摘要：目的建立疟疾消除后高效的蚊媒监测多重PCR方法。方法设计疟原虫属、人血、中华按蚊和蚊通用4对特异性引物,与通用引物(5′-CGAGTCCTGCGGTCTCAAATT-3′)连接后,形成4对嵌合特异性引物。常规PCR确定各引物对的最佳退火温度和引物工作浓度,多重PCR优化4对引物混合后的最佳反应条件,引入模拟风险感染阳性蚊虫样品,建立敏感的多重PCR反应体系。检测4种疟疾(间日疟、卵形疟、恶性疟、三日疟)患者全血样品的原虫密度梯度稀释样品的各基因扩增情况,评估检测灵敏度。用溶组织内阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫、隐孢子虫、田鼠巴贝虫、杜氏利什曼原虫、刚地弓形虫、日本血吸虫尾蚴、卫氏并殖吸虫、蛔虫、牛带绦虫、猪带绦虫等11种其他寄生虫虫体DNA或感染样品评价该方法的检测特异性。用畜圈周围采集的野生中华按蚊样品,评价所建PCR方法的应用效果。结果优化后的多重PCR反应体系各组分含量(体积比)为:DNA模板10%、引物Mix10%、三蒸水30%,Taq酶预混液50%。引物Mix中,蚊通用、按蚊、人血和疟原虫引物的用量配比为1∶1.75∶3∶5。反应体系的最佳循环条件为:95℃5 min;94℃15 s,60℃20 s,72℃20 s,循环4次;94℃15 s;64℃20 s,72℃20 s,循环9次;94℃15 s,68℃20 s,72℃24 s,循环25次;72℃3 min;10℃5 min。疟原虫属扩增产物的长度为662~717 bp,人血为519 bp,中华按蚊为432 bp,蚊通用为190~320 bp。4种疟疾患者血样经优化后的多重PCR检测结果显示,该法对间日疟患者血样的灵敏度最高,检出最低原虫密度为10.7个虫/μl血;对三日疟患者血样的灵敏度最低,检出最低原虫密度为133.3个虫/μl血;对卵形疟和恶性疟患者血样的检出最低原虫密度分别为15.0和34.0个虫/μl血;检测灵敏度平均值为48.25个虫/μl血。检测模拟风险感染阳性蚊虫样品结果显示,中华按蚊模拟阳性样品显示为4个条带(662~717、519、432、190~320 bp),吸食人血后的中华按蚊样品为3个条带(519、432、190~320 bp),未吸血或吸食畜血的中华按蚊样品为2个条带(432、190~320 bp),吸人血的非中华按蚊样品为2个条带(519、190~320 bp),未吸血或吸食畜血的非中华按蚊样品为1个条带(190~320 bp)。特异性检测结果显示,11种其他寄生虫DNA样品结果均为阴性;对畜圈周围采集的野生中华按蚊样品和室内吸食人血的蚊虫样品检测结果显示,人血引物的特异性良好。结论本研究建立的疟疾蚊媒多重PCR检测方法,1次检测可同时获取蚊种鉴定、人血指数和疟原虫感染等多方面信息,敏感性高、特异性好。

摘要：目的了解专家、老师、家长和学生等不同对象对构建儿童伤害预防家庭监护能力评估指标体系的看法和建议,为指标体系构建提供依据和思路。方法对儿童伤害预防相关领域专家及家长、老师和学生围绕儿童伤害预防与指标体系构建等内容开展定性访谈,对访谈结果进行主题框架分析。结果访谈对象关注的伤害涵盖了故意伤害和非故意伤害,但具体关注的伤害类型有所差别。访谈对象认为儿童伤害发生和家庭因素关系密切,包括家庭环境、家长的看护、教育水平及教养方式等。访谈对象分别从顶层设计、干预项目制定和个体获益的角度肯定了构建指标体系的必要性,并提出将1岁、3岁、6岁和12岁作为指标体系年龄段的划分节点,以及从教育教养、环境、知识和技能、陪伴与沟通、以身作则、情绪管理及学习能力等维度构建指标体系。结论构建一套完整全面的儿童伤害预防家庭监护能力评估指标体系是必要且紧迫的。构建指标时需考虑不同年龄段的儿童伤害特点及所有可能发生的伤害类型。

摘要：目的探究小学生情绪体验持续时间与焦虑障碍发生关联强度的剂量-反应关系,为研究不同情绪状态水平对应的焦虑障碍发生风险提供参考。方法采用方便整群抽样方法,抽取上海市闵行区16所公办小学三至五年级的7 152名学生作为调查对象,采用儿童焦虑障碍自评量表及积极情感-消极情感量表进行问卷调查。结果小学生焦虑障碍总检出率为19.91%,其中男、女生焦虑障碍患病率分别为19.41%和20.43%。调整了性别、年级、户籍、是否为独生子女、父母婚姻状况、父母职业、父母文化程度、家庭经济水平、担任班干部、接受过体育和艺术专项培训或辅导情况及被欺凌情况后,积极情绪持续天数为7~16 d组、17~24 d组和>24 d组与焦虑障碍患病风险的发生呈负相关(OR值分别为0.53,0.36,0.37,P值均2 d组与焦虑障碍患病风险的发生呈正相关(OR值分别为1.27,3.73,7.66,P值均<0.05)。限制性立方样条分析显示,情绪状态的持续天数与焦虑障碍患病关联强度呈明显的非线性剂量-反应关系(P<0.01),即随着小学生积极情绪持续天数的增长,患焦虑障碍的风险持续降低;随着小学生消极情绪持续天数的增长,患焦虑障碍的风险持续增高。结论小学生情绪状态持续天数与焦虑障碍发生呈显著剂量-反应关系,促进小学生获得和维持积极情绪可作为改善小学生心理健康的重要切入点。