摘要：目的:为进一步保障蜈蚣药材及其制品的质量与临床疗效,建立蜈蚣配方颗粒特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴别方法。方法:根据蜈蚣细胞色素C氧化酶亚基3(COX-3)基因序列筛选适用于蜈蚣配方颗粒的稳定引物区间,并在区间内筛选获得蜈蚣及其混伪品的单核苷酸多态性(SNP)位点,设计特异性鉴别引物。分别收集蜈蚣及其混伪品,考察退火温度、循环次数、不同Taq酶、DNA模板量、不同PCR仪、不同引物量等因素对PCR鉴别方法的影响,建立并优化PCR反应体系,并对此方法的专属性及适用性进行考察验证。结果:PCR鉴别反应体系为2×M5 PCR Mix 12.5μL,蜈蚣配方颗粒鉴别引物(10μmol·L^(-1))各0.4μL,DNA模板2.5μL,无菌双蒸水9.2μL。PCR反应参数为94℃预变性3 min,循环反应30次(94℃变性20 s,62℃退火20 s,72℃延伸45 s),72℃延伸5 min。利用上述PCR反应体系和反应参数对蜈蚣药材及其制品进行扩增,电泳检测结果表明所有正品均可在约135 bp处显示出一条明亮条带,而混伪品无条带。结论:建立的特异性PCR鉴别方法可准确对蜈蚣药材、饮片、标准汤剂冻干粉、配方颗粒中间体、配方颗粒成品进行准确鉴别,为进一步保障蜈蚣药材及其制品的质量具有重要意义。

摘要：针对川麦冬收获时根土分离难度大、易损伤茎苗等问题,设计了一种前置挖掘式小型履带麦冬收获机,由挖掘装置、输送筛选装置、液压装置和行走装置等组成。为确定收获机的可行性,根据三因素三水平响应面试验法构建入土角度、振动链的输送速度、振动轮的振动频率对麦冬收获损伤率、明茎率和带土率的回归模型,优化回归模型得到最优参数组合,即机器的前进速度为0.1m/s、入土角度为20°、振动链的转速为190r/min、振动轮的振动频率为600Hz。试验结果表明:在最优参数组合下,麦冬收获损伤率为2.94%,明茎率为96.7%,带土率为12.5%,达到了较为理想的收获效果。研究可为麦冬收获机的完善和作业参数优化提供参考。

摘要：目的分析大果沙棘Hippophae rhamnoides *** L.与中华沙棘***初生/次生代谢物的差异,并对其生物合成途径变化进行分析。方法采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)法对2个种属的沙棘进行初生及次生代谢产物表征,基于二水平析因-星点设计法(plackett burman-central composite design,PB-CCD)设计对沙棘UPLC-DAD指纹图谱进行研究,优化液相方法,指认共有峰;以偏最小二乘-判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)、聚类分析及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析对大果沙棘、中华沙棘进行差异初生代谢物筛选及相关代谢通路富集;进一步采用质谱多反应检测(multiple reaction monitoring,MRM)对筛选得到具有差异的初生代谢物和次生代谢物进行定量分析;最后,对2个品种沙棘的差异性成分进行分析并对其进行生物合成途径的关联和阐释。结果基于成分表征和PLS-DA初步鉴定出中华、大果沙棘含量差异较大的成分有11个,其中包括2个氨基酸类初生代谢物和9个黄酮类次生代谢物。结论建立的方法能鉴定出中华沙棘、大果沙棘中的差异性成分。分析结果显示,总黄酮在中华沙棘中含量较高,说明中华沙棘在药用功效上可能强于大果沙棘;其次异鼠李素在大果沙棘中含量较高,说明其对临床的质控和应用可能不太适用。

摘要：为了研究WRKY33基因在丹参非生物胁迫中的作用机制,以白花丹参为试验材料,对丹参转录组数据进行分析,挖掘出丹参WRKY33基因参考序列并设计特异性引物,利用基因克隆技术从丹参中克隆出WRKY33基因的全长cDNA,命名为SmWRKY33。对SmWRKY33基因进行生物信息学分析,同时利用荧光定量方法探究SmWRKY33基因在逆境胁迫下的表达模式。结果表明,SmWRKY33基因核苷酸长度为1 635 bp,编码544个氨基酸。生物信息学分析显示,SmWRKY33基因的理论相对分子量为60 835.66,等电点为7.00,定位于细胞核,不存在跨膜区及信号肽,SmWRKY33蛋白为不稳定亲水蛋白。亲缘关系显示,SmWRKY33与紫苏、芝麻、白花泡桐的WRKY33亲缘关系较近。密码子偏好性分析得出拟南芥真核表达最适应丹参SmWRKY33基因的外源表达。qRT-PCR结果表明,SmWRKY33基因在低温、高温、PEG、NaCl等逆境胁迫诱导下具有不同的表达模式,其中低温、NaCl能显著诱导SmWRKY33基因的高表达,说明该基因对温度调节、盐胁迫较为敏感,猜测其参与温度、盐胁迫调控反应机制。本试验首次从丹参中克隆出SmWRKY33基因,探讨了该基因在丹参逆境胁迫下的作用机制,旨在为培育丹参的抗逆新品种提供参考基因。

摘要：为了建立丹参花药培养再生体系,进行了丹参花药组织培养技术研究。以丹参花蕾为试验材料,研究了小孢子发育时期的确定方法,明确了小孢子处于单核靠边期的花蕾长度,结果显示,丹参花蕾长度为5.0~7.9 mm时小孢子处于单核靠边期。并利用小孢子处于单核靠边期的花药做外植体,采用正交试验设计,分别比较了不同激素种类及配比对愈伤组织诱导和不定芽诱导的影响。结果显示,6-BA浓度为1.50 mg/L、2,4-D浓度为0.25 mg/L时,愈伤组织诱导率最高,达到83.33%,且愈伤组织长势较快,体积均匀,呈明显的颗粒状;6-BA浓度为1.25 mg/L、NAA浓度为0.05 mg/L、IBA浓度为0.25 mg/L时,不定芽诱导率最高且明显>其他处理,达到70.00%,且愈伤组织大部分呈鲜绿色,颗粒状明显,丛生苗较多,芽生长速度较快。丹参花蕾长度为5.0~7.9 mm时,小孢子处于单核靠边期,适合进行花药培养;适宜愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.50 mg/L+2,4-D 0.25 mg/L+糖30 g/L+琼脂6.5 g/L;适宜不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.25 mg/L+NAA 0.05 mg/L+IBA 0.25 mg/L+糖30 g/L+琼脂6.5 g/L。

摘要：随着人们生活质量的提升,康养保健愈发成为关注焦点。药用植物作为中药养生与保健的重要载体,其药用功效对身心健康有显著的疗愈功能,其“色、香、味”能将我们感官与自然环境建立密切联系。“本草之境”以药用植物的保健功效为切入点,筛选出约50种华南常见药用植物,利用花境造景,从视觉、嗅觉等多角度进行植物景观设计,融入科普教育功能,在花境景观的营建中从公众教育功能方面初步探索了华南药用植物的康养、保健等功效。同时“本草之境”也是对“十四五”中医药文化弘扬工程实施方案的积极响应。

摘要：面向非理工专业学生开设编程选修课程可使其适应大数据时代的职场及学术要求,但面临缺乏可及性、稳定性强的编程操练环境,理论课程难度较大而课时不足,以及个体化指导和过程性评价不足等困难。在“R语言与数据可视化入门”课程中,通过搭建云计算平台,借助swirl自主学习包实现理论课程翻转教学,借助MOOC/自媒体/自制视频资源实现数据分析与可视化实践课程翻转教学,结合侧重于过程性评价的多元考核方式,达到较好的教学效果。本教学设计对其他非理工专业学生的编程选修课程具有一定示范推广价值。

摘要：目的:建立一种能够准确鉴别九香虫及混伪品的特异性PCR方法,解决形态相似动物药材的鉴定问题。方法:收集不同产地九香虫及其常见混伪品8种123份,基于九香虫及其混伪品的细胞色素C氧化酶亚基I(COI)序列差异,利用Clustal W软件进行同源比对并且筛选出特异性单核苷酸多态性(SNP)变异位点,根据变异位点设计特异性鉴别引物,采用三步法进行PCR扩增,并对影响PCR反应体系的反应条件进行考察,实测鉴定了九香虫及混伪品。结果:当模板量30~100 ng,退火温度为55℃,循环次数为35次时,九香虫能扩增出301 bp的单一明亮条带,而其混伪品均不具有此特异性条带。结论:使用特异性引物对九香虫及其混伪品进行验证的结果良好,与传统形态鉴定结果基本一致。因此,通过特异性PCR方法可以快速准确地鉴定正品九香虫。

摘要：中医药国际化是我国中医药发展的战略目标之一,已被纳入国家战略并作为“一带一路”发展规划的重要组成部分。中药作为中医药发展的基础和前提,其国际化程度直接影响着中医药国际化进程。ISO国际标准化组织是一个由国家标准化机构组成的世界范围的联合会,其制定的标准在世界范围内对经济、贸易及交流合作具有重大影响。该文在简要概述国际标准化组织/中医药技术委员会(ISO/TC 249)的基础上,阐述了中药国际标准制定的必要性,分析了中药国际标准制定的现状,最后针对中药国际标准制定面临的挑战,提出我国中药国际标准制定的发展策略:以国际市场需求为导向,做好顶层设计;强化标准质量的提升,加速推进国内高质量标准转化为国际标准;充分发挥企业在标准制定中的积极作用;大力培养复合型中药国际标准化人才;加强国际合作等。对中药国际标准制定的问题思考与经验对今后如何科学、高效、合理地制定高质量中药国际标准具有重要指导意义。

摘要：目的对黄草乌Aconitum vilmorinianum的异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)基因进行克隆及功能研究,为黄草乌中二萜生物碱的生物合成途径解析奠定基础。方法基于黄草乌的转录组数据筛选注释为IDI的基因,设计特异性引物克隆其编码区,利用相关软件对其进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR分析其在黄草乌不同器官中的表达情况,在大肠杆菌中表达其重组蛋白,利用功能显色验证其功能。结果从黄草乌中克隆得到1个IDI基因(AvIDI,Genbank登录号MZ814967)。生物信息学分析表明,AvIDI的开放阅读框(open reading frame,ORF)为897 bp,编码298个氨基酸,分子式为C_(1516)H_(2362)N_(414)O_(452)S_(11),相对分子质量为33970,理论等电点为5.94,具有异戊烯基焦磷酸异构酶TNTCCSHPL和WGEHELDY 2个保守序列。系统进化分析显示,AvIDI与黄龙胆Gentiana lutea IDI的亲缘关系最近。表达分析表明,AvIDI基因在黄草乌根、茎、叶和花中均有表达,在茎中表达量最高。在大肠杆菌中成功表达了AvIDI重组蛋白,功能显色实验表明,AvIDI编码有功能的IDI蛋白,能促进大肠杆菌中番茄红素的积累。结论克隆得到AvIDI基因,并通过功能显色实验证明其编码有功能的IDI蛋白,该研究为利用IDI基因调控黄草乌中二萜生物碱生物合成奠定了基础。