摘要：旨在建立一种荧光LAMP快速检测方法用于检测羊痘病毒属病毒(CaPV)。根据羊痘病毒属病毒ORF068基因高度保守区域,设计特异性引物,优化反应温度、反应时间,进行特异性及灵敏度验证,建立了一种基于SYTO9荧光染料的CaPV荧光LAMP快速检测方法。结果表明,在60℃下扩增40 min为最适反应条件,最低检测限为3 copies/μL,与小反刍兽疫病毒、羊口疮病毒、牛病毒性腹泻病毒、口蹄疫病毒均无交叉反应,变异系数低于5%。选取36份模拟样品,采用该方法和实时荧光PCR方法一起对其进行检测,均检出阳性26份,其结果符合率为100%。本研究所建立的CaPV荧光LAMP检测方法灵敏度高、特异性好、操作简便,40 min内即判定结果,可用于临床CaPV感染的快速诊断,为开展相关疾病流行病学研究提供了技术支持,具有较好的应用前景。

摘要：为探讨适宜北京地区的塑料大棚番茄农机农艺融合栽培模式,以普罗旺斯番茄为试验对象,设计不同密度机械定植和人工定植4个处理,与传统人工定植(CK)的番茄在生长指标、产量指标、品质指标等方面进行对比。结果表明,在667 m2种植1820~2670株的范围内,不同栽培模式的番茄在株高、茎粗、叶片数、叶面积等方面差异较小;但随着密度增大,单果质量呈变小趋势,果实品质呈变差趋势。其中,T3(机械定植,株距40 cm,行距40 cm)的单果质量最大(208.48 g),CK(人工定植,株距30 cm,行距60~70 cm)的单果质量最小(145.79 g),果实的糖酸比T3最大(10.07),T1(机械定植,株距30 cm,行距40 cm)最小(8.58)。综合各方面数据考虑,在北京地区的塑料大棚番茄栽培中,采用机械化种植的T2处理(株距35 cm,行距40 cm,667 m^(2)定植2170株),可以实现机械化种植,并且在植株长势、果实产量和品质方面表现最优。

摘要：针对日光温室番茄生产通常采用南北垄向、宽垄窄沟的栽培模式,不利于机械化作业及管理效率低的问题,以东西垄向能够实现机械化作业为前提,在一栋日光温室内进行南北垄向和东西垄向番茄栽培对比试验,试验共设计4种栽培模式,其中东西向机械化作业的3种,南北向人工作业对比的1种,试验内容包括番茄植株生长、产量、品质三方面指标。试验结果表明:在密度约为4.08万株/hm 2时,南北垄向种植的番茄长势优于东西垄向种植的番茄,但在产量和品质方面变化不大,均无显著差异;东西垄向种植中,在密度约为3.6万~4.8万株/hm 2的范围内,可以采用中型机具进行机械化耕整地、移栽等作业。综合考虑番茄商品度和品质的差异,确定最佳的株距是35 cm。即在北京地区的日光温室番茄栽培中,采用大行距100 cm,小行距40 cm,株距35 cm的东西向宜机化种植模式,可以进行机械化作业,并可以实现优质和高产。

摘要：为建立一种快速简便、灵敏度高、准确性好的犬细小病毒环介导等温扩增(LAMP)可视化检测方法,本研究根据犬细小病毒(CPV)的VP2基因保守区域设计特异性引物,通过优化引物浓度、反应温度、反应时间,建立了犬细小病毒LAMP可视化快速检测方法。结果显示,该方法在63℃条件下恒温扩增60 min具有良好的敏感性和特异性,其最低检测限为10拷贝/μL,与犬瘟热病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒、犬流感病毒均无交叉反应。对200份临床样品进行检测,检出阳性样品21份,与实时荧光定量PCR检测结果符合率为100%。该方法无需特殊设备,肉眼即可直接观察检测结果,具有高效、简便、特异性好、灵敏度高等优点,适用于犬细小病毒现场快速诊断。

摘要：为建立一种快速诊断美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(NA-PRRSV)的可视化检测方法,根据GenBank已发表的美洲型PRRSV经典病毒株JXA1序列,运用在线生物软件设计合成并筛选出1组引物,通过反应体系优化,建立了NA-PRRSV RT-LAMP可视化快速检测方法,并验证了该方法的特异性、敏感性,同时开展了初步临床应用。结果显示:该方法具有良好的特异性和较高的灵敏度,可检测病毒RNA模板的最低浓度为10 copies/μL;应用该方法检测30份临床样品,结果与实时荧光RT-PCR方法符合率为100%,进一步证实了该方法的可行性。结果表明,所建立的RT-LAMP检测方法具有特异性好、灵敏度高、快速、可视等优点,适用于NA-PRRSV的现场快速检测。本研究为NA-PRRSV的快速、准确鉴别提供了有效手段。

摘要：为建立一种适用于现场快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M基因编码区序列,分别设计合成3组引物,通过对引物的筛选和反应条件优化,建立了PEDV RT-LAMP可视化快速检测方法。灵敏度和特异性试验结果显示,本方法在65℃45 min对PEDV的检测灵敏度为2 copies/μL,与猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒均无交叉反应。利用该方法对30份送检的临床样品进行检测,检出阳性样品8份,与荧光定量RT-PCR检测结果一致。试验表明,所建立的RT-LAMP检测方法具有特异性好、灵敏度高、快速、结果可视、设备适用范围广等优点,适用于PEDV现场快速检测。