摘要：根据紫花苜蓿(Medicago sativa L.)抗盐胁迫基因LEA3-1(登录号:EU665182)的cDNA序列,设计1对特异引物,以经过盐胁迫的黄花苜蓿(Medicago falcata L.)的总RNA为模板,经RT-PCR克隆得到了488bp的cDNA片段。对序列分析结果发现,总长度为488bp的片段能编码108个氨基酸,主要为脯氨酸、丝氨酸、精氨酸、缬氨酸和酪氨酸这5种氨基酸,占总量的41%。经序列比对发现该片段与紫花苜蓿克隆MsMAPKL假想蛋白(GQ868709.1)基因的核苷酸、氨基酸相似度均为100%,在抗盐胁迫方面起重要作用。本研究在黄花苜蓿中成功得到了抗盐基因同源片段,为最终克隆黄花苜蓿抗盐胁迫基因全长奠定了基础。

摘要：以提取的苜蓿基因组DNA为模板,通过正交设计,筛选出ISSR-PCR反应体系中最适宜的各组分浓度,即20μL的反应体系中最适添加量分别为2.0 U/μL的Taq DNA聚合酶,0.3 mmol/L的dNTP,1.0 mmol/L的MgCl2,0.1μmol/L的ISSR引物以及30 ng/μL的DNA模板。在此基础上对30份不同苜蓿种质材料进行遗传多样性研究,通过聚类分析研究,将30份不同苜蓿种质材料分为四大类,第一大类为来自加拿大的4个苜蓿品种(系);第二大类为来自美国的12个苜蓿品种(系);第三大类为来自中国和荷兰的12个苜蓿品种(系);第四大类为来自澳大利亚的2个苜蓿品种(系)。