摘要：企业是一系列契约的集合,管理者和股东是委托代理的契约关系,在委托—代理框架下,委托人和代理人在签约前和签约后都存在着信息不对称,委托人只能获得代理人行动的不完全信息,这使委托人必须设计一个激励合同以促使代理人从自身利益出发选择一个对委托人最有利的行动。

摘要：通过分子结构设计法,以可聚合活性端与甲基烯丙基聚氧乙烯醚(IPEG)和丙烯酸(AA)在水溶液中共聚,合成一种全新支化结构的聚羧酸系减水剂。通过单因素变量优化实验,讨论了聚合阶段酸醚比、巯基乙酸(TGA)、过硫酸铵(APS)和滴加时间对水泥净浆流动度的影响,并采用红外(IR)对所得聚合产物进行结构表征。在本研究确定的聚合条件下合成了支化结构的聚羧酸系减水剂,水泥净浆的研究结果表明,支化结构的聚羧酸系减水剂相比传统梳状结构聚羧酸系减水剂具有更高的减水率、更优异的分散及分散保持性能。

摘要：目的 评价基于CRISPR-Cas13a技术的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)检测方法的应用价值。方法 收集25例HBV感染患者和5例非HBV感染患者的肝组织标本,提取肝组织的总DNA,依次使用HindⅢ内切酶和质粒安全性ATP依赖DNA酶(PSAD)消化;设计HBV cccDNA的特异性引物,扩增消化后的产物;利用CRISPR/Cas13a技术建立CRISPR-HBV cccDNA检测方法,通过HBV cccDNA质粒和临床样本对该方法进行评价,并利用数字PCR和荧光定量PCR方法进行比较。结果 本研究建立的方法检测HBV cccDNA质粒的灵敏度为1 copies/μL,显著高于数字PCR(10 copies/μL,P<0.01)和荧光定量PCR(10^(3)copies/μL,P<0.01);建立的方法检测HBV cccDNA阳性样本的灵敏度为1 copies/μL,与数字PCR相同,高于荧光定量PCR(10 copies/μL,P<0.01);建立的方法对25例HBV感染的临床肝组织样本的检出阳性率为80%,均高于数字PCR(64%)和荧光定量PCR(48%)。结论 本研究建立的CRISPR-HBV cccDNA检测方法在乙肝患者肝组织标本HBV cccDNA检测中具有较高的灵敏度,为评价乙肝患者的临床治疗效果和监测停药复发等情况提供了有效帮助。

摘要：目的建立一种基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)检测方法。方法提取2017年6月至2020年10月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的4例乙型肝炎患者肝脏总DNA后,使用HindⅢ内切酶和质粒安全性ATP依赖DNA酶(PSAD)分别进行酶切;根据松弛环状DNA(rcDNA)和cccDNA的结构差异,设计特异性扩增HBV cccDNA的引物,对酶切后的产物进行滚环扩增(RCA)和PCR扩增;并筛选crRNA,建立基于CRISPR/Cas13a技术的HBV cccDNA检测新方法。结果利用α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)和HBV表面抗原(HBsAg)引物对双重酶切后的产物进行扩增,验证产物中HBV基因组的存在;利用HBV cccDNA和HBV rcDNA引物对PSDA酶切后的产物扩增,验证了产物中只存在HBV cccDNA;利用RCA后的阳性样本作为模板梯度稀释,然后进行PCR扩增转录后使用CRISPR/Cas13a检测,计算出检测下限为10拷贝/μl。结论本研究建立了RCA-PCR-CRISPR-Cas13a的新型检测方法,可对HBV cccDNA进行高灵敏度和高特异性检测,为乙型肝炎患者抗病毒治疗评估、治疗终点的确定以及调整治疗方案提供了有效的监测手段。

摘要：目的采用CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法构建DEAD-box RNA解旋酶3X连锁(DEAD-box RNA helicase 3X-linked,Ddx3x)肝脏条件性敲除小鼠。方法设计特异的sgRNA序列,在Ddx3x基因外显子4~10两端插入LoxP序列,构建Ddx3x-flox小鼠。采用PCR方法对F0代和F1代小鼠进行基因鉴定。将Ddx3x-flox F1代小鼠与特异性表达Alb-Cre的工具鼠交配,获得肝脏条件性敲除Ddx3x基因小鼠(Ddx3x^(Δhep))。采用PCR方法和Western blotting方法分别检测Ddx3x^(Δhep)基因小鼠目的基因与蛋白的表达。选取8周龄雄性野生型C57/6J小鼠、Ddx3x^(Δhep)小鼠、Ddx3x^(fl/fl)小鼠,测定血清ALT、AST水平评价肝脏肝损伤情况。结果对F1代小鼠基因PCR鉴定的结果表明,基因型符合Ddx3x^(fl/fl);F1代小鼠与Alb-Cre小鼠杂交,子代与Ddx3x^(fl/fl)小鼠杂交,即获得Ddx3x^(Δhep)小鼠;PCR与Western blotting结果显示,目的小鼠肝组织中Ddx3x基因和蛋白表达显著降低。此外,Ddx3x^(Δhep)小鼠无胚胎致死现象,出生后生理状况良好。正常饲养条件下,Ddx3x^(Δhep)小鼠与Ddx3x^(fl/fl)小鼠及野生型小鼠相比,血清ALT、AST指标及体质量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论基于CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP方法成功构建了Ddx3x^(Δhep)小鼠动物模型,为后续研究Ddx3x在肝脏中的生物学功能及作用机制奠定了良好的基础。

摘要：针对目前数字电影流动放映集中式管理中的安全与信任问题,提出一种基于区块链技术的数字电影流动放映系统架构。以区块链技术的去中心化共识机制和IPFS数据分布式存储机制保障数据的可信和可追溯,采用区块链智能合约脚本设计影片交易、授权认证、放映监管等环节的业务逻辑,融合数据存储机制和数据地址记录,在版权方、院线、放映队、数字节目管理中心、监管部门间达成分布式共识,形成高效准确的执行,减少交易和授权中的人为干预性,从而保证流动放映操作全程可控。

摘要：采用数值模拟的方法,设计了一种微波强化有机废水处理系统。利用COMSOL Multiphysics将电磁场、温度场、流场、浓度场成功地耦合在一起。模型优化结果表明,管径为4.3 cm,两根波导管垂直安装时污染物去除率最高;模型验证结果表明,水力停留时间实测与模拟值匹配度为"good";废水出口温度实测与模拟值均方根误差在2.80~3.54℃之间;场强分布实测图与模拟图符合较好;对硝基苯酚出口处去除率实测值与模拟值相对误差为9.79%。数学模型可为微波强化有机废水处理反应器或化学反应器设计提供参考。

摘要：为印证不同文明间相互交流、借鉴、共同发展这一历史发展规律,本文以金玉饰物间的嬗变现象为切入点,通过梳理、分析我国古代金、玉饰物的发展脉络,探讨了金玉合璧出现的必然性,从而展示出了以金玉饰物为媒介的不同文明之间交流、互鉴和发展的动态。从金、玉饰物材质使用、色彩搭配和工艺运用等方面,探讨两者间嬗变和结合这一历史现象,揭示其背后不同文化间排斥与包容、纳新与再创的过程,因此本研究具有一定社会文明发展的理论意义和实践价值。

摘要：目前,商务旅游高等教育成为旅游学科建设中的重点内容。如何培养胜任职业要求的商务旅游人才成为一个亟待破解的课题。为此,在构建商务旅游人才胜任力模型基础上,提出了构造胜任型教学体系、突出隐性特质培养和拓展国际化视野的商务旅游人才培养策略。

摘要：针对农业大棚蔬菜种植费心费力的问题,设计开发了基于物联网技术的环境状态显示和控制系统,为了方便实时监测大棚内的信息和控制环境变量,开发出微信小程序,用户只需扫描二维码,进行身份验证后即可控制各项设备开关用以改变大棚内的环境状态。通过Web页面或手机扫描二维码,用户可随时查看大棚内的环境参数,如空气温湿度、光照强度、土壤湿度等,并判断其是否符合蔬菜的生长环境。基于控制系统,用户可以在Web页面或手机端发送命令,改变环境参数,如洒水、通风等。课题构建的物联网监控系统将传感器、物联网网关、无线数据传输、二维码和手机终端等技术相结合,采集农作物生长过程中的环境参数,同时能够随时随地控制环境参数,对农作物的科学种植具有重要的指导意义,有利于农业的转型和发展。