摘要：本文设计和合成了具有血管内皮细胞靶向性的环五肽RGD(cyclo-[Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys],Tyr-RGD)修饰的纳米基因载体聚乙二醇-聚乙烯亚胺(PEG-PEI),并研究其纳米特性、载药特性及其体内外的肿瘤靶向特性。采用化学方法合成所需要的纳米载体,鉴定该纳米载体的纳米特性及载药特性,并采用体外血管内皮细胞竞争结合实验研究其靶向性,最后将荧光标记的纳米载体注入荷瘤小鼠体内,观察其肿瘤靶向性。Tyr-RGD-PEG-PEI纳米载体采用分步合成方法,所获得的载体粒径约为145nm,其对小分子干扰核糖核酸(siRNA)的包封率好,血浆内孵育30min,仅约3%的siRNA游离出来,结构稳定。薄层层析法分析鉴定其为单一斑点(Rf0.65)。受体竞争实验表明该纳米载体可有效地与多肽精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)竞争结合内皮细胞膜上的受体;荷瘤小鼠实验表明,载有荧光标记siRNA的Tyr-RGD-PEG-PEI纳米药物注射入小鼠体内24h后,主要分布在肿瘤组织内,而无Tyr-RGD靶向的纳米药物则除了瘤体内,还分布在肝脏、肺等脏器。合成的Tyr-RGD靶向纳米载体Tyr-RGD-PEG-PEI具有较好的纳米特性和高效的基因药物包封率,荷瘤裸鼠研究表明其肿瘤的靶向性明显优于无Tyr-RGD靶向的纳米药物。

摘要：为评价抗caspase 3核酶在阻抑细胞凋亡发生中的潜在价值 ,以RNaseP催化亚基M1RNA为模板 ,设计合成 3个特异性针对人caspase 3的核酶pM1 GS716、pM1 GS337和pM1 GS2 35 ,并对它们的体内外切割活性进行探讨 .3 2 P标记的caspase 3基因片段体外转录物作为靶RNA ,体外切割实验表明 ,pM1 GS716和pM1 GS337均有切割活性 ,其中pM1 GS716的切割效率可达到 93% .3个核酶转染HeLa细胞 ,评价其在体内的切割活性 .在TNF α作用下 ,转染pM1 GS716的HeLa细胞内caspase 3mRNA下降了 75 % ,蛋白含量下降了 6 9% ,caspase 3蛋白酶活性下降了 5 2 % .Hoechst 332 5 8染色表明 ,细胞凋亡率较对照明显下降 (分别为 2 1 6± 0 7%和 4 9 4± 0 2 % ,P <0 0 1) .提示体外制备的pM1 GS716具有良好的特异催化切割活性 ,有望通过切割caspase 3而抑制细胞凋亡 .