摘要：利用Affymetrix寡核苷酸基因表达谱芯片对 2型糖尿病肾病模型动物———db/db小鼠的肾脏基因表达谱进行了研究.在此基础上,利用末端快速扩增法和RT PCR的方法,对筛选出来的一个糖尿病肾病相关EST进行了cDNA克隆和表达分析.得到了一长为 1 7kb的cDNA片段.序列分析和网上数据库比对发现,此cDNA片段是小鼠表达序列AL0 2 30 0 1的一部分.根据AL0 2 30 0 1序列设计特异性引物,利用半定量RT PCR的方法对AL0 2 30 0 1在db/db小鼠肾脏、肝脏、脂肪、骨胳肌、脑等组织中的表达情况进行了分析,发现AL0 2 30 0 1在db/db小鼠肾脏中的表达情况与基因芯片检测结果吻合,且AL0 2 30 0 1在肝脏、脂肪、骨胳肌和脑等糖尿病肾病相关联组织中均有差异表达.这些结果提示:AL0 2 30 0 1与db/db小鼠的糖尿病肾病具有相关性.上述工作有利于揭示AL0 2 30 0 1基因的功能。

摘要：背景:许多研究表明淀粉样β蛋白在阿尔茨海默病的发病中起着主要的作用,淀粉样β蛋白的减少将延缓阿尔茨海默病的发展,因此减少淀粉样β蛋白的产生成为干预阿尔茨海默病的一项重要策略。许多阿尔茨海默病患者因精神行为异常而接受抗精神病药物治疗,非典型抗精神病药物奥氮平与喹硫平能够明显地改善阿尔茨海默病患者临床整体印象评分,早期开始的长期干预能够改善患者预后。目的:观察奥氮平与喹硫平对双转染(瑞典淀粉样β蛋白前体蛋白基因和早老素1基因)鼠成神经瘤细胞分泌淀粉样β蛋白42的作用。设计:以细胞为研究对象,完全随机分组设计,对照实验研究。材料:所有研究工作均在加拿大萨斯卡彻温大学医学院神经精神研究所进行。鼠N2a成神经瘤细胞与双转染N2a细胞由康奈尔大学医学院神经病学及神经科学系提供。干预:双转染N2a细胞分别予200μmol/L奥氮平及50μmol/L喹硫平处理24h后,应用酶联免疫吸附反应法测定细胞内外淀粉样β蛋白的水平。应用四甲基偶氮唑盐方法检测细胞活性、BCA法测定细胞的蛋白质含量、免疫印迹检测N2a与双转染N2a细胞淀粉样β蛋白前体蛋白的表达、酶联免疫吸附法测定双转染N2a细胞分泌到培养液及细胞内的淀粉样β蛋白42水平。主要观察指标:测定双转染N2a细胞分泌到培养液及细胞内的淀?

摘要：目的:采用正交设计法对格拉司琼巴布剂基质处方进行优化。方法:通过正交设计,以影响巴布剂物理性状的几种主要辅科为考察因素,以各种辅料不同用量为考察水平,以成型巴布剂基质的快黏力和内聚力为指标,通过对数据的分析,优选出最佳的基质配方。结果:优化的基质配方为部分中和聚丙烯酸钠-氢氯化钙-聚乙烯吡洛烷酮-甘油(1:0．15:4:4)。结论:优化处方具有良好的涂展性、保湿性,且黏着力适中。

摘要：目的鉴于待测的生物活性因子均有适于其自身的最佳测定条件,规范了重组表皮生长因子(rhEGF)的MTT测定法。方法根据MTT测定法原理,在3个因素(每孔细胞数、MTT和胎牛血清浓度)及3个水平上进行了正交实验设计。结果MTT检测法的最佳条件是:Balb/c3T3细胞悬液(5×107cells·L-1)100μl·well-1,MTT(8g·L-1)20μl·well-1,FBS(1·5%)100μl·well-1。结论上述正交实验规范的MTT最佳实验条件,适用于Balb/c3T3细胞活性的检测及其药物抑制性实验。但在测定rhEGF生物活性时,为使对照孔细胞数保持在较低水平以便给生物活性因子留有适当的余地以显示其促细胞增殖活性,建议FBS浓度采用0·5%。

摘要：目的:研究不同年龄和注意状态下事件相关电位的变化特点。方法:智能正常的年轻和老年男性各15人,2×2析因设计,采用odd-ball模式,利用NicoletPathfinderⅡ型诱发电位仪,记录主动分辨靶刺激时,计数/不计数状态下事件相关电位各波潜伏期和P3波幅的变化。结果:年龄和注意状态对N1,P2潜伏期无显著影响,但对N2潜伏期犤年轻人计数(215.9±28.1)ms与不计数(229.4±39.2)ms;老年人计数(253.2±29.2)ms与不计数(281.1±46.2)ms犦,P3潜伏期犤年轻人计数(270.7±33.1)ms与不计数(274.3±42.9)ms;老年人计数(308.0±45.0)ms与不计数(345.1±51.2)ms犦和P3波幅犤年轻人计数(5.5±2.3)μV与不计数(2.6±1.2)μV;老年人计数(3.7±2.0)μV与不计数(2.5±1.3)μV犦均有明显的影响。在老龄和不计数状态时N2潜伏期出现明显的延长而P3波幅明显下降。P3潜伏期只受年龄的影响,注意状态对其无显著作用。年龄和注意状态对N2,P3潜伏期和P3波幅的影响不存在交互作用。结论:P3波幅与衰老和注意密切相关,P3潜伏期不易受被试注意力的影响,是一个稳定的测量认知功能的指标。

摘要：背景：近来大量研究表明，钙调神经磷酸酶依赖的信号转导通路在免疫系统、神经系统、心血管系统具有广泛的生物学效应，钙调神经磷酸酶活性改变与多种疾病发生发展密切相关。 目的：通过建立一肾一夹肾性高血压大鼠模型，观察高血压大鼠心脏、脾、肾脏、肺、脑、肝、主动脉等重要组织脏器钙调神经磷酸酶活性变化及环孢霉素A的调控作用。 设计：完全随机分组设计，对照实验。 单位：解放军总医院南四科。 方法：实验于2002-11／2003-06在解放军总医院老年外科实验室完成。选用雄性Wistar大鼠(清洁级)20只。动物随机分为3组：肾性高血压组[n=7，行一肾一夹手术，术后第4天开始给予生理盐水1mK／(kg·d)腹腔注射，9g／L盐水代饮水至4周]，环孢霉素A干预组(n=7，行 肾一夹手术后第4天给予环孢霉素A5mg／(kg·d)腹腔注射，9g／L盐水代饮水至4周)，假手术组(n=6，除不切除右肾及狭窄左肾动脉外，其余操作同手术组，假手术后第4天开始给予生理盐水1mL／(kg·d)腹腔注射，正常饮水至4周)。一肾一夹模型制作方法：将大鼠腹腔注射麻醉后，行右肾切除，左肾用直径0．2mm银夹狭窄左肾动脉。采用tail-cuff测压法测鼠尾收缩压。以对硝基磷酸酚为底物测定术后4周大鼠各组织器官钙调神经磷酸酶活性。两组差异性比较采用成组资料t检验。 主要观察指标：①各组大鼠各重要组织及器官钙调神经磷酸酶活性比较。②各组大鼠术前及术后4周收缩压比较。 结果：大鼠20只均进入结果分析。①收缩压：术前三组大鼠相近(P>0．05)。术后4周环孢霉素A干预组低于肾性高血压组，但差异不明显；肾性高血压组和环孢霉素A干预组大鼠均明显高于假手术组(t=2．54，3．01，P<0．05)。②肾、肺、心、脾、脑组织钙调神经磷酸酶活性：肾性高血压组大鼠明显高于假手术组(t=3．17～7．08，P<0．05)，环孢霉素A干预组明显低于肾性高血压组(t=2．91～7．25，P<0．05)。③肝细胞钙调神经磷酸酶活性：肾性高血压组和环孢霉素A干预组均明显低于假手术组(t=2．63，2．83，<0．05)。④主动脉钙调神经磷酸酶活性：各组大鼠相近。 结论：①肾性高血压大鼠心、脑、肾脏、脾脏、肺脏组织钙调神经磷酸酶活性均有显著升高，环孢霉素A对肾性高血压大鼠上诉各组织脏器钙调神经磷酸酶活性具有广泛的抑制作用。②环孢霉素A无明显降肾性高血压大鼠收缩压作用。

摘要：背景:猪肝结构与人类较为相似,结构相对简单,是研究活体肝移植较好的模型之一。供肝体积过小是临床成人活体肝移植面临的主要问题之一,探索稳定高效的动物模型对于推动小肝综合征的相关研究具有重要意义。目的:对体内和体外2种小体积肝移植物获取方法进行对比分析,以提供一个理想的成功率高的猪小体积肝移植模型建立方法。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-01/03在上海市泰科公司医疗培训部完成。材料:选用健康成年实验用广西巴马小型猪42只,制备21例次猪小体积肝移植模型。方法:选取体质量相近的广西巴马小型猪作为供受体,将动物按随机数字表法分为2组,体内切除减体积组共10对动物,体外切除减体积组共11对动物。应用全频超声乳化吸引刀+滴水双极电凝镊分别通过体内和体外2种途径,切除部分肝叶以获取小体积供肝植入受体。主要观察指标:小体积肝移植的无肝期时间、总手术时间、冷缺血时间、受体移植术中出血量和移植后肝断面胆漏例数。结果:两组在无肝期时间、总手术时间和冷缺血时间差异无显著性意义(P>0.05)。在移植术中出血量上,体外切除减体积组明显多于体内切除减体积组(P<0.05)。体外切除减体积组移植后肝断面胆漏发生率亦较体内切除减体积组高(50%,20%,P<0.05)。结论:选取体质量相近的供受体,应用超声刀行体内切除减体积是猪小体积肝移植模型建立可行有效的方法。

摘要：目的探讨军队卫生资源优化配置中卫生资源需要与利用情况的调查方法。方法对医院、疗养院、机关门诊部、防疫机构、药材保障机构进行全军范围内普查,对军队人员与师医院、旅团卫生队进行多阶段分层整群随机抽样调查,对军政后勤领导采用半格式化采访问卷抽样访谈。结果收集了军队各类卫生保障机构的卫生资源供需情况数据,调查了17295名军队人员的健康状况,访谈了107名军政后勤领导。结论建立了军队卫生资源需要与利用情况调查数据库,为今后的相关研究奠定了基础。撰写了调查统计分析报告,为卫生管理部门进行科学决策提供了可靠的数字依据。

摘要：运用计算机辅助药物设计技术和分子生物学技术,建立了一套集分子设计、化学合成和分子筛选三大系统为一体的抗真菌药创新设计体系。其工作原理是:通过药效构象搜寻、3D-QSAR研究,建立了抗真菌药物与受体作用模型,预测设计高活性化合物;另一方面,根据抗真菌药靶酶——羊毛甾醇14α-去甲基化酶的已知序列,采用同源蛋白模建技术构建其三维结构,再通过药物-靶酶对接研究,确定活性位点,设计与活性位点最佳匹配的活性化合物;然后针对设计的化合物类型,研究建立一套科学的合成方法,完成化合物的合成;最后以靶酶为模型,建立一套快速准确的分子筛选方法,用筛选结果指导进一步的设计与合成,直至得到最佳的新化学单体(NCE)。将该体系用于抗真菌药物设计,获得了一个广谱、高效、低毒的抗真菌新药——艾迪康唑。

摘要：P130Cas和paxillin分子是整合素家族下游重要的衔接分子.为了探索这两个分子在肿瘤细胞抗失巢凋亡中的作用,应用RNAi技术分别抑制抗失巢凋亡的胃癌细胞BGC82 3中paxillin和p130cas基因的表达,观察它们对细胞失巢性生长的影响.依据siRNA设计原则,分别设计针对p130cas和paxillin的两条序列;成功的构建了特异性封闭上述两分子的载体pWH1 p130cas和pWH1 paxillin .构建的载体瞬时转染贴壁培养和失巢培养的BGC82 3后,RT PCR和Western印迹检测发现paxillin和p130Cas分子在mRNA及蛋白水平的表达量均明显降低;倒置显微镜下观察发现,贴壁培养的胃癌细胞发生皱缩、脱落;失巢培养的细胞聚集成团的现象受到明显抑制,细胞团比对照组小,且较松散;MTT实验结果表明,失巢培养的BGC82 3pWH1 paxillin 组细胞存活率(32 19%±6 11% )和BGC82 3pWH1 p13 0cas组细胞存活率(2 8 5 2 %±5 0 2 % )与对照组相比显著下降(P <0 0 1vscontrol) ;FCM实验结果发现与失巢培养的对照组相比,BGC82 3pWH1 paxillin和BGC82 3pWH1 p13 0cas组细胞G1期抬高,并出现了凋亡峰.运用RNAi技术分别抑制了BGC82 3细胞中paxillin和p130Cas分子的表达,初步证明paxillin和p130Cas是细胞存活的重要信号分子,在肿瘤细胞抗失巢凋亡过程中具有重要的作用.