摘要：以扁蓿豆(Medicago ruthenica)为试材,采用改良的CTAB法提取DNA,利用正交设计L16(45)探讨10×PCRBuffer(含Mg2+)、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶及模板DNA用量对扁蓿豆ISSR-PCR反应的影响,正交试验的结果采用直观分析和方差分析相结合。建立了扁蓿豆的ISSR-PCR优化反应体系,在25μL反应体系中,TaqDNA聚合酶1.5U,10×PCR Buffer(含Mg2+)2.0 mmol/L,模板DNA0.5 ng/μL,dNTPs 0.6 mmol/L,引物0.9μmol/L。同时探讨引物HZD09211的最适退火温度为52.3℃。2个不同引物对20份扁蓿豆材料DNA进行ISSR-PCR扩增,结果显示该体系具有较高的稳定性。

摘要：为了比较不同生长年限红三叶(Trifolium pratense L.)在生产性能和营养价值方面的差异,确定其最佳利用时期,采用随机区组试验设计,以1至5龄红三叶为供试材料,对影响其生产性能的株高、分枝数、再生速度、干草产量等指标以及影响营养价值的粗蛋白、粗脂肪、钙、磷、酸性洗涤纤维等指标进行测定分析,并用灰色系统理论对其进行综合评价。结果表明:4龄红三叶在生产性能和营养价值方面的综合表现最佳,红三叶最佳利用时期为种植后第4年。

摘要：【目的】克隆与分析燕麦肌动蛋白基因片段.【方法】根据其他植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以燕麦叶片总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增出Actin基因片段并克隆到PUCm-T载体,进而转化大肠杆菌*** DH5α感受态细胞.阳性克隆经PCR鉴定后进行测序.【结果】扩增片段长678bp,共编码225个氨基酸;所得序列与GenBank中注册的Actin基因序列的同源性均在85%以上,与其他肌动蛋白的氨基酸序列的同源性达93%以上.【结论】系统进化分析表明,扩增到的燕麦肌动蛋白基因与羊草、长穗偃麦草和黑麦草等植物的肌动蛋白基因亲缘关系最为密切.

摘要：根据紫花苜蓿(Medicago sativa L.)抗盐胁迫基因LEA3-1(登录号:EU665182)的cDNA序列,设计1对特异引物,以经过盐胁迫的黄花苜蓿(Medicago falcata L.)的总RNA为模板,经RT-PCR克隆得到了488bp的cDNA片段。对序列分析结果发现,总长度为488bp的片段能编码108个氨基酸,主要为脯氨酸、丝氨酸、精氨酸、缬氨酸和酪氨酸这5种氨基酸,占总量的41%。经序列比对发现该片段与紫花苜蓿克隆MsMAPKL假想蛋白(GQ868709.1)基因的核苷酸、氨基酸相似度均为100%,在抗盐胁迫方面起重要作用。本研究在黄花苜蓿中成功得到了抗盐基因同源片段,为最终克隆黄花苜蓿抗盐胁迫基因全长奠定了基础。

摘要：以提取的苜蓿基因组DNA为模板,通过正交设计,筛选出ISSR-PCR反应体系中最适宜的各组分浓度,即20μL的反应体系中最适添加量分别为2.0 U/μL的Taq DNA聚合酶,0.3 mmol/L的dNTP,1.0 mmol/L的MgCl2,0.1μmol/L的ISSR引物以及30 ng/μL的DNA模板。在此基础上对30份不同苜蓿种质材料进行遗传多样性研究,通过聚类分析研究,将30份不同苜蓿种质材料分为四大类,第一大类为来自加拿大的4个苜蓿品种(系);第二大类为来自美国的12个苜蓿品种(系);第三大类为来自中国和荷兰的12个苜蓿品种(系);第四大类为来自澳大利亚的2个苜蓿品种(系)。

摘要：主要探讨了燕麦人工草地土壤酶活性对燕麦品种、施肥水平和豆科混播水平的响应,为合理评价燕麦人工草地的生态效应和对土壤培肥的影响提供理论依据。采用4个燕麦品种(A1:青燕1号;A2:林纳;A3:青海444;A4:青海甜燕麦)、4个施肥水平(B1:不施任何肥料,CK0;B2:尿素75kg/hm^2+磷酸二铵150kg/hm^2,IM;B3:有机肥1500kg/hm^2,OM;B4:尿素37.5kg/hm^2+磷酸二铵75kg/hm^2+有机肥750kg/hm^2,IM+OM)和4个箭筈豌豆混播水平(C1:0kg/hm^2;C2:45kg/hm^2;C3:60kg/hm^2;C4:75kg/hm^2)的三因素四水平正交试验设计,开展三因素对燕麦人工草地土壤酶活性(脲酶、纤维素酶和转化酶)影响的比较研究。结果表明,燕麦品种、施肥水平和豆科混播水平均能显著提高土壤酶活性;高寒区0~20cm耕作层土壤脲酶、纤维素酶和转化酶活性范围分别为400~900μg/g,80~180μg/g和4~7mg/g;3个因素对土壤酶活性影响的强弱顺序为:施肥水平>品种>豆科混播水平;在3个因素的影响下,随着生育期的推进,土壤脲酶和纤维素酶活性分别呈"先增后减"、"先降后增"的变化,分别在开花期和拔节期出现单峰值,转化酶活性呈"增—降—增—降"或"降—增—降"的变化,在拔节期和抽穗期出现双峰值。土壤酶相对活性指数和土壤酶相对活性综合指数能很好地反映土壤酶的变化。选用青海444或青海甜燕麦,混播箭筈豌豆45kg/hm^2,施尿素37.5kg/hm^2、磷酸二铵75kg/hm^2和有机肥750kg/hm^2时,对提高土壤酶活性效果最佳。

摘要：本研究以狗牙根幼叶为为试材,采用单因子试验和正交设计试验2种方法,对SRAP-PCR反应体系进行优化试验,结果表明狗牙根25μLSRAP-PCR最佳反应体系为:1.5mmol/LMg2+、0.25mmol/LdNTP、0.4μmol/L引物、1.5UTaq酶和80ng模板DNA,最佳退火温度为50.6℃。运用该体系对30份狗牙根种质进行验证,电泳结果显示扩增条带清晰、多态性高,证明该体系稳定可靠,这一优化体系的建立为今后利用SRAP标记技术对狗牙根进行分子生物学研究提供了帮助。

摘要：为系统评价不同栽培措施下燕麦人工草地系统固碳、固氮潜力,在青藏高原高寒地区采用燕麦品种、施肥水平和箭筈豌豆混播水平的三因素四水平正交试验设计[L_(16)(4~5)],开展不同措施对乳熟期燕麦人工草地土壤层次碳氮储量的影响研究,并讨论不同措施下的燕麦人工草地系统碳、氮储量分配机制。结果表明,品种、施肥和混播均显著影响了土壤C、N储量分配,施肥和混播对C、N储量分配影响较大。尿素+磷酸二铵+有机肥处理下,系统总C、N储量最大,分别达184.45 t·hm^(-2)和12.51 kg·hm^(-2);箭筈豌豆混播75 kg·hm^(-2)处理下,系统总C、N储量最大,分别达182.76 t·hm^(-2)和11.90 kg·hm^(-2)。燕麦乳熟期各土层C、N储量分配模式均依次表现为0~10 cm>10~20 cm>20~30 cm>30~40 cm>40~50 cm;其中,各土层C储量分配为27.35%、24.50%、21.39%、14.38%和11.08%,土壤N储量分配为28.62%、24.43%、17.95%、15.47%和12.49%。0~50 cm土层C、N储量分别占整个系统的98.69%和98.96%,而植物仅占1.31%和1.04%;植物茎、叶、穗和根生物C储量仅占系统的0.58%、0.30%、0.28%和0.15%,N储量仅占系统的0.28%、0.42%、0.29%和0.06%。本研究结果为高寒地区燕麦人工草地系统固碳、固氮方面的研究提供了理论基础。

摘要：采用三因素四水平正交试验设计[L_(16)(4~5)],研究了燕麦品种、施肥和箭筈豌豆混播对燕麦人工草地生物碳储量影响的研究,为燕麦人工草地生态评价提供理论依据。结果表明,品种、施肥和混播均显著影响燕麦草地生物碳储量,品种主要影响燕麦茎、穗和根生物碳储量,施肥主要影响燕麦叶生物碳和箭筈豌豆根生物碳储量;混播主要影响箭筈豌豆茎、叶生物碳储量。燕麦人工草地总碳储量为1 707.70～2 470.15kg·hm^(-2),其中利用青海甜燕麦和采用尿素+磷酸二铵+有机肥施肥处理,箭筈豌豆混播75kg·hm^(-2)或60kg·hm^(-2)时建植燕麦人工草地地上、地下总生物碳储量均表现较高,其地上总生物碳储量分别为2 204.7kg·hm^(-2),2 136.4kg·hm^(-2)和2 008.0kg·hm^(-2),地下总生物碳储量分别为265.4kg·hm^(-2),247.4kg·hm^(-2)和250.3kg·hm^(-2)。各器官碳储量及群落总生物碳储量均随生育期的推进显著增加,在乳熟期达到最大。燕麦和箭筈豌豆地上总生物碳储量分别在燕麦抽穗期—开花期和开花—乳熟期增长迅速。

摘要：【目的】了解高寒地区燕麦人工草地生物量分配格局对燕麦品种、施肥措施和混播水平的响应机制,为高寒地区人工草地建植提供依据。【方法】采用"三因素四水平"正交试验设计,包括4个燕麦品种,分别为青燕1号、林纳、青海444、青海甜燕麦;4种施肥措施,分别为不施任何肥料(CK0)、尿素75 kg/hm^2+磷酸二铵150 kg/hm^2(NP)、有机肥1500 kg/hm^2(OM)和尿素37.5 kg/hm^2+磷酸二铵75 kg/hm^2+有机肥750 kg/hm^2(NP+OM);4个箭筈豌豆混播水平,分别为0、45、60、75 kg/hm^2,在燕麦拔节期、抽穗期、开花期和乳熟期分别对各处理燕麦和箭筈豌豆各器官生物量进行了测定。【结果】燕麦人工草地地上生物量以青燕1号(85.57%)、尿素+磷酸二铵+有机肥处理(84.91%)和0 kg/hm^2混播水平(85.81%)时分配比例最高;地下生物量以林纳(18.04%)、不施肥(16.02%)和30 kg/hm^2混播水平(16.29%)时分配比例最高。茎、叶、穗和根生物量分配比例分别为44%~48%、19%~24%、17%~22%和14%~18%。茎、叶、穗和地下生物量分配随季节分别呈增加、先降后增、增加和下降的变化趋势;在各因素影响下,燕麦生长前期以叶生长为主,中、后期以茎生长为主,而箭筈豌豆在生长前期以根生长为主,中、后期以叶生长为主。燕麦生物量分配在整个生育期处于优势地位,地上生物量分配始终高于地下,表现为异速生长关系。茎和地下生物量分配在生长前期和后期分别受施肥措施和品种的影响;叶生物量分配在整个生育期受混播水平的影响;燕麦穗生物量分配主要受品种和混播水平的影响。【结论】品种、施肥措施和箭筈豌豆混播水平均对高寒地区燕麦人工草地生物量分配具有显著影响,选用青燕1号品种,单播,配施尿素37.5 kg/hm^2、磷酸二铵75 kg/hm^2、有机肥750 kg/hm^2时地上生物量分配最高;选用林纳,并混播30 kg/hm^2的箭筈豌豆,采用不施肥措施时地下生物量分配最高。