摘要：转基因大豆305423、MON89788、CV127、GTS40-3-2、356043作为商品化应用最为广泛的大豆品系,种植面积占世界转基因大豆总种植面积的80%以上。根据大豆内标准基因Lectin和5种转基因大豆品系的边界序列设计特异性引物。通过验证引物的适用性、特异性和灵敏度,优化多重PCR检测体系中不同引物的用量及反应退火温度,建立了能同时扩增大豆内源基因Lectin和5个转基因大豆品系的六重PCR检测体系。结果表明:确定的大豆内源基因和5个转基因大豆品系的引物具有很好的特异性,引物之间无交叉扩增和非特异性扩增,多重PCR方法的检测灵敏度达到0.1%。该方法可作为转基因大豆及其产品成分检测的辅助手段,快速检测转基因大豆及其产品中的相应品系。

摘要：以太岁取样的加水热溶解为特点设计4种提取方法,将提取效果好的2个DNA样品用Illumina MiSeq高通量测序平台测序。结果表明:滤膜法(SI3)和研磨法均可获得显示电泳条带的DNA,但前者能将太岁材料彻底破碎和滤除多糖;滤膜法样品测得优质序列46676条,聚类OTU 1095个,比研磨法多154个,只包含1个序列相对丰度大于1%的共有OTU,特有1个序列相对丰度41.14%的OTU,是研磨法的237倍,但滤膜法样品香农指数反比研磨法低1.37%,并导致两者菌群结构在各分类水平上有着明显差别。太岁DNA提取方法深刻影响细菌结构测定结果,滤膜法DNA菌群信息更真实,据其测知的优势结构为假单胞菌属(Pseudomonas)和不动杆菌属(Acinetobacter)。

摘要：试验通过饲养试验旨在研究牛至油对绵羊生产性能和CH4排放的影响。试验选用20只平均体重为(32.16±4.02) kg的东北细毛羊(Northeast finewool sheep)×美利奴(Merino)杂交的公绵羊,随机分为4组,选用单因素完全随机试验设计,每组5只,对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂基础饲粮中添加0.015%、0.030%和0.045%牛至油的试验饲粮。试验持续70 d,其中预试期10 d,正试期60 d,测定绵羊的生长性能、血清生化指标和CH4产量。结果表明:①添加0.015%牛至油组绵羊的干物质采食量(dry matter intake, DMI)、平均日增重(average daily gain, ADG)和饲料转化效率(feed conversion efficiency, FCE)均显著高于对照组(P0.05);②各处理组绵羊的血清生化指标和甲烷(methane,CH4)产量均未出现显著差异(P>0.05)。由此可知,绵羊饲粮中添加0.015%牛至油可提高绵羊生长性能,但对血清生化指标和CH4产量无显著影响。

摘要：为研究残缘璃眼蜱subolesin基因的生物学特性以及寻找新的抗蜱和蜱传病疫苗候选抗原,根据GenBank上登录的小亚璃眼蜱subolesin基因核苷酸序列设计特异性引物,以残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱的饥饿成蜱cDNA为模板,扩增出subolesin基因的完整阅读框(ORF)。将残缘璃眼蜱subolesin基因的PCR产物经EcoRⅠ+NotⅠ双酶切后连接至表达载体pGEX-4T-1,把重组质粒pGEX-4T-1-subolesin导入感受态细胞BL21(DE3)中,在37℃、1mmol/L IPTG条件下诱导表达。利用SDS-PAGE分析subolesin基因的体外表达特征;用Western-blot分析Subolesin蛋白的反应原性。结果显示,残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱subolesin基因的ORF长度分别为492、492、486bp,分别编码163、163、161个氨基酸。subolesin基因序列和推导的氨基酸序列的比对结果显示,残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱与参考的小亚璃眼蜱的核苷酸序列同源性分别为98%、98%、89%,氨基酸序列同源性分别为98%、99%、93%。SDS-PAGE和Western-blot结果显示,重组残缘璃眼蜱Subolesin蛋白的分子质量为45ku,纯化的subolesin重组抗原可与抗残缘璃眼蜱全蜱血清、残缘璃眼蜱唾液腺、卵巢血清有较强的反应原性。

摘要：本研究采用裂区试验设计方法,以玉米品种CB25、CB29、14CB123、12-2715和德美亚3(对照)为主处理,以种植密度6.00万、6.7500万、7.50、8.25万株/hm2为副处理,研究各品种在不同种植密度下对玉米主要农艺性状及产量表现,确定各品种的最佳种植密度。结果表明:品种、密度、品种与密度之间互作对产量均表现极显著差异,品种14CB123、CB25、12-2715在低密度6.00万株/hm2时产量表现突出,优于对照。

摘要：本研究根据鸭乙型肝炎病毒(DHBV)基因组C基因序列设计一对特异性引物,建立一种快速检测DHBV的SYBR Green荧光定量PCR方法。该方法在7.8×10^(2)copies/μL~7.8×10^(8)copies/μL模板量时,呈现良好的线性关系,相关系数R 2为0.999。利用该方法对来自山东不同地区的95份临床样品进行检测。结果显示,该方法特异性好,临床样品检测阳性率与常规PCR方法的符合率为97.9%,且灵敏度高于普通PCR约100倍。将该方法应用于DHBV感染雏鸭的动力学研究,结果表明,DHBV感染雏鸭11 d时病毒含量达到高峰,随后逐渐下降。该方法的建立不仅为临床提供一种对DHBV的快速准确的检测方法,也为药物有效评价时间点的选择提供了理论依据。

摘要：转基因大豆MON87701、MON87708、MON87769是我国大豆进口贸易中重点监测的转基因品系,为探讨这3个品系的高效监管技术手段,应用多重实时荧光聚合酶链式反应建立在同一反应体系中同时检测MON87701、MON87708、MON87769的方法。通过分析转基因大豆MON87701、MON87708、MON87769品系的特性序列及大豆内标准基因lectin序列,在此基础上优化设计1组多重PCR引物/探针,并以转基因大豆MON87701、MON87708和MON87769为测试样品,以其它转基因大豆、玉米、水稻、油菜、棉花及非转基因大豆为对照测试样品,经引物/探针浓度优化、特异性、灵敏度等测试,建立多重实时荧光PCR检测体系。结果显示:该多重PCR方法可从各种复杂样品中准确检出相应的靶标转基因大豆成分,对转基因大豆MON87701、MON87708和MON87769的检测灵敏度达到43个DNA拷贝,相当于比0.05%(w/w)。该方法特异性强、灵敏度高,在转基因大豆成分快速检测和品系鉴定中具有很好的应用前景。

摘要：为探究不同光照时间和温度对籽鹅繁殖性能及繁殖相关激素分泌的影响,试验以光照时间和温度为影响因子,采用2×3试验设计,将288只产蛋籽鹅随机分成6组,每组48只(40只♀,8只♂)。光照时间为12 h和14 h,温度处理为自然温度、(27±1)℃、(31±1)℃3种,结果表明:14 h、自然温度组籽鹅的平均产蛋数最高;6个组受精率均达到90%以上,14 h、自然温度组最高;12 h、自然温度组籽鹅受精蛋孵化率最高。高温处理组种鹅血清PRL浓度显著高于自然温度组(P<0.05),14 h、自然温度组种鹅血清GnRH、LH和FSH浓度显著高于高温处理组(P<0.05),初步确定14 h、自然温度组合可提高籽鹅种鹅的繁殖性能。

摘要：为建立快速、特异、灵敏的毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温扩增检测方法(CPA),以阿留申病毒属内病毒序列为参考,在VP2序列高变区保守区段设计合成4条特异引物。通过优化CPA反应条件,建立了毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温扩增检测方法,并进行了特异性、敏感性试验以及对临床样品的检测。结果显示,该方法可扩增水貂阿留申病毒(AMDV)和狐貉阿留申病毒(RFAV),对犬科和水貂组织以及常见病毒无特异性反应;对AMDV、RFAV可视化检测下限分别为5.38×10^2copies/μL、5. 93×10^2copies/μL;对83份临床样品的检测结果显示,其中有16份PCR检测为阴性,CPA、qPCR检测为阳性的样品,表明CPA检测方法优于传统PCR。本试验建立了一种高敏感性、特异性检测毛皮兽阿留申病毒的方法,通过添加荧光染料实现了可视化检测,它更加适合基层兽医站、养殖场进行快速核酸检测。

摘要：茎秆强度、株高、主茎节数、节间长度、茎叶重、根重等是评价大豆倒伏的重要相关农艺性状,为综合分析这些性状,以便揭示大豆倒伏的遗传机理,本研究以地理远缘重组自交系(RIL)群体为试材,在发生倒伏的3个主要时期,调查倒伏相关农艺性状和家系倒伏情况,分析不同生育时期主要农艺性状与田间实际倒伏的关系。结果表明:RIL群体在R4期开始发生倒伏,不同发育时期各主要农艺性状与家系倒伏情况相关性不同,R4期至R8期影响倒伏的主要农艺性状经历了由茎重向株高、节间长度和茎秆强度等性状的演变。本研究使用多个农艺性状设计了8个大豆倒伏评价指数综合分析RIL群体田间倒伏情况,各倒伏指数在各生育时期均与家系倒伏情况呈极显著正相关,且相关性均高于其它单一性状与实际倒伏情况的相关性。其中,倒伏指数[(节间长度×茎重)/茎杆强度]与实际倒伏情况相关性最高,且仅用最少农艺性状代替直观观察到的倒伏情况,可作为倒伏研究的一个复合评价指标用于对RIL群体进行抗倒伏QTL定位,为将来大豆抗倒伏优异等位基因的挖掘提供技术手段。