摘要：对20余种细菌16SrDNAs进行多序列比对与进化树分析,设计铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa,PA)荧光定量PCR(fluorescencequantitativePCR,FQ-PCR)特异性引物。提取PA基因组DNA,以特异性引物扩增16SrDNA靶片段,并构建重组质粒pMDT-Pfr。将梯度稀释的pMDT-Pfr质粒作为模板,用于建立定量标准曲线。以SYBRGreenI荧光染料建立20μL反应体系,对不同浓度的PADNA样品进行FQ-PCR检测。同时,以金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、福氏志贺菌、变形杆菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌和结核杆菌的基因组DNA作阴性对照,验证FQ-PCR方法检测PA的特异性。结果显示,设计的FQ-PCR引物的靶向序列,仅对PA16SrDNA有高度同源性;FQ-PCR方法检测PA,其灵敏度达3.6pg/μL的基因组DNA或(2.1×103±3.1×102)拷贝/μL的16SrDNA基因,并且具有很强的特异性;从细菌DNA提取到FQ-PCR检测,可在2h左右完成PA鉴定。较传统的培养鉴定法而言,以16SrDNA作为FQ-PCR靶基因快速检测PA,具有很好的研究价值与应用前景。

摘要：微球制剂是近年来缓释剂型的研究热点,根据临床需要,很多药物正被研究制成微球制剂,如抗癌类药物和蛋白质多肽类药物等。微球制剂的制备方法有多种,溶剂挥发法是常用的制备方法之一,现从微球制剂的评价指标包封率和载药量,释放性质,微球中的蛋白质活性等方面,介绍溶剂挥发法制备蛋白质多肽类微球的研究近况,重点介绍制备工艺和处方设计方面采取的改进。

摘要：目的观察血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性对采用不同耐力素质训练方法进行训练的士兵有氧耐力素质效绩提高的影响。方法随机抽取某步兵团248名无军事训练史的汉族男性新兵,均分为实验组和对照组,每组124名。实验组采用以"循环训练法"为理念设计的强化耐力训练方法 ;对照组采用部队常用耐力训练方法 ,即以5000m跑为主的训练方法 (每周5000m×3次,每日不超过1次)。两组总共进行8周的耐力素质训练。训练开始前和训练8周后分别考核记录5000m跑成绩并测定最大摄氧量(VO2max)作为两项耐力素质指标。然后检测两组士兵的ACE基因型,并按照不同基因型分为II、ID、DD型3组,分析不同ACE基因型及训练方法对士兵耐力素质的影响。结果实验组训练后VO2max、5000m跑成绩与训练前及对照组训练后比较均显著提高,差异有统计学意义(P0.05)。对照组中DD基因型5000m跑成绩和VO2max显著低于Ⅱ基因型和ID基因型(P0.05)。结论在为期8周的训练中,以"循环训练法"理念设计的强化耐力训练可有效提高士兵耐力素质;不同ACE基因型不能确切作为士兵耐力素质好坏和提升速度快慢的指标。

摘要：目的探求一种适合常规部队、能快速有效提高士兵有氧耐力素质、并可降低军事训练伤发生率的训练方法。方法随机抽取某步兵团248名无军事训练史的汉族男性新兵,均分为实验组和对照组,每组124名。实验组采用以"循环训练法"为理念设计的强化耐力训练方法 ;对照组采用部队常用耐力训练方法 ,即以5000m跑为主的训练方法 (每周5000m×3次,每日不超过1次)。两组总共进行8周的耐力素质训练。训练开始前和训练8周后分别测试士兵的安静脉搏、肺活量、VO2max和5000m成绩等耐力素质指标,并于训练8周后对士兵进行体检,统计有小腿肿胀和按压痛、膝关节肿痛、下腰痛等军事训练伤症状的人数,计算军事训练伤发生率。结果实验组训练后安静脉搏降低了8.0%,肺活量、VO2max、5000m成绩则分别提高了8.1%、20.0%、14.7%,与训练前及对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。实验组训练伤发生率(3.3%)显著低于对照组(8.1%,P<0.05)。结论以"循环训练法"为理念设计的强化耐力训练方法可有效提高部队士兵耐力素质并减少军事训练伤的发生。

摘要：目的研究36 h完全睡眠剥夺（total sleep deprivation,TSD）对脑执行控制功能的影响。方法试验采用自身前后对照设计,对14名健康男性进行Go/Nogo测验,同时进行事件相关电位（event-related potentials,ERP）记录及功能性磁共振成像（functional magnetic resonance imaging,fMRI）扫描。结果 36 h睡眠剥夺后受试者的正确击中率明显下降,错误反应率显著增高。ERP结果显示：（1）TSD使Nogo-N2和Nogo-P3波幅下降,潜伏期延长;（2）经过8 h的恢复性睡眠,Nogo-N2和Nogo-P3的波幅与TSD后相比有所恢复,但未恢复至基线水平。fMRI结果显示,SD后前扣带回皮质（anterior cingulate cortex,ACC）活动降低,前额叶皮质活动明显增强。结论 36 h睡眠剥夺导致脑执行控制功能的显著下降,前额叶皮质出现功能代偿是维持机体认知作业的重要特征。8 h恢复性睡眠可以使脑执行控制功能得到部分恢复,但并不能恢复至基线水平。

摘要：目的利用PCR-RFLP技术扩增7株布氏菌临床分离株16S RNA基因片段,为该菌的分子诊断学、遗传学和流行病学研究提供实验依据。方法参考GenBank公布的布氏菌ATCC 25840标准株序列,设计针对该菌16S RNA保守区的特异性引物,从临床分离培养7株布氏菌,提取DNA并行16S RNA片段的PCR扩增。将PCR产物克隆至PGEM-T载体进行测序并选用合适的限制性内切酶进行RFLP分析,将分析结果用于临床株的同源性及变异位点的研究,并对感染患者的临床资料进行回顾性分析,研究不同布氏菌基因型与感染患者临床特征的相关性。结果利用PCR扩增出的目的片段与预期一致,大小约为1500bp。测序及同源性分析表明,7株临床分离株之间存在98.88%的同源性和11个变异位点。RFLP结果将7株菌分为4个基因型,临床资料回顾性分析患者不同基因型与临床表现之间无明显联系。结论利用PCR技术扩增布氏菌16SRNA基因片段可以实现对该菌的早期诊断,为布氏菌的分子遗传学和流行病学提供依据。

摘要：目的:研究设计制作能够判断与测量亚健康状态及其中医证候特征的量表。方法:根据量表设计的原理与方法,结合文献研究和专家研讨等手段,并在中医理论指导下,通过对亚健康及中医证候的概念操作化、量表结构与类型的确定、条目池及其答案的产生、条目的筛选以及量表预调查的信度与效度检验等过程,设计制作测量量表。结果:形成了以自填式与封闭式为主的亚健康状态中医证候测量量表,量表主体结构内含4大部分,即躯体功能状况、心理功能状况、社会功能状况与中医特异状况,将其内容归类为15个主要方面,共由120个条目组成。结论:本量表可对不同人群的亚健康状态进行判断与测量,揭示亚健康人群的主要临床表现、中医基本证候特征及其分布规律,为亚健康状态的中医证候学研究提供有效的应用工具。

摘要：目的：优选马齿苋提取物的制备工艺条件。方法：采用L9（3^4）正交试验设计，以药材中α-亚麻酸转移率、浸膏得率和浸膏中α-亚麻酸的含量作为考察指标，采用HPLC法测定α-亚麻酸含量，并对所得结果进行方差分析，综合3个指标结果确定最佳工艺。结果：优选出的最佳工艺条件为将马齿苋提取液回收至无乙醇，加水至0．5g／mL，用10％的NaOH溶液调pH为7．5～8．0，5000r／min离心1min，沉淀加水至1g／mL，超声10min，5000r／min离心1min。结论：优选出的制备工艺稳定可靠，简便可行。

摘要：背景:利用人工合成生物可降解材料制备组织工程化尿道支架修复尿道狭窄有广泛临床应用前景。目的:观察种植自体尿道上皮细胞的生物可降解非编织网状尿道内支架修复战伤性尿道狭窄的效果及实用性。设计、时间及地点:随机对照动物体内实验,于2006-03/2007-03在解放军总医院试验动物中心完成。材料:钳取兔自体尿道黏膜组织,体外培养尿道上皮细胞,种植于L型聚乳酸为原料制备的生物可降解非编织网状尿道内支架上。方法:将成年新西兰雄兔28只随机分成2组,尿道内支架置入组建立战伤性尿道狭窄模型,然后切除狭窄瘢痕组织,置入植细胞的尿道内支架;正常对照组不造模,仅手术,不置入支架。主要观察指标:尿道镜和尿道造影观察支架及尿道通畅情况;尿流动力学检测观察排尿情况;苏木精-伊红染色观察细胞生长及组织相容性。结果:培养的尿路上皮细胞在尿道支架上生长、增殖状态良好,具有较好的组织相容性。植细胞支架置入后,无排尿困难和其他并发症。尿道镜、逆行尿道造影检查发现狭窄段尿道通畅;两组尿流动力学检测结果无显著性差异;组织学观察证实支架置入部位尿道能完全上皮化。结论:植自体尿路上皮细胞的可降解的非编织网状尿道内支架能成功修复爆震伤性狭窄段尿道,无并发症,具有临床可行性。

摘要：目的研究一种饮水澄清消毒剂杀灭水中大肠杆菌的效果及其影响因素,为实际应用提供科学依据。方法采用模拟现场水消毒试验方法,对该饮水澄清消毒剂杀灭大肠杆菌效果进行了评价。结果该饮水澄清消毒剂以二氯异氰尿酸钠为杀菌成分,聚合氯化铝为澄清剂组合而成。有效氯浓度为10 mg/L的该消毒剂能使水样中人工污染的大肠杆菌下降至0 cfu/100 ml。设计条件下的初始浊度、pH值、水温及色度对其杀菌效果无明显影响。结论该饮水澄清消毒剂对水体中大肠杆菌杀灭效果较好,具有良好的澄清作用,适应自然条件范围广。