摘要：目的通过优化表皮细胞分离条件,最大程度的获得基底层内的表皮细胞。方法采用D ispaseⅡ酶与胰蛋白酶联合消化法分离培养表皮细胞。将D ispaseⅡ酶浓度、胰蛋白酶浓度及其作用时间作为实验因素,利用L 16(44)正交表设计实验,优化最佳分离条件。观察不同分离条件对表皮细胞生长情况、贴壁率、克隆形成率的影响。正交设计的计量资料数据用方差分析。结果D ispaseⅡ酶、胰蛋白酶的作用浓度、作用时间对原代分离的活细胞数无显著影响;胰蛋白酶的作用浓度、作用时间对24h贴壁率有显著影响;胰蛋白酶作用时间显著影响克隆形成率。0.125%D ispaseⅡ酶冷消化10h、0.1%胰蛋白酶37℃消化30 m in,分离的原代表皮细胞克隆形成率最高。结论通过优化表皮细胞分离条件,可最大程度的得到有克隆形成能力的细胞,从而为利用表皮细胞作为人工皮肤的种子细胞奠定基础。

摘要：目的探讨生长因子（EGF）在人表皮细胞无血清培养中的作用，寻找较好组合．以期加快表皮细胞成皮。方法选择EGF、胰岛素、霍乱毒素、氢化考的松4个实验因素，每个因素设立4个浓度水平。利用L16（4X4）正交表设计试验，考察不同培养条件对表皮细胞生长情况、克隆形成率的影响。结果EGF在无血清培养中对培养人表皮细胞的生长及增殖有明显促进作用（P〈0．01），在一定范围内（5～20ng／m1）随EGF浓度提高，效应加强；胰岛素浓度在5g／ml时对培养细胞的生长及增殖影响最大；霍乱毒素浓度在4．2ng／ml时作用最好；氢化考的松作用不明显。EGF、胰岛素、霍乱毒素、氢化考的松分别取20ng／ml、5μg／ml、8．4ng／ml、0．2μg／ml浓度时细胞生长及增殖效果最好。结论采用此优化的培养方法，表皮细胞的生长比较迅速，分化不太明显，可保持较旺盛的增殖力。

摘要：[目的]设计1份压疮及皮肤其他损伤流行病学调研工具,间接反映皮肤损伤的流行病学特征,为临床实施有效干预提供依据.[方法]通过国内外文献回顾,资料整合,最初形成压疮及皮肤其他损伤流行病学调研工具（草案）,选取26名专家对初步形成的调研工具进行3轮Delphi法评价,根据专家提出的修改意见构建压疮及皮肤其他损伤流行病学调研工具,并通过分析专家积极系数、权威程度及协调程度来检验本研究的内容效度.[结果]3轮咨询专家的积极系数分别为96.3%、100.0%和100.0%,专家的权威程度为0.83,经过3轮咨询后各指标的专家意见变异系数为0.055~0.234.[结论]压疮及皮肤其他损伤流行病学调研工具能有效、全面地反映压疮及皮肤其他损伤的发生及伤情情况,可了解皮肤损伤的预防现况,可为临床实施有效干预提供依据.