摘要：高温是影响水稻的产量和品质的重要环境因素之一。26S蛋白酶体能消除细胞毒性变性蛋白,是水稻应对高温热激的一个重要机制。水稻TT1基因编码26S蛋白酶体的α亚基,非洲栽培稻和亚洲栽培稻TT1等位基因中的一个SNP位点造成精氨酸到组氨酸(R99→H99)的改变,使得非洲栽培稻具有更强的耐高温性。本研究根据TT1基因功能性SNP位点设计dCAPS标记TT1-P2。利用TT1-P2标记对申9B、NIL(CG14),及其杂交F1代的TT1基因型鉴定,结果TT1-P2标记鉴定的基因型与测序的结果一致。用TT1-P2标记对杂交F2代群体的TT1基因型鉴定,发现TT1WYJ、杂合型和TT1CG14这3种基因型符合1∶2∶1的分离比。这些结果表明TT1-P2能准确的鉴别TT1的基因型,可用于耐高温水稻品种的分子标记辅助育种。

摘要：为解决传统的水温小样本非实时预测方法预测精度低、鲁棒性差等问题,基于物联网实时数据,提出了遗传算法(GA)优化BP神经网络的池塘养殖水温短期预测方法,并在此基础上设计开发了池塘养殖水温预测系统,首先采用主成分分析法筛选出影响池塘水温的关键影响因子,减少输入元素;然后使用遗传算法对初始权重和阈值进行优化,获取最优参数并构建了基于BP神经网络的水温预测模型;最后采用Java语言开发了基于B/S体系结构的预测系统。该系统在江苏省宜兴市河蟹养殖池塘进行了预测验证。结果表明:该系统在短期的水温预测中具有准确的预测效果,与传统的BP神经网络算法相比,研究内容评价指标平均绝对误差(MAE)、平均绝对百分误差(MAPE)和误差均方根(MSE)分别为0.196 8、0.007 9和0.059 2,均优于单一BP神经网络预测,可满足实际的养殖池塘水温管理需要。

摘要：根据已发表基因序列(GenBank登录号为Z36906)设计引物,以弓形虫(Toxoplasma gondii)上海本地株的基因组DNA为模板,扩增编码ROP2(rhpotry protein2)蛋白的基因片段,定向克隆至表达质粒pET32a(+),重组质粒经限制性酶切鉴定后测序,结果表明插入片段长度为1044bp,与GenBank上登录的序列相比,同源性为96%-100%,其中与弓形虫RH株的rop2基因同源性为100%。重组原核表达质粒pET32a-rop2转化至大肠杆菌BL21(DE3),经诱导可表达分子量约60.9kD的融合蛋白,能被感染弓形虫RH株的绵羊阳性血清识别。

摘要：副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是海洋环境中常见的食源性致病菌。采用自行设计的改良初筛方案结合tlht、oxR这2种特异性基因的2次筛选开发了一种副溶血性弧菌的快速分离鉴定方法。应用该法从海水、海泥及3种海产品中分离得到了19株副溶血性弧菌,再经16S rDNA测序对分离鉴定结果的特异性进行了验证。实验结果显示基于tlht、oxR这两种特异性基因分离鉴定所得19株菌的准确性为100%,全程检测时间为3 d。上述结果显示本研究开发的基于特异性基因的副溶血性弧菌分离鉴定法是一种高效、快速的检测方法,特异性强且耗时短,在食源性致病菌的风险评估和大规模样本的分析检测领域具有较高的潜在应用价值。

摘要：通过利用一种基于微机电加工技术(MEMS)的微量热传感器,建立出一种基于生物热的通用型农药残留速测单元。在此基础上,进行了信号的初步实验研究,主要涉及流体流动时的降噪研究和酶促反应放热研究。结果证明,所设计的流路缓冲装置能够大幅降低流体流动的噪声值,未加缓冲装置时的机械噪声为0·8mV,加上缓冲装置后的机械噪声值在40μV;生化反应放热实验证明,该装置对于生化反应热的测量具有较好的稳定性和重现性。

摘要：为探明急性温度胁迫对银鲳(Pampus argenteus)幼鱼生化指标的影响,该实验设计了3个温度梯度,即22℃、27℃和32℃,以27℃为对照组,胁迫时间48 h,分别测定胁迫前后其代谢酶、离子酶活性以及血清中离子浓度。结果显示,2个实验组的血清谷丙转氨酶(GPT)的变化趋势相反,肝脏谷草转氨酶(GOT)的变化趋势也不同;2个实验组的碱性磷酸酶(AKP)变化趋势相反,而酸性磷酸酶(ACP)变化趋势相同,乳酸脱氢酶(LDH)在22℃实验组出现波浪式变化(P<0.05);血清钠(Na+)、钾(K+)、氯(Cl-)、钙(Ca2+)在各组呈现不同的变化趋势;鳃Na+/K+-ATP酶活性在32℃实验组出现下降趋势,肾脏Na+/K+-ATP酶活性在22℃实验组出现先升高后降低趋势(P<0.05);2个实验组鳃Ca2+/Mg2+-ATP酶活性和肾脏Ca2+/Mg2+-ATP酶活性皆出现相反的变化趋势。结果表明,急性温度胁迫可显著影响银鲳幼鱼的正常代谢,因此在养殖过程中应尽量避免温度胁迫,以使其有一个良好的生长环境。

摘要：用PK-15细胞增殖PCV-2病毒,提取病毒DNA,用PCR方法扩增核衣壳蛋白(Cap蛋白)全基因,克隆到pET-32a载体中,构建了表达载体pETORF2,转化入大肠杆菌BL21中,用IPTG进行诱导表达,结果显示表达的蛋白大小与设计不符。同样的方法,又构建了表达载体pETRF2,含有Cap蛋白的部分基因,结果显示表达的蛋白大小依然与设计不符。对Cap蛋白编码基因进行改造,在不改变原氨基酸序列的基础上,把其编码密码子全部换成大肠杆菌偏爱密码子,根据此序列,设计了4条长引物,参照SOE的原理,用降落PCR的方法扩增出含Cap蛋白表位基因的片段,并克隆到pET-32a载体中,成功构建了重组表达载体pETP1P4。SDS-PAGE电泳结果表明,表达的蛋白分子量与设计相符。

摘要：对新近分离的鹅副粘病毒SF02株通过自行设计的3条引物建立了复合RT-PCR方法。该方法对鹅源副粘病毒SF02株和GPV2株均可检测到215bp和401bp2条带,对12株(其中7株参考株,5株野毒)鸡源新城疫、2株鸽源新城疫、1株鸭源新城疫病毒的检测只出现1条401bp带,与预期的大小一致,对H5、H9亚型禽流感病毒、鸭病毒性肝炎病毒、传染性支气管炎病毒、SPF鸡胚尿囊液均未检测到特异性条带。

摘要：水稻起源于热带和亚热带地区,因此水稻对低温胁迫比其它农作物更加敏感。低温可以影响水稻生长发育的各个时期。特别是在温带和高纬度地区,低温冷害是影响水稻生产的重要环境因素之一。培育种植耐低温的水稻品种是解决低温冷害的一个重要手段。水稻耐冷基因COLD1编码一个G蛋白信号调节因子,该基因中起源于中国野生稻的SNP2位点,使粳稻具有更强的耐寒性。本研究根据COLD1中SNP2的序列多态性,开发与耐低温基因COLD1共显性的dCAPS分子标记,并利用7个水稻品种和96个籼粳交F2个体验证标记的准确性。实验结果证明本研究中设计的dCAPS分子标记能准确的鉴定粳稻COLD1^jap基因型、籼稻COLD1ind基因型及杂合基因型,可应用分子标记辅助育种工作。

摘要：真核生物翻译起始因子(eIF-5A)在调控生物生长发育、衰老与环境响应中起重要作用。设计eIF-5A基因的兼并引物,对月季受高温诱导的叶片cDNA进行PCR扩增,获得特异性片段,经回收、克隆和测序,确定该cDNA为月季eIF-5A(命名为RceIF5A),含有480bp的核苷酸,编码159个氨基酸。将该cDNA序列克隆到原核表达载体PET32a中,获得重组子pET32a-eIF5A。在高温(50℃)和低温(4℃)胁迫下含有该基因的大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(pET32a-eIF5A)比***21(pET32a)抗性有明显的提高,据此认为含有重组子的***21(pET32a-eIF5A)对高温和低温的抗性可能与eIF-5A基因的表达相关。该基因GenBank登录号为EF177192。