摘要：以荷叶离褶伞子实体为试验原料,采用蒸汽爆破辅助热水提取荷叶离褶伞多糖。综合考虑粗多糖得率、多糖含量及多糖提取率,在单因素试验基础上,采用响应面法优化蒸汽爆破处理工艺,得到最佳条件为压力2.0 MPa,维压时间90 s,物料大小3 mm。在此条件下,荷叶离褶伞粗多糖得率为(20.09±0.20)%,是对照组(未蒸汽爆破处理)的2.05倍,多糖含量为(62.96±0.48)%,是对照组的1.70倍,多糖提取率为(12.65±0.15)%,是对照组的3.49倍。此外,对蒸汽爆破处理前后的多糖进行了理化性质对比,发现处理后β-葡聚糖含量是对照组的2.28倍。红外光谱表明蒸汽爆破处理后仍具有多糖典型吸收峰,但处理前后分子量分布特征差异较大,且经过蒸汽爆破处理所得多糖的单糖组成中葡萄糖占比增加,这与其β-葡聚糖含量升高相一致。免疫活性比较结果显示经过蒸汽爆破处理后富集β-葡聚糖的荷叶离褶伞多糖活性显著优于对照组荷叶离褶伞子实体多糖。

摘要：靶向金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)保守基因(nuc)序列设计特异性引物,经引物筛选和反应条件的优化,建立金黄色葡萄球菌的重组酶等温扩增(recombinase aided amplification,RAA)结合侧流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)的快速检测方法。该方法在引物浓度200 nmol/L、33℃反应20 min即可实现靶标基因片段的有效扩增。特异性分析结果表明RAA-LFD方法检测金黄色葡萄球菌与其他常见致病菌菌株间不存在交叉反应,灵敏度分析结果表明RAA-LFD方法检测金黄色葡萄球菌的检出限为4 fg/μL(DNA)与1.83×10^(2) CFU/mL(纯菌液)。用人工污染牛奶样品验证RAA-LFD方法的可靠性,结果显示在增菌6 h时,RAA-LFD方法可检测到1.83×10^(1) CFU/mL金黄色葡萄球菌。分别采用微生物生化鉴定法、PCR法与RAA-LFD方法对64份牛奶样品进行金黄色葡萄球菌检测,结果表明,RAA-LFD方法与微生物生化鉴定法总符合率为95.3%,与PCR法总符合率(98.4%)表现出较高的一致性。本研究建立的可视化检测方法具有特异性强、灵敏度高、快速高效、操作简单、检测结果直观、对仪器设备要求低等特点,为牛奶中金黄色葡萄球菌的检测提供新的发展方向。

摘要：菌丝体作为灵芝生长发育过程中的一个特定生理阶段,会产生不同于子实体和孢子的特定结构的灵芝酸类三萜化合物。本文总结了灵芝菌丝体中已发现和鉴定的三萜化合物结构、生物活性及其构效关系的研究进展,以期为灵芝菌丝体三萜在生物合成、代谢调控等的基础研究及相关产品的开发应用提供科学参考。

摘要：多篇文献报道灵芝三萜具有良好的抗肿瘤活性,但其构效关系和作用靶点尚未系统比较。本研究以45种灵芝三萜为研究对象,通过对小鼠白血病细胞L1210的增殖抑制测定,来评价化合物抗肿瘤的能力。结果表明,灵芝菌丝体三萜和子实体中性三萜的活性较强。进一步采用Discovery Studio分子对接技术探讨了12种活性较强的灵芝三萜与5种抗肿瘤作用相关蛋白p53、Bcl-xl、EGFR、IL-2和VEGFR2之间可能的作用靶点,推测三萜化合物抗肿瘤能力与其结构上的乙酰氧基和母环上的共轭双键有关。其中,具有这一特征的含有3个乙酰氧基的ganoderic acid T,其抗肿瘤活性最强。本研究为灵芝三萜活性位点的寻找和结构改造提供了参考。

摘要：采用缓冻协同微波法对竹荪中的多糖成分进行提取并进行工艺研究,依次考察缓冻时间、微波功率、液料比、提取时间对多糖得率的影响,在单因素试验基础上,运用响应面设计优化得到最佳提取工艺。利用1,1二苯基2三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法、2,2'联氮双(3乙基苯并噻唑啉6磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除法、羟自由基清除法、总还原能力4种试验,对比缓冻协同微波法提取得到的竹荪多糖(PW 1)和单一微波法获得的竹荪多糖(PW 2)的抗氧化活性,并借助高效液相色谱联用多角度激光散射(HPSEC MALLS RI)技术和红外光谱分析多糖初步结构。结果表明:最佳提取条件为缓冻时间16 h、微波功率260 W、液料比53 mL/g、提取时间8 min,在最佳提取条件下,PW 1的得率为11.87%。在4种抗氧化活性试验中,PW 1表现的抗氧化活性比PW 2更强。初步结构分析发现PW 1与PW 2分别是由4个主色谱峰和3个主色谱峰构成,并以α糖苷键连接为主的吡喃型糖,重均分子量均为1.018×10^(6)~14.980×10^(6)g/mol。

摘要：根据药典方法,以齐墩果酸为对照品,对灵芝中含有的三萜、甾醇和脂肪酸3种类型化合物进行分光光度法测定,并对影响三萜含量测定的因素进行分析。结果表明灵芝中的甾醇和脂肪酸类化合物会干扰所有的测定结果,尤其影响灵芝孢子中三萜含量的测定。灵芝子实体中三萜化合物的结构特征,造成了其测定值远远低于真实值。因此,分光光度法不适用于测定灵芝子实体、菌丝体和孢子及其相关产品中的三萜含量。

摘要：本文研究超声辅助提取灵芝总三萜工艺的优化方法。在单因素实验确定实验参数的大致范围和中心点的基础上,通过筛选实验设计Plackett-Burman(PB)发现对得率影响显著的3个因素(提取时间、超声功率、提取温度),并使用Box-Behnken响应面法进行工艺优化。结合所有实验数据使用基于Pytorch框架的Python学习程序建立深度神经网络(DNN),运用蒙特卡洛算法进行预测和寻优,同时还比较响应面法和深度神经网络两种建模方法。结果表明:通过深度神经网络可得到灵芝总三萜提取的最佳工艺条件(超声功率360 W、提取时间12 min、提取温度58℃、液固比17 mL/g、乙醇体积分数88%),此时预测的灵芝总三萜得率为1.878%,实际测得灵芝总三萜得率为1.805%。深度神经网络在不增加实验量的情况下对已有数据进行学习,可以预测得到更优的工艺条件,并且深度神经网络的非线性拟合能力相比于响应面法的多项式拟合有更强的数据处理能力,预测结果更准确。

摘要：采用大田小区的试验方式,通过分析常规施肥+秸秆还田(CK)和常规施肥+秸秆还田+秸秆促腐菌剂(IT)两个处理土壤团聚体、理化性质和酶活性以及phoD微生物群落结构和多样性,研究稻麦轮作秸秆还田条件下秸秆促腐菌剂配施对土壤养分变化特征及解磷菌微生物多样性的影响。结果表明,促腐菌剂处理秸秆腐解率显著提升42.1%,土壤团聚体水稳定性显著增加,土壤平均重量直径(MWD)显著提升46.7%,大团聚体数量(R0.25)和几何平均直径(GMD)分别增加62.5%和22.2%,但无显著差异。促腐菌处理土壤有机质、速效氮和速效磷含量以及土壤碱性磷酸酶活性分别提高11.8%、59.8%、62.6%和33.8%,但土壤pH、EC以及腐殖酸、全量氮磷钾和速效钾含量等无显著差异。促腐菌处理小麦产量增加不显著,而籽粒全磷含量较CK显著提升28.1%。基于phoD基因的微生物群落对比分析,IT处理显著增加了phoD微生物群落物种数量,同时显著改变phoD微生物群落结构,但两个处理phoD微生物群落多样性指数无显著差异。冗余分析(RDA)结果显示,phoD微生物群落结构与pH、速效氮和MWD均呈显著相关。添加秸秆促腐菌剂有助于改善土壤结构,增加土壤有效磷含量和优化土壤phoD微生物群落结构,从而有效改善农田土壤磷养分的供应效率。

摘要：为全面、客观评价不同超声提取条件下灵芝菌丝体水提液(GLMw)的体外抗氧化活性,利用超声辅助提取法对灵芝菌丝体的水溶性抗氧化成分进行提取工艺研究,分别考察液固比、超声功率、超声时间、超声温度的影响,在此基础上进行4因素5水平星点设计效应面优化。通过熵权法对30组灵芝菌丝体水提液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除率、羟自由基清除率进行赋权,分别得到3种自由基清除率的权重,以加权后计算得到的综合抗氧化活性为效应值进行多元回归拟合,得到最佳提取工艺条件。结果表明:在液固比50 mL/g、超声温度40℃、超声功率156 W、超声时间60 min条件下能够得到综合抗氧化活性最高的灵芝菌丝体水提液,该条件下的预测值为63.48%,与实验值62.06%接近(相对标准偏差RSD<3%)。

摘要：对灵芝多糖的微波辅助水提取、碱提取工艺进行探究。以多糖得率为指标,采用响应面分析法对灵芝多糖的微波辅助水提取和碱提取工艺进行优化。水提取的最佳工艺条件为:微波功率325 W,料液质量比1∶35、提取时间24 min;碱提取的最佳工艺条件:NaOH质量分数5.4%,料液质量比1∶35、提取温度40℃、提取时间75 min。利用优化后的工艺对沪农灵芝和龙芝2号的子实体进行多糖提取,水溶性多糖(GLP1)得率均大于1%,碱溶性多糖(GLP2)得率均大于5%。多糖的红外谱图显示:沪农灵芝的GLP1、GLP2和龙芝2号的GLP1、GLP2均有可能是氨基多糖;沪农灵芝的GLP2和龙芝2号的GLP2中存在吡喃糖环、甘露糖苷。优化后的工艺能显著提高灵芝水溶性、碱溶性多糖产量,不同灵芝材料中水溶性多糖、碱溶性多糖具有差异性。