摘要：本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,首先靶向犬全基因组设计合成转录sgRNA的DNA文库,并将DNA文库全部克隆于lentiCRISPR v2慢病毒转移载体上,高通量测序结果显示文库覆盖度高、均一性良好。将质粒文库和慢病毒包装系统质粒共转染293T细胞,收取含慢病毒样病毒的上清液感染MDCK细胞,在最适浓度嘌呤霉素筛选下,收集嘌呤霉素抗性细胞,冻存于-80℃,提取一部分细胞的基因组,通过PCR扩增转录sgRNA的DNA,将PCR产物插入到T载体后,挑取单克隆菌落,测序表明细胞文库中转录的sgRNA具有较好的覆盖度。本实验成功构建了犬全基因组范围转录sgRNA的质粒文库,并成功构建了MDCK细胞全基因组范围的基因编辑细胞库,该文库可作为后续筛选病毒复制关键宿主因子的细胞平台。

摘要：为了提高土下作物机械化收获质量和效率,解决土下作物收获机械田间试验成本高、效率低、数据采集不便且受天气因素影响大等问题,该研究设计了一种土下作物机械收获自动对行挖掘试验台。该试验台主要由传动装置、速度调节装置、偏离行中心距调节装置、块根固定及株距调节装置、偏离探测装置、液压纠偏执行机构和挖掘模拟装置以及测控系统和液压系统组成。在分析试验台工作原理的基础上,进行了关键部件的结构设计及参数确定,设计了集成角度传感器、位移传感器、速度传感器的机电液一体化测控系统。以甜菜收获为研究对象,以株距、偏离行中心距离和前进速度为试验因素,以漏挖率为指标进行试验台准确性田间对比正交试验。试验结果表明,在不同前进速度、偏离行中心距离、株距等参数组合下,试验台试验漏挖率为2.33%~2.72%,田间试验漏挖率为2.38%~2.92%。与田间试验相比,漏挖率绝对偏差率范围为2.10%~6.85%,平均偏差率为3.67%,且漏挖率越大,偏差率越大,试验台具有较好的准确性。该研究可为甜菜、萝卜、土豆等土下作物的自动对行挖掘收获系统设计提供参考。

摘要：为了减轻大麻收获劳动强度、提高大麻鲜皮剥制效率，该研究根据大麻茎杆分枝多、皮骨结合紧密等特点，采取揉搓分离与梳理分离相结合的皮骨分离方法，设计出大麻鲜茎剥皮机。该样机主要由揉搓机构、梳理分离机构、纤维收集装置、传动系统、机架、行走装置等组成，样机具体结构紧凑、移动方便、皮骨分离能力强等特点。试验结果表明：样机的揉搓分离机构能够使大麻鲜茎破裂，皮骨初步分离；梳理分离机构能将揉搓后粘连在韧皮表面的大部分麻骨去除，起到梳理鲜皮上屑骨的作用。样机的鲜茎出皮率为10.90%～21.36%，剥净率为61.50%～78.33%，生产率为108.67～174.22 kg/h，纤维强度为4.90～5.61 cN/dtex，可实现大麻鲜茎的皮骨分离。

摘要：本试验旨在研究半胱胺对冬毛期雄性水貂生产性能、营养物质消化率及氮代谢的影响。试验采用双因子试验设计,影响因素为半胱胺添加水平和添加方式。选取167日龄、体重相近的健康雄性水貂56只,随机分为7组,每组8个重复,每个重复1只。Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别饲喂在基础饲粮基础上添加60、90、120 mg/kg半胱胺的试验饲粮,半胱胺添加方式为连续添加,Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组试验饲粮分别同Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,半胱胺添加方式为间隔添加(连续添加1周,间隔1周)。预试期7 d,正试期51 d。结果表明:1)Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组的平均日增重极显著高于对照组和Ⅳ组(P0.05)。3)各半胱胺添加组粪氮排出量较对照组显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),Ⅵ组氮沉积显著高于对照组及Ⅱ、Ⅳ组(P<0.05),间隔添加组氮沉积、净蛋白质利用率、蛋白质生物学价值较连续添加组显著升高(P<0.05)。由此可见,饲粮添加半胱胺能够促进冬毛期雄性水貂的生长,并提高毛皮品质、营养物质消化率及氮代谢。综合考虑各项指标,在本试验条件下,冬毛期雄性水貂饲粮中半胱胺的最适添加水平为90 mg/kg,添加方式为间隔添加(连续添加1周,间隔1周)。

摘要：【目的】为了明确熊蜂蜂群发育过程中具有代表性的性状指标及其饲料花粉最优配比。【方法】以山杏Armeniaca sibirica花粉、山柳Salix caprea花粉和油菜Brassica rapa花粉为原料,通过{3,3}混料设计得到7种配比的混合花粉,分析不同混合花粉对地熊蜂Bombus terrestris(L.)无王工蜂群的产卵前时间、幼虫拖出数、幼虫总数量、幼虫总重量、蛹总数量、蛹总重量、雄蜂出房时间、出房雄蜂数量和雄蜂出生重9个蜂群性状指标的影响,使用主成分分析对蜂群性状指标进行综合评价,并通过混料回归模型预测熊蜂蜂群饲养过程中的最优花粉配比。【结果】地熊蜂无王工蜂群发育过程的9个性状指标可以归纳为幼虫发育、蛹发育、成蜂发育、蜂群发育周期4类评价因子,其中幼虫总数量、蛹总重量、雄蜂出生重、产卵前时间和雄蜂出房时间是5个主要性状指标;以蜂群主要性状指标为评价依据,得出蜂群饲养过程中最优花粉配比:当以油菜花粉单独饲喂蜂群时蜂群产卵前时间短、幼虫总数量最多、蛹总重量最大,当山杏花粉、山柳花粉和油菜花粉以1︰1.5︰1.5比例饲喂蜂群时雄蜂出房时间最短,当山柳花粉和油菜花粉以3︰1比例饲喂蜂群时雄蜂出生重最大。【结论】明确了地熊蜂无王工蜂群发育过程中的重要性状指标和饲料花粉最优配比,为进一步研究商品化熊蜂群不同发育阶段的营养需求奠定了基础。

摘要：根据多种植物MADS-box基因保守区序列设计简并引物,应用PCR技术从草莓绿果中分离出33条MADS-box基因cDNA片段。序列分析表明,这些片段长度在137-146 bp之间,包含基因起始密码子。推导的氨基酸序列与已登录的草莓的MADS-box基因同源性超过87%。推导的氨基酸序列与已知的草莓和其他物种调控果实发育成熟的MADS-box基因以及拟南芥的MADS-box家族基因进行系统发育分析,可将这些基因片段分别归入拟南芥MADS-box基因不同亚家族中,证明草莓果实中存在各类MADS-box家族基因,克隆的部分片段可能参与调控果实发育和成熟软化的调节。

摘要：为探索超临界CO_2萃取技术在苹果树枝根皮苷提取中的应用效果与最佳工艺条件,以冬季修剪时废弃的苹果树枝为试验材料,乙醇为夹带剂,在单因素试验的基础上通过正交试验对超临界CO_2萃取苹果树枝根皮苷工艺进行了优化。结果表明,在试验设计范围内,夹带剂用量对超临界CO_2提取苹果树枝根皮苷得率的影响最大,其次为萃取时间和萃取温度,以萃取压力的影响最小;超临界CO_2萃取苹果树枝中根皮苷的最佳工艺条件为:萃取温度40℃、萃取时间45min、萃取压力30MPa、夹带剂用量30m L,在此条件下根皮苷提取得率经验证试验可达到2.02%,提取物纯度达到31.94%,显著高于乙醇浸提法。应用超临界CO_2萃取技术提取苹果树枝中根皮苷,提取条件温和,时间短,提取物纯度高,是一种较好的根皮苷提取分离方法。

摘要：本试验旨在研究人参多糖对育成期雄性水貂生长性能、营养物质消化率、氮代谢及血清生化指标的影响。采用单因子试验设计,选择70日龄健康、体重相近的雄性水貂40只,随机分成4组,每组10个重复,每个重复1只水貂。Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础饲粮中添加10、50和100 mg/kg的人参多糖(干物质基础)。预试期7 d,正试期60 d。结果表明:1)Ⅳ组末重(130日龄体重)和平均日增重显著高于对照组(P0.05)。3)各组间食入氮、粪氮、尿氮和氮沉积差异不显著(P>0.05);净蛋白质利用率随着人参多糖添加水平升高而逐渐升高,Ⅳ组显著高于对照组(P0.05)。由此可见,饲粮中添加人参多糖可提高水貂净蛋白质利用率,进而提高干物质消化率和粗蛋白质消化率,调节血清中免疫球蛋白M含量,提高免疫力,提高生长性能。

摘要：本试验旨在研究饲粮添加不同水平吡啶甲酸铬对北京红商品产蛋鸡产蛋性能、血液生理生化指标、器官发育和主要脏器组织病理学变化的影响,进而评价吡啶甲酸铬对产蛋鸡的生物安全性。试验采用单因子完全随机设计,选用360只23周龄北京红商品产蛋鸡,按产蛋率和体重一致的原则随机分为4个组,每个组6个重复,每个重复15只鸡。各组分别在玉米-豆粕型基础饲粮中添加0、0.6、4.0和6.0 mg/kg(以铬计)的吡啶甲酸铬。预试期21 d,正试期70 d。结果表明:1)饲粮铬添加水平对试验全期产蛋鸡产蛋性能和器官指数无显著影响(P>0.05)。2)饲粮铬添加水平除显著提高试验第35天产蛋鸡血浆谷草转氨酶活性(P0.05)。3)饲粮铬添加水平对产蛋鸡主要内脏器官的发育均无明显影响,同时均未观测到产蛋鸡的心脏、肝脏、肾脏、卵巢和输卵管组织出现明显的病理学变化。以上结果表明,产蛋鸡玉米-豆粕型饲粮中吡啶甲酸铬的推荐添加水平为0.6 mg/kg时,具有10倍的安全系数,即饲粮中以吡啶甲酸铬形式添加6.0 mg/kg铬对产蛋鸡是安全的。

摘要：本试验旨在研究生物活性硒对不同品种育肥猪生长性能、组织硒含量、抗氧化能力和肉品质的影响。采用2×3双因素完全随机试验设计,设2个猪品种:“杜×长×大”三元杂交猪(以下简称三元杂交猪)和从江香猪;3个硒处理:0.25 mg/kg亚硒酸钠、0.25 mg/kg生物活性硒和0.50 mg/kg生物活性硒。分别选取体重接近的三元杂交猪[初始体重为(56.12±0.68)kg]90头和从江香猪[初始体重为(37.22±0.48)kg]72头,随机分为6个组,每组3个重复(三元杂交猪10头/重复,从江香猪8头/重复)。试验期60 d。结果表明:1)三元杂交猪的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)显著高于从江香猪(P<0.10),料重比(F/G)显著低于从江香猪(P<0.10)。2)与饲粮中添加0.25 mg/kg亚硒酸钠相比,添加0.50 mg/kg生物活性硒可显著增加背最长肌和腿肌中硒含量(P<0.10)。3)对于三元杂交猪,与饲粮中添加0.25 mg/kg亚硒酸钠和0.25 mg/kg生物活性硒相比,添加0.50 mg/kg生物活性硒可显著增加肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和脱碘酶(DIO)含量及背最长肌硫氧还蛋白还原酶(TXNRD)活性(P<0.10);对于从江香猪,与饲粮中添加0.25 mg/kg亚硒酸钠相比,添加0.50 mg/kg生物活性硒可显著增加背最长肌和腿肌TXNRD活性(P<0.10)。4)从江香猪背最长肌和腿肌中肌内脂肪含量均显著高于三元杂交猪(P<0.10)。从江香猪背最长肌和腿肌中大部分脂肪酸含量显著高于三元杂交猪(P<0.10),而大部分氨基酸含量显著低于三元杂交猪(P<0.10)。综上所述,饲粮中添加生物活性硒更有利于增加猪肌肉中硒的富集和肌肉中一些氨基酸含量,提高猪的抗氧化能力;三元杂交猪与从江香猪在肉品质方面存在差异的主要原因是肌肉中肌内脂肪及脂肪酸和氨基酸含量不同。