摘要：随着高质量循证医学研究提供的证据不断更新,中低位直肠癌的诊断与治疗呈现出模式复杂的特点,这符合真实世界研究要求。在真实世界数据库建设和数据采集过程中,数据库的字段选择、报告单的结构化设计以及数据收集中与收集后的质量控制,均会显著影响真实世界数据及其产生证据的质量。笔者期望通过分享建设中低位直肠癌全国多中心数据库的经验,为后续真实世界数据库建设提供参考。

摘要：肌少症是一种与年龄相关的肌肉退行性疾病。自然衰老小鼠是研究肌少症的常用动物模型。由于肌少症的核心病理特征是骨骼肌质量和肌肉力量的显著减少，运动行为实验是其主要的评价方式。目前，肌少症小鼠运动功能检测方法基于肌肉耐力、力量、平衡和协调能力为主要特征进行设计，常用方法包括跑台力竭、自愿转轮、抓力、倒置网格、转棒和平衡木等测试。通过整理国内外关于肌少症小鼠运动功能测评方法，对其检测原理、测试程序、优缺点、评价指标和适用疾病模型等进行系统总结，提出可操作的测评方案，有助于研究者根据研究目的选择适当的测评方法。同时也对运动功能测评技术的创新特征进行归纳，有助于运动功能测评技术的不断更新，对肌少症的深入研究具有指导意义。

摘要：目的分析干燥综合征(Sjogren's syndrome,SS)患者的抑郁、焦虑症状与中医证型、临床特征及实验室指标之间的相关性,为临床提供参考。方法采用横断面研究设计,纳入2023年5月至12月在中国30家大型三级甲等医院确诊为SS的患者共174例。收集患者的临床信息,并对其进行描述性统计,总结患者的证候特征;采用多因素回归分析方法,探讨SS患者抑郁、焦虑情绪的相关因素。结果阴虚津亏证与气阴两虚证SS患者在医院焦虑和抑郁量表(HADS)的焦虑域和抑郁域评分显著高于其他证型(P<0.05)。多因素Logistic回归分析表明,睡眠障碍、口腔溃疡是SS患者焦虑的独立影响因素,而血红细胞水平降低、睡眠障碍则是SS患者抑郁的独立影响因素。此外,与非焦虑和抑郁患者比较,焦虑和抑郁患者的生活质量下降、疲劳水平显著增加(P<0.05)。结论SS患者睡眠障碍、口腔溃疡和红细胞计数减少可能提示患者伴随焦虑、抑郁现象,这与百合病表现密切相关。本研究结果可为SS患者的心理应激管理提供新的理论依据和治疗思路。

摘要：目的采用全外显子组测序技术检测216种单基因遗传病在中国健康育龄期人群中的携带情况及高频致病变异。方法选取2013年1月至2023年12月就诊于北京协和医院行全外显子组测序的健康且无血缘关系育龄人群3 097例(包括1 424对夫妇), 对216种单基因遗传疾病(对应220个基因)的基因携带率、累积携带率、高风险夫妇致病变异携带率及变异谱进行回顾性分析。结果 (1)3 097例受检者216种疾病对应的220个基因的检测结果显示, 1 472例检出致病变异, 检出率47.53%(1 472/3 097), 人均携带0.65个致病变异, 高风险检出率为3.93%(56/1 424)。(2)基因携带率≥1%的基因有16个, ≥0.5%的基因有33个, 多数与遗传代谢病相关。携带率较高的基因及其对应的高频突变分别为GJB2基因c.235del, PAH基因c.728G>A, ATP7B基因c.2333G>T, SLC26A4基因c.919-2A>G, GALC基因c.1901T>C, POLG基因c.2890C>T, SLC22A5基因c.1472C>G, USH2A基因c.2802T>G, SLC25A13基因c.852_855del, GAA基因c.761C>T和c.752C>T。结论本研究初步明确了220个基因在中国育龄期人群中的携带率、对应的216种单基因遗传病在高风险夫妇中的发生率及高频突变, 为设计适合中国人群的扩展性携带者筛查项目提供了依据。

摘要：目的探讨基于食物交换份法的低铜饮食指导在肝豆状核变性患儿中的应用效果。方法采用自身前后对照研究设计,于2021年7月—2022年6月纳入年龄18周岁以下、诊断为肝豆状核变性、低铜饮食控制情况差的患儿共30例。就诊期间采用含铜食物交换表及铜食物交换图谱对患儿及其家长进行个体化低铜饮食指导。居家期间通过记录饮食日记和定期随访提高患儿低铜饮食的依从性。在原有药物治疗不变的情况下,观察患儿干预前后的24 h尿铜水平、肝功能指标及患儿家长低铜饮食知识水平的变化。结果干预8周、16周、24周后的24 h尿铜水平均较干预前下降(P<0.05);干预16周和24周后的24 h尿铜水平较干预8周后下降(P<0.05);干预24周后的24 h尿铜水平较干预16周后下降(P<0.05)。干预24周后,谷丙转氨酶和谷草转氨酶较干预前下降(P<0.05);16例患儿(53%)谷丙转氨酶和谷草转氨酶降至正常水平。干预8周后,患儿家长的低铜饮食知识得分明显高于干预前(P<0.05)。结论基于食物交换份法的低铜饮食指导可使肝豆状核变性患儿的尿铜水平下降,肝功能得到改善,患儿家长低铜饮食知识水平得以提高。

摘要：小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)是以RNA干扰(RNAi)为基础的一类具有独特药代动力学特性和作用机制的药物,目前已有5种基于两种递送系统的siRNA药物上市获批,并且有越来越多的siRNA药物进入临床研究阶段。生理药代动力学(PBPK)建模是一种辅助药物开发和决策的可靠的工具,并且越来越被监管机构接受,PBPK模型在小分子和大分子领域广泛应用的背景下,在指导siRNA类药物开发方面仍然处于起步阶段。本文结合siRNA类药物的药代动力学特征,概述了siRNA类药物PBPK模型开发的现状及模型构建中所需的关键参数,以期为今后PBPK模型在siRNA类药物研发中的应用,及优化设计临床前试验获得关键数据提供一定的借鉴。

摘要：目的通过分析肿瘤治疗性疫苗临床试验的现状及其特征,了解现阶段肿瘤治疗性疫苗临床转化研究的总体进度及其发展趋势。方法系统检索ClinicalTrial临床试验注册平台,获取2002—2023年肿瘤治疗性疫苗临床试验相关信息,包括分期、疫苗类型、研究设计及地理分布等,并进行总结分析。结果共获取2002—2023年肿瘤治疗性疫苗临床试验1563项,年均登记注册约70项。其中Ⅰ期976项(62.4%,976/1563)、Ⅱ期474项(30.3%,474/1563)、Ⅲ期68项(4.4%,68/1563)、其他45项(2.9%,45/1563)。Ⅰ~Ⅲ期临床试验在全球多个地区开展,多中心临床试验482项(31.8%)、单中心临床试验1036项(68.2%),疫苗类型以细胞载体疫苗(38.7%,588/1518)和蛋白/多肽疫苗(34.1%,518/1518)为主,研究设计主要为单臂研究(55.3%,840/1518)和随机对照研究(27.8%,422/1518)。疫苗适应证前5位依次为黑色素瘤(16.5%,251/1518)、胶质母细胞瘤(8.9%,135/1518)、乳腺癌(8.6%,130/1518)、前列腺癌(8.5%,129/1518)、肺癌(8.1%,123/1518)。结论肿瘤治疗性疫苗临床试验整体发展平稳,以探索性试验为主。疫苗类型主要为细胞载体疫苗,研究设计主要为单臂研究和随机对照研究,疫苗适应证多见于黑色素瘤、胶质母细胞瘤和乳腺癌。目前该领域临床转化存在较大难度,原因可能与免疫微环境的复杂性、患者异质性及疫苗设计和制备面临的挑战等因素有关。随着蛋白组学、基因测序、生物算法等新兴技术的应用,有望突破肿瘤治疗性疫苗研究的壁垒,实现更好的临床转化格局。

摘要：通过研究核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,NRF2)对卵巢颗粒细胞的作用及可能机制,为预防卵巢早衰提供依据。本文为细胞实验研究设计,于2022年1—12月在湖南师范大学附属长沙市妇幼保健院的医学实验中心完成。通过4-乙烯基环己烯二环氧(VCD)处理人卵巢颗粒细胞KGN细胞构建颗粒细胞损伤模型。先以不同浓度的VCD处理KGN细胞,采用细胞计数试剂(CCK-8)检测卵巢细胞增殖情况。CCK8确定半抑制(IC_(50))后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中雌二醇和孕酮的含量,活性氧(ROS)检测试剂盒检测卵巢细胞中ROS的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测NRF2的mRNA表达水平,免疫印迹检测NRF2的蛋白表达水平。进一步通过慢病毒转染构建NRF2干扰(siNRF2)和过表达(NRF2-OE)细胞模型,通过检测激素水平、氧化应激指标(ROS、SOD、GSH-Px)和自噬情况(LC3B水平)以分析调控NRF2对VCD处理细胞模型的影响。结果显示,VCD干预后以时间依赖性和剂量依赖性方式抑制卵巢颗粒细胞的增殖(F>100,P<0.05),24 h的IC_(50)为1.2 mmol/L。VCD处理后细胞上清中雌二醇由(56.32±10.18)ng/ml降低至(24.59±8.75)ng/ml(t=5.78,P<0.05);孕酮由(50.25±7.03)ng/ml降低至(25.13±6.67)ng/ml(t=6.54,P<0.05)。VCD处理后细胞的SOD由(44.47±7.71)ng/ml降低至(30.92±4.97)ng/ml(t=3.61,P<0.05);GSH-Px由(68.51±10.17)ng/ml降低至(35.19±6.59)ng/ml(t=5.73,P<0.05)。同时伴随自噬的增加和NRF2的下降。成功构建沉默NRF2和过表达NRF2的KGN细胞模型,随后采用VCD处理各组细胞,发现siNRF2组的细胞增殖活性明显减弱(t=8.37,P<0.05),而NRF2-OE能逆转VCD造成的细胞活性损伤(t=3.37,P<0.05)。siNRF2组的雌二醇水平最低(t=5.78,P<0.05),而NRF2-OE能逆转VCD造成的细胞雌二醇水平降低(t=5.58,P<0.05)。siNRF2组的孕酮水平最低(t=3.02,P<0.05),而NRF2-OE能逆转VCD造成的细胞孕酮水平降低(t=2.41,P<0.05)。siNRF2组的ROS水平最高(t=2.86,P<0.05),NRF2-OE能逆转VCD引起的ROS增加(t=3.14,P<0.05),siNRF2组的SOD酶含量最低(t=2.98,P<0.05),NRF2-OE能逆转VCD引起的SOD酶含量降低(t=4.72,P<0.05)。siNRF2组的GSH-Px酶含量最低(t=3.67,P<0.05),NRF2-OE能逆转VCD引起的抗氧化酶含量降低(t=2.71,P<0.05)。siNRF2组的LC3B水平最高(t=2.45,P<0.05),NRF2-OE能逆转VCD引起的LC3B升高(t=9.64,P<0.05)。综上,NRF2抑制ROS诱导的自噬性,从而发挥减少卵巢颗粒细胞损伤的作用。

摘要：目的建立快速鉴定皮肤活检组织中分枝杆菌的荧光实时PCR方法并进行验证。方法自行设计针对分枝杆菌属和14种常见分枝杆菌的引物探针,建立分枝杆菌的荧光实时PCR检测体系和方法。利用12株分枝杆菌标准菌株对该方法进行体外验证,并对2019年至2021年北京大学第一医院皮肤性病科收集的119例临床诊断皮肤分枝杆菌感染患者的组织样本进行检测。结果体外检测显示该方法对12种分枝杆菌标准株均有良好的检测敏感性和特异性。在119例临床诊断分枝杆菌皮肤感染患者活检标本中,培养阳性率仅为21.0%(25/119);荧光实时PCR检测分枝杆菌阳性率为76.5%(91/119),其中,44.5%(53/119)鉴定至菌种水平,以海分枝杆菌为主;31.9%(38/119)仅鉴定至分枝杆菌属水平。结论建立了可在患者皮肤组织样本中高效检测分枝杆菌的荧光实时PCR方法,但仍有漏诊可能,还需结合其他分子诊断方法提高敏感性和特异性。

摘要：背景国外研究报道肾小管间质性肾炎-葡萄膜炎(TINU)综合征在儿童急性间质性肾炎(AIN)中的占比较高,但部分患儿临床表现不典型,易漏诊,目前我国关于TINU综合征在AIN患儿中的占比及其预后尚不明确。目的分析AIN患儿中TINU综合征的临床和病理特征。设计回顾性队列研究。方法纳入2012年1月至2022年12月在北京大学第一医院经肾活检病理证实的AIN患儿,根据末次随访时的最终诊断分为TINU组和非TINU组。截取患儿的发病年龄、性别、既往史、前驱感染史、用药史,起病和复诊时临床表现、眼科会诊结果,首次就诊时的实验室检查结果,肾活检病理资料,治疗和随访情况。主要结局指标TINU综合征患儿的肾脏和眼部表现,治疗和预后。结果共21例AIN患儿纳入本研究,占同期肾活检患儿的1.6%。TINU组10例(48%),非TINU组11例(干燥综合征2例,药物相关和结节病各1例,病因不详7例)。TINU患儿中5例在肾活检前或同时、5例在肾活检后1~12个月诊断葡萄膜炎,均为双眼受累,前葡萄膜炎4例,全葡萄膜炎6例;非TINU组中的1例结节病患儿在病初诊断为葡萄膜炎。10例TINU患儿中,男、女各5例,起病年龄8~15岁,3例有前驱感染史,4例有药物治疗史,就诊时均有纳差\体重下降,发热4例,关节痛2例,眼部结膜充血、疼痛、流泪2例;有泡沫尿4例,尿量增多/新发夜尿6例,血压升高2例。经过全身和眼部应用糖皮质激素后,10例TINU组患儿肾脏表现均改善或消失,6例葡萄膜炎好转,未好转的1例予糖皮质激素点眼、3例联合其他免疫抑制剂治疗。随访时间为11(4,21)个月,2例在泼尼松停用或减量时出现AIN症状反复,予糖皮质激素和免疫抑制剂治疗后好转;2例出现眼部并发症(1例双眼继发性青光眼伴双侧视野缺损、1例白内障),3例仍有葡萄膜炎。TINU与非TINU所致的AIN患儿比较,人口学资料、发病年龄、前驱感染史、用药史、首诊时有眼部症状的患儿比例、其他临床症状、实验室检查指标、肾脏病理表现、肾脏复发比例等差异均无统计学意义。结论除眼部病变外,TINU综合征与其他病因所致AIN在临床表现、实验室检查和病理改变均类似;葡萄膜炎的临床表现隐匿,可晚于肾脏症状出现,对AIN患儿应重视眼科病史收集、眼科检查和随诊,以免漏诊TINU综合征。