摘要：表皮葡萄球菌是一种重要的机会致病性微生物,是院内交叉感染的一个重要原因.开发快速有效的检测技术对其防治具有重要意义.利用生物信息学方法进行分析,发现DeoR家族转录调控因子基因可用于表皮葡萄球菌鉴定.针对此基因设计引物,采用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)进行检测,在65℃条件下反应进行60 min后,电泳检测可见明显的阶梯状条带.比较了3株表皮葡萄球菌临床分离株和8株其他细菌(金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、弗劳氏枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌、屎肠球菌和化脓性链球菌),结果显示该方法具有良好的特异性.构建DeoR家族转录调控因子基因质粒载体后考察了检测的灵敏度,结果显示其最低检测限为105拷贝/反应.由此针对DeoR家族转录调控因子基因建立的LAMP检测方法可快速、简便、特异以及敏感的鉴定表皮葡萄球菌.

摘要：本试验旨在探讨CARD15基因StyⅠ酶切位点多态性与云南高原奶牛结核病易感性的关联。选择云南昆明、玉溪、大理等地结核病阳性奶牛103头,结核病阴性奶牛98头,共201头为研究对象,应用创造酶切位点原理设计引物,通过PCR-RFLP与PCR直接测序法相结合的检测方法,获得CARD15基因StyⅠ酶切位点的基因型及等位基因频率,分析该位点与云南高原奶牛结核病易感性的关系。结果显示,CARD15基因的StyⅠ酶切位点存在AA、AG、GG 3种基因型,在结核病例组中AA、AG、GG基因型频率为0.03、0.42和0.55,A、G等位基因频率为0.24和0.76;在结核对照组中AA、AG、GG基因型频率为0.01、0.05和0.94,A、G等位基因频率为0.04和0.96;对多态性位点的遗传模式进行分析,最佳遗传模式为显性遗传(dominant),在此遗传模式下基因型AG-AA在病例组的频率44.7%,明显高于对照组的频率6.1%,OR(95%CI)=0.08(OR<1),在病例组与对照组的分布之间有极显著差异(P<0.0001)。结果表明,云南高原奶牛CARD15基因StyⅠ酶切位点多态性与结核病的发生有显著关联性,且基因型AG-AA可能是结核易感型。

摘要：选择影响杂交水稻种子风筛精选中的3个主要因素,研究了各因素对杂交水稻种子精选质量的贡献。结果表明,在所选因素水平区间,上筛孔尺寸是杂交粳稻滇杂31获选率、杂交籼稻冈优827净度的重要影响因素,上筛孔尺寸与净度负相关,与获选率正相关;下筛孔尺寸不是净度的重要影响因素,却是获选率的重要影响因素且与之负相关;风速既不是净度也不是获选率的重要影响因素。

摘要：在少片变截面TB4282LE后钢板弹簧总成设计中,引入有限元方法和分析理论为基础的CAE分析及优化设计方法,对板簧性能及疲劳寿命进行了预测及评估分析。对钢板弹簧的研究提出了精益设计的概念,提高了设计效率及精度,解决了传统设计中的算不准的问题,构建了先进的少片变截面钢板弹簧开发模式。

摘要：为实现山羊两种疫病病原体——羊口疮病毒(ORFV)和山羊痘病毒(GTPV)的同步快速检测,基于ORFV的025基因及GTPV的ITR基因,分别设计用于普通双重PCR的引物两对、用于双重实时荧光定量PCR的特异性引物及探针两套。试验结果显示,所建立的ORFV-025/GTPV-ITR-S双重普通PCR方法,可实现对GTPV与ORFV的特异性双重检测,检测敏感度可达104拷贝/μL DNA;所建立的025-ITR二联探针实时荧光定量PCR方法亦可同时特异性检测ORFV和GTPV产生特异性荧光信号,二联探针的检测敏感度可分别达102.71拷贝/μL和102.88拷贝/μL DNA。本研究初步建立了可同步快速特异性检测ORFV和GTPV的双重普通PCR及二联实时荧光定量PCR检测方法。

摘要：以4个优良热带、亚热带玉米自交系为测验种,9个优良温带玉米自交系为被测系,按NCⅡ遗传交配设计配制36个杂交组合,在云南省昆明、曲靖和德宏3个不同生态条件下进行田间鉴评,研究其9个性状的配合力及遗传参数。结果表明:热带自交系CRN3760-1-2-2-1-1-2的产量GCA效应值最高,其次是YML46、[阿1112×T(5003×云146)]##-1-1-1-1-B、2870263-4-2-1-B-B-BB-B、IRF321、8723、23X等自交系,都具有显著的产量GCA正效应值,是组配强优势杂交组合的优良自交系。杂交组合CRN3760-1-2-2-1-1-2×23X、CRN3760-1-2-2-1-1-2×2870263-4-2-1-B-B-B-B-B、CRN3760-1-2-2-1-1-2×[阿1112×T(5003×云146)]##-1-1-1-1-B和YML46×8723具有显著的产量SCA效应值,有一定的增产潜力,可作为潜势组合在云南进一步鉴定其丰产性和稳定性。9个性状的遗传以加性基因效应为主,轴粗、百粒重和出籽率的狭义遗传力都大于55.2%,其变异由遗传引起的比重较大,宜在早代进行选择,穗粗、秃尖和穗行数的狭义遗传力低于23.2%,宜在晚代选择。

摘要：破碎机是冶金、矿山、电力、陶瓷、建筑等工业部门广泛应用的重要设备,而鄂式破碎机是其中比较重要的一种,动鄂是其重要件之一,也是一个结构较复杂的零件。破碎机机构优化设计是保证破碎机性能优越的最根本因素,而最合理的动鄂结构是保证破碎机性能优越的充分条件,它的强度和刚度直接影响设备的性能,但其结构复杂,用传统的计算方法难以计算,论文将用有限元分析的方法对动颚应力进行计算,找出其薄弱环节,进行优化设计。

摘要：【目的】miR-124与神经系统发育相关,在多细胞动物脑中特异表达。本研究拟验证miR-124是否在西方蜜蜂3种蜂型的脑中特异表达以及在3种蜂型当中表达差异与功能分析,为西方蜜蜂中miR-124功能研究奠定基础。【方法】设计茎-环状引物反转录miRNA,定量PCR(称为stem-loop RT-qPCR检测法)检测miR-124在西方蜜蜂3种蜂型头部及其他部位表达情况;以邻位相连法构建miR-124系统进化树;利用BioEdit软件对miR-124成熟序列进行同源性分析;查找miR-124在西方蜜蜂当中的靶基因并对靶基因进行功能分析。【结果】miR-124在3种蜂型头部高量表达,其中工蜂最高,雄蜂次之,蜂王最低;miR-124在3种蜂型的其他部位微量表达,相对于3种蜂型头部几乎不表达;多物种中,miR-124同源性最低达到82.6%,最高达到100%;在西方蜜蜂中获得96个miR-124靶基因,45个靶基因获得基因注释,功能归类显示多个miR-124靶基因参与神经发育与调节。【结论】miR-124在3种蜂型头部特异表达,其中在工蜂头部表达最高,雄蜂次之,蜂王最低,而在三型蜂中,由于工蜂的脑最发达,雄蜂的次之,蜂王的最小,推测miR-124与西方蜜蜂3种蜂型的脑发育和调控3种蜂型分工相关。

摘要：为建立一种快速、准确检测猪溶血性曼氏杆菌TaqMan荧光定量PCR方法,根据溶血性曼氏杆菌16S rRNA基因保守序列设计种特异性引物及探针,优化反应条件,建立了检测溶血性曼氏杆菌的TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果表明,以重组质粒pMD-MH-16S为标准品建立的标准曲线在3.06×10^8-3.06×10^1copies/L范围内具有良好的线性关系,最低可以检测到3.06×10^1 copies/L的标准品阳性质粒。该方法与其他24种常见细菌均无交叉反应,批内和批间变异系数均小于3%。应用建立的方法和普通PCR方法对65份临床样品进行检测,阳性率分别为56.92%和21.54%,阳性符合率为100%。本研究结果表明,所建立的方法可用于牛、羊溶血性曼氏杆菌感染的高通量快速诊断以及溶血性曼氏杆菌的快速鉴定及定量分析。

摘要：【目的】优化三七窝眼轮式排种器的结构参数,提高排种器的排种性能。【方法】以三七种子为研究对象,选取排种器的型孔数量、型孔直径、型孔深度和窝眼轮转速4个因素进行2次正交旋转组合试验;利用自制土槽试验台测试试验组排种合格指数、重播指数和漏播指数;通过响应曲面法对试验结果进行分析;建立各因素和试验指标的二次回归模型;分析各因素、各因素交互项和二次项对合格指数的影响规律;优化试验因素,并进行试验验证。【结果】影响排种器合格指数的因素主次顺序为型孔直径、型孔深度、型孔数量和窝眼轮转速。当型孔深度为5.4mm,窝眼轮转速为35 r·min-1,型孔数量为12～14,型孔直径为7.7～8.2 mm时,排种合格指数大于90,重播指数和漏播指数均小于5。优化参数后的验证结果与优化结果基本一致。【结论】可通过响应曲面法优化排种器性能。该研究可为三七播种机设计提供理论依据,为三七机械化种植奠定基础。