摘要：目的：利用简并引物（Degenerate Oligonucleotide-Primed，DOP）PCR法，建立一种物种非特异性的宿主细胞残余DNA检测方法。方法：设计简并引物，优化实时定量PCR的条件，从而建立DOP--PCR法，检测5种重组单抗药物宿主细胞表达系统（CHO细胞、SP2／0细胞和NS0细胞）的残余DNA。结果：简并引物选择51Tag—N6-ATGTGG 3’，定量PCR条件优化为：低严谨性扩增的退火温度由；32℃以3％的斜率升至72℃，严谨性扩增后的荧光检测条件优化为77℃，30s。3个物种的DNA扩增曲线R2均能达到0．99以上，回收率达到80％～132％，3次测定的ESD均小于25％。同时DOP-PCR与CHO细胞特异性的定量PCR进行比较，二者回收率的均值均在80％～130％之间，3次测定的RSD均小于20％。结论：初步建立了物种非特异性的宿主细胞残余DNA的DOP-PCR检测方法，为单抗药物宿主细胞残余DNA检测提供新思路。