。结论化合物结构设计合理,对进一步开展V2受体拮抗剂的结构改造及其药理毒理活性研究具有一定的参考价值。

摘要：水、空气、食品、灰尘和排泄物中广泛存在食源性病原菌,由此引发的感染性疾病严重危害人类健康。因此,开发病原菌的快速检测方法尤为必要。由于实际样品中的病原菌往往共生存在,所以多元病原菌的同步灵敏检测是微生物检测领域的重点与难点。分子生物学和免疫组化分析技术都在此领域进行过一些尝试,但由于引物设计与抗体的局限性,这两种技术在实际应用中的效果并不十分理想。表面增强拉曼光谱(SERS)技术由于具有快速、无损、高分辨率、不受水分干扰、可原位检测等显著优势,在多元病原菌同步检测领域获得了重要应用。从应用原理、特点和效果等方面出发,系统阐述了SERS技术在多元病原菌同时检测中的应用策略。首先对SERS基底材料与病原菌的结合方式进行简要概述,再以检测策略为主线,从直接法和间接法两种策略出发进行介绍。直接法通过基底材料的信号放大作用直接获得病原菌本身的光谱信息,步骤简便,操作快捷,在多元病原菌判别分析、定量分析与即时检测(POCT)中被广泛应用。但由于光谱信息量大,往往需要与多元统计分析方法、成像技术和微流控器件等联用。间接法一般需要借助拉曼信号分子和适配体、抗体等识别元件,将对病原菌的检测转换为对信号分子的分析,极大提高了检测方法的灵敏度与特异性,可在基因、蛋白、细胞等水平实现对多元病原菌的同步分析。且与其他识别元件及功能分子的联用能构建得到集细菌的分离、识别与灭活于一体的综合检测体系,在临床血液等实际样本的分析中具有重要前景。最后,总结并指出SERS技术的现有问题及下一步努力方向,为SERS技术在多元病原菌的快速、灵敏检测策略设计及具体应用方面提供参考。

摘要：目的:联用熵权法(entropy weight method)与正交实验设计(orthogonal experimental design)法,多指标筛选栀子中环烯醚萜类成分的最佳提取工艺。方法:基于栀子HPLC指纹图谱构建的基础上,采用HPLC法测定栀子中去乙酰车叶草苷酸甲酯、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ的含量,并以此5种指标成分的质量分数和浸膏率为评价指标,联用熵权法和正交实验设计法对栀子中环烯醚萜类成分的提取工艺参数进行优化。结果:根据综合评价评分(M)结果,确定了栀子中环烯醚萜类成分的最佳提取工艺参数为10∶8∶8倍量的水,回流提取3次,每次2 h。3批平行验证M评分分别为98.07,98.56,98.77,RSD为0.36%。结论:联用熵权法和正交实验设计法对栀子中环烯醚萜类成分的提取工艺参数进行优化,科学可行,简单易于操作,节约成本,重复性和稳定性好。

摘要：目的:本研究就当前儿童中药临床试验设计评价和试验实施等阶段存在的困难和问题进行广泛调研,为《儿童中药临床试验相关问题专家共识》的制定搭建问题清单。方法:通过网络问卷调研儿童中药临床试验参与各方,归纳试验设计与评价及试验实施的难点。结果:共回收问卷49份,受访者认为当前儿童中药临床试验在设计与评价阶段对适应证定位、试验目的、诊断标准、年龄范围、对照药、有效性评价、安全性观察等选择困难,用药方案制定缺乏科学依据;实施阶段要明确试验启动时间,在伦理审查、受试者招募、知情同意、依从性和临床试验数据监察委员会(DMC)设置等方面需进一步提高。结论:当前儿童中药临床试验在设计评价与实施等方面还存在诸多难点,可从政策、意识、技术等多方面加以改进,推动儿童专用中成药的研发。

摘要：副本交换分子动力学(REMD)是一种广泛应用于蛋白质功能性构象变化模拟及相应自由能计算的增强型采样算法。由于REMD理论严格且采样效率高,近年来备受关注,尤其是针对传统REMD方法的发展和优化,显著提高了REMD的采样效率,拓展了其应用范围。但是各种REMD新型方法的最佳适用范围也存在较大区别,使得如何选用合适的REMD方法成为实际应用的难题和挑战。因此,有必要对各种REMD方法及其应用进行阐述,深入比较各方法的优缺点及其实际应用体系。本综述从REMD的原理出发,回顾了近年来各类REMD方法的变形策略,以助于对REMD方法的理解、应用和继续改进。

摘要：利用实验设计(design of experiment,DoE)方法建立抗CD38单抗(monoclonal antibody,mAb)的抗体依赖性细胞吞噬作用(antibody-dependent cell-mediated phagocytosis,ADCP)生物学活性检测方法。以Jurkat/NFAT/CD32a-FcεRIγ转基因细胞系作为效应细胞,Daudi细胞系作为靶细胞,通过荧光素酶检测系统(BrightGlo^(TM)Lucifer‐ase Assay system)检测抗CD38单抗的ADCP生物学活性,并运用DoE方法进行实验参数优化。结果显示,抗CD38单抗在该方法中存在量效关系,且符合四参数方程:y=(A-D)/[1+(x/C)^(B)]+D,方法经统计学实验设计对多个实验参数进行筛选和优化,确定抗体工作浓度为800~20.81 ng·mL^(-1),靶细胞和效应细胞的接种量分别为每孔7.5×10^(4)和2.5×10^(4)个,诱导时间为6 h。该方法具有良好的专属性;5个不同组回收率样本经3次检测,相对效价分别为(59.97±4.74)%、(82.44±5.15)%、(110.69±11.71)%、(129.23±5.22)%和(162.15±3.66)%;回收率在103%~120%,RSD均小于11%,线性检测范围为50%~150%。本研究利用DoE设计成功筛选、优化和建立基于报告基因的抗CD38单抗ADCP生物学活性测定方法,该方法具有良好的专属性、重复性和准确性,可作为抗CD38单抗ADCP生物学活性的评价方法。

摘要：目的研究伊潘立酮片在中国健康受试者空腹和高脂条件下体内的药动学特征并评价生物等效性。方法采用开放、随机、两周期、两序列自身交叉试验设计,健康受试者分别空腹和餐后口服1 mg伊潘立酮片受试制剂与参比制剂,采集不同时间点的血样。利用液相色谱-质谱联用法检测血浆样品中伊潘立酮及其代谢物羟基伊潘立酮(P88)的浓度,用Phoenix^(TM) Win-Nonlin 7.0软件计算两制剂的主要药动学参数,并评价两制剂的生物等效性。结果空腹状态下,健康受试者口服伊潘立酮片受试制剂和参比制剂后血浆中伊潘立酮和其代谢物P88的ρ_(max),AUC_(0-t),AUC_(0-∞)的几何均值比的90%置信区间分别为89.88%~106.61%和90.05%~102.45%、99.81%~109.40%和100.79%~108.17%、100.06%~110.20%和101.58%~110.97%。餐后状态下,血浆中伊潘立酮和P88的ρ_(max),AUC_(0-t),AUC_(0-∞)的几何均值比的90%置信区间分别为102.06%~118.14%和100.73%~111.20%、103.94%~111.83%和104.88%~112.29%、104.02%~113.02%和103.29%~111.33%。伊潘立酮受试制剂及参比制剂在空腹和餐后状态下的ρ_(max),AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)的几何均值比的90%置信区间均在80.00%~125.00%的范围内。结论伊潘立酮受试制剂和参比制剂在中国健康受试者空腹和餐后状态下均具有生物等效性。

摘要：目的设计并合成用于检测乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)的双光子荧光探针,并考察探针对ACh E的成像检测性能。方法经酯化、取代等多步有机反应合成探针,并通过^(1)H-NMR、^(13)C-NMR和ESI-MS确认结构。考察探针与ACh E发生响应后的荧光信噪比、灵敏度、特异性、酶动力学和双关子吸收截面积数值等指标;研究探针可否用于ACh E抑制剂的体外筛选;利用单-双光子成像试验考察探针在细胞和组织水平上对ACh E活力变化的检测能力。结果通过^(1)H-NMR、^(13)C-NMR和ESI-MS确认了产物的结构。体外试验表明探针与ACh E响应后的荧光信噪比为15倍,检测限达到0.23 U·mL^(-1),并具有很强的特异性和优良的酶亲合能力,在波长820 nm有最优的双光子吸收;探针可用于AChE抑制剂的体外筛选;探针通过单-双光子成像技术可对细胞和组织水平上的ACh E活力变化进行成像检测,并且组织成像检测深度可达110μm。结论本研究成功开发了可用于AChE检测的双光子荧光探针,有潜力成为可用于活体中检测AChE活力的双光子成像试剂。

摘要：本文提出以天然药物为研究对象,系统检索美国、欧盟、日本、韩国、新加坡、中国香港地区、巴西、马来西亚、南非等代表性国家和地区的天然药物注册情况及技术要求,联合世界卫生组织草药产品注册监管联盟等机构,构建天然药物国际注册标准数据库及天然药物国际注册品种数据库。详细说明该数据库建立的主要信息来源、系统框架设计思路、方法和特点。希望能积极推动相关数据库的建设,发挥整合优势,进一步加快中医药国际化前进步伐,为中药走出国门、服务全球提供强有力技术支撑。

摘要：目的采用离子对与促透剂联合应用的促透策略,设计一种经皮透过性良好的川丁特罗贴剂,用于支气管哮喘的治疗。方法首先采用有机溶媒挥散法制备川丁特罗经皮吸收贴剂,以Wistar大鼠皮肤为模型,采用单因素考察法在体外经皮透过试验中考察离子对与促透剂的联用对川丁特罗经皮透过行为的影响并优选贴剂处方。通过贴剂体外释放试验和红外光谱试验,探讨离子对及促透剂对川丁特罗经皮透过行为的影响及分子机制。结果贴剂的优选处方为川丁特罗-对氨基苯甲酸为主药,载药量为5%,DURO-TAK■87-4098为压敏胶基质,8%聚甘油油酸酯为促透剂。离子对的形成增加了川丁特罗的皮肤渗透性,而聚甘油油酸酯的加入对川丁特罗从贴剂中的释放和川丁特罗皮肤透过均有促进作用,2个技术的联用增加了川丁特罗的皮肤累积透过量。结论本研究通过采用离子对与促透剂联合应用的策略,成功设计了川丁特罗压敏胶分散型贴剂,并从释放和经皮吸收2方面探讨了离子对和促透剂的作用机制,为开发川丁特罗贴剂提供参考。