摘要：为挖掘新的拟除虫菊酯类农药降解基因,在大肠杆菌中实现异源高效表达,以本课题组前期筛选出的降解谱广泛、降解率较高的菌株解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)为研究对象,克隆其菊酯类农药降解酶基因BioH,在大肠杆菌中表达。通过解鸟氨酸拉乌尔菌全序列进行基因组注释、蛋白注释和通路注释,和已有菊酯类农药降解基因序列比对,筛选出潜在的具有菊酯类农药降解功能的基因;以解鸟氨酸拉乌尔菌基因组DNA为模板,根据功能基因序列设计特异性引物进行PCR扩增,回收目的片段后与pMD19-T载体连接,筛选阳性克隆并鉴定;酶切回收目的片段后和pET32a(+)表达载体连接,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,将验证正确的重组菌经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE分析蛋白表达情况。结果表明:通过筛选得到BioH基因,该基因具有水解酶的作用,同时也具有其他菊酯类农药降解基因序列中存在的保守五肽motif-GXSXG,PCR扩增后得到大小为783 bp的条带,通过重组技术获得阳性克隆,PCR扩增、酶切和DNA测序进行验证,重组菌经0.2 mmol/L IPTG诱导4 h后获得约为43 ku(包括6×His标签)分子量大小的重组蛋白,该蛋白以包涵体形式存在。本试验筛选并克隆出BioH基因,成功构建原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中得以表达。

摘要：从结构上看,环状核苷酸门控离子通道(CNGC)是孔-环阳离子通道的超家族,广泛存在于动植物中。根据系统亲缘关系,拟南芥CNGC家族可分为5个亚家族群,它们在抗病、花粉管生长、抗冷热胁迫、抵抗重金属离子毒害和抗盐抗旱等多种信号途径中发挥重要作用,协助植物细胞应对各种生物与非生物胁迫。主要对CNGC基因家族的结构和生物学功能进行综述性介绍,并对近年来关于该基因家族的最新研究进展进行系统阐述,为深入理解CNGC基因家族在植物生长和发育过程中的重要作用提供帮助。

摘要：【目的】制作了一款适用于小型动物的异氟烷吸入麻醉装置,用于麻醉豚鼠。【方法】基于现代动物麻醉学理论,先用制图软件设计麻醉装置样图,收集材料组装完成吸入麻醉装置;选取豚鼠40只,随机分为5个异氟烷浓度组(2%、2.5%、3%、3.5%、4%),使用本装置对其进行全身麻醉,记录麻醉各阶段所用时间,并通过监测麻醉过程中豚鼠的呼吸(RR)、心率(HR)、血氧(SpO 2)和体温(T)等生理指标的变化以及镇静、镇痛和肌松效果,评价该麻醉装置的安全性和实用性。【结果】采用本麻醉装置在异氟烷(2.5%、3%、3.5%)下对豚鼠进行全身麻醉,豚鼠达到外科麻醉深度的时间为(2.00±0.71)min,麻醉过程中豚鼠心率和呼吸次数稳定,体温下降不明显,部分生理反射迟钝或消失,苏醒时间约为(2.20±0.45)min。【结论】本设计装置能够用于豚鼠进行全身麻醉,效果确实、安全性好;异氟烷浓度为2.5%~3.5%时麻醉效果最佳,可广泛用于豚鼠等小型动物的试验操作。