摘要：目的探讨中药丹参主要活性成分丹酚酸B(Sal B)对人牙周膜细胞(h PDLCs)成骨分化的影响。方法取第3代h PDLCs进行实验,运用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度丹酚酸B对h PDLCs增殖活性影响,通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节染色、骨钙素(OCN)m RNA表达来探讨丹酚酸B对h PDLCs成骨分化的影响。结果丹酚酸B对h PDLCs增殖活性无影响。当丹酚酸B浓度为0.5、1、5μmol·L-1时均能增加h PDLCs的ALP活性和OCN m RNA表达,与OIM组比较差异有统计学意义(P<0.05);且当丹酚酸B浓度为0.5、1、5μmol·L-1时h PDLCs形成矿化结节数量明显高于OIM组。结论适宜浓度的丹酚酸B能有效促进h PDLCs成骨分化。

摘要：目的建立一种低成本、高效率、操作简便的单核苷酸多态性(SNP)检测技术。方法采用自行设计的"ShineRoar 探针",结合融解曲线技术检测目的基因 SNP。并根据其工作原理分别对肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNFRⅡ)和载脂蛋白 M(apoM)的基因多态性进行检测;同时用 DNA 测序技术鉴定 ShineRoar 探针技术的准确性。结果融解曲线分析结果显示,某一基因的野生型及突变型纯合子分别在2个不同的融解温度出现融解谷。TNFRⅡ基因第6外显子196位突变(ATG→AGG)所产生的 T 和 G 等位基因的融解温度分别为(52.84±0.75)℃和(58.38±0.61)℃;apoM T-778C 突变所产生的 T 和 C 等位基因的融解温度分别为(42.55±0.73)℃和(49.19±0.57)℃。一致性 Kappa 检验显示 ShineRoar 探针技术与 DNA 测序技术的 SNP 检测结果一致(Kappa=1,P=0.000)。结论ShineRoar 探针技术简单、快速、准确,适用于大批量基因分型的研究。

摘要：目的比较急性生理和慢性健康评估Ⅱ（acutephysiologyandchronichealthevalua·tion11，APACHEⅡ）评分、序贯性器官衰竭评估（sequentialorganfailureassessment，SOFA）评分与降钙素原（procalcitonin，PCT）在评估严重多发伤中的价值。方法回顾性分析2010年7月1日-2011年10月31日收治的严重多发伤患者的临床资料。对严重多发伤患者24h内常规进行PCT检测及APECHEII评分、SOFA评分，对1周内发生脓毒症的严重多发伤患者1周时再次进行PCT检测及APECHEⅡ评分、SOFA评分。结果对发生脓毒症的严重多发伤患者，APACHEⅡ评分、SOFA评分在感染性休克组高于严重脓毒症组和脓毒症组（P〈0．01），PCT在脓毒症组、严重脓毒症组、感染性休克组差异无统计学意义（P〉0．05）。人院APECHEⅡ评分、SOFA评分、PCT在预测严重多发伤患者出现脓毒症的接受者操作特性曲线（receiveroperatingcharacteristiccurve，ROC）的曲线下面积（areasunderthecurve，AUC）分别为0．615，0．663，0．160，入院APECHEⅡ评分、SOFA评分、PCT在预测严重多发伤发生死亡的ROC的AUC分别为0．576，0．571，0．619。1周时APECHEⅡ评分、SOFA评分、PCT在预测严重多发伤脓毒症患者发生死亡的ROC的AUC分别为0．746，0．837，0．600。结论APECHEⅡ评分和SOFA评分评估严重多发伤脓毒症的感染严重程度优于PCT，SOFA评分预测严重多发伤发生脓毒症的效果最好，PCT最差。PCT预测严重多发伤发生死亡的效果最好，SOFA评分最差。SOFA评分预测严重多发伤脓毒症患者发生死亡的准确性优于APECHEU评分和PCT。

摘要：目的探索依据视觉生理原理设计的视觉综合干预方法对少年儿童近视的预防效果。方法前瞻性临床对照研究。对2009年3-6月在南京市中西医结合医院眼科采取前瞻性临床对照方法，选取小学二、三年级学生300名，经评估后依患近视风险度分层随机分为三组。综合干预组100例，接受视觉综合训练、视近配戴棱凸透镜和健康教育；棱凸透镜干预组100例，视近配戴棱凸透镜和健康教育；对照组100例只接受健康教育。所有观察对象都经过眼科检查，排除器质性眼病和遗传性高度近视，眼位正常、眼球运动正常，视力低于1．0可用负镜片矫正。对完成两年随访的样本采用方差分析，并在组间进行两两比较，分别检验各组平均近视屈光度变化（x）和眼轴增长（A）差异是否存在统计学意义。结果最终完成两年随访者纳入样本，其中综合干预组83人（屈光度变化平均增长（-0．4367±0．2238）DS，眼轴平均增长（0．1506±0．0666）mm；棱凸透镜干预组87人屈光度平均增长（-0．6447±0．2144）DS，眼轴平均增长（0．2161±0．0723）mm；对照组85人，屈光度平均增长（-1．4441±0．4232）DS，眼轴平均增长（0．4802±0．1433）mm。方差分析显示，屈光度变化比较中，三组样本均数差异有统计学意义（F=261．03，P〈0．001），两两比较三组样本均数互不相同差异有统计学意义（三组两两比较均为P〈0．001）；眼轴平均增长值比较中，各组均数也不相同（F=255．55，P〈0．001）两两比较差有统计学意义（P〈0．001）。结论以减少近用眼远视离焦、加强调节功能训练和周边视野刺激为主的视觉综合干预方案，对青少年近视预防有一定效果。

摘要：目的探讨不同残根处理术式(牙冠延长术和正畸牵引术)及不同肩领高度对预成碳纤维桩核修复后残根抗折力的影响。方法将56颗完整的单根管下颌第一前磨牙行根管治疗后,于颊侧釉牙骨质界上1.0 mm处截冠,制备残根模型,随机分为7组,每组8颗。A组为对照组,根颈部不制备牙本质肩领;B、C、D组分别通过模拟牙冠延长术暴露残根颈部断面并制备一定高度的肩领(1.0、2.0、3.0 mm);E、F、G组分别通过模拟正畸牵引术暴露残根颈部断面并制备肩领(1.0、2.0、3.0 mm)。所有残根均采用碳纤维桩核联合铸造全冠修复。试件自全冠颈缘完成线下2.0 mm包埋于自凝塑料中,电子万能试验机以与牙长轴成150°、横梁位移速度1.0 mm·min-1于颊尖顶加载,测定折裂载荷及折裂方式。结果 A^G组试件的折裂载荷依次为(1.13±0.15)、(1.27±0.18)、(1.02±0.11)、(1.05±0.12)、(1.63±0.14)、(1.92±0.19)、(1.93±0.15)kN。残根颈部处理方式和牙本质肩领均对残根的抗折力产生显著的影响,且两因素间存在协同作用(F=33.396,P<0.001);在肩领高度相同时,采用模拟正畸牵引术组牙体的折裂载荷均显著高于采用模拟牙冠延长术组(P<0.001)。各组间折裂方式无统计学差异(P=1.00)。结论采用正畸牵引术暴露残根颈部断面,并制备1.0 mm以上高度的肩领,可以更好地提高残根的抗折力。

摘要：目的设计一种用于玻璃-聚二甲基硅氧烷(PDMS)灌注式细胞培养芯片的温度控制系统,代替传统的细胞培养箱,以提高与细胞灌注培养装置的可集成性,同时便于细胞培养过程中显微镜下动态观察。方法系统采用透光性良好的铟锡氧化物(ITO)镀膜导电玻璃作为加热元件,以Pt100传感器作为测温元件,与PID微控制器构成闭环温度控制系统;玻璃-PDMS细胞培养芯片采用微丝模塑软刻工艺加工而成;利用红外热成像仪对ITO加热元件表面上温度场均匀性进行验证;有限元数值分析对ITO加热元件上细胞培养芯片空间温度场分布进行模拟。结果与结论设计的温度控制系统结构简单,控制精度达±0.2℃;加热元件表面及玻璃-PDMS灌注式细胞培养芯片上培养腔内温度场空间分布均匀(1℃内),可满足实际细胞培养条件;在芯片上进行人肺癌细胞A549灌注培养实验显示,系统为细胞培养提供合适的温度环境且适合于细胞生物学行为的动态表征。

摘要：目的探讨天麻钩藤饮对自发性高血压大鼠（spontaneouslyhypertensiverat，SHR）血管内皮功能和肾脏蛋白表达的影响及其可能机制。方法6周龄SHR18只，按照随机区组设计分为SHR空白组、天麻钩藤饮组与卡托普利组，每组6只。同时设同周龄WistarKyoto（WKY）大鼠6只为WKY对照组。天麻钩藤饮组给药量为10．26g，（kg·d），卡托普利组给药量为3．375g／（kg·d），大鼠6-24周龄每天灌胃1次，同时SHR空白组和WKY对照组按2mL／100g灌胃蒸馏水。各组大鼠每2周检测1次血压变化；采用血管环舒张度实验法测定肠系膜上动脉与胸主动脉舒张度以反映内皮功能；通过双向电泳分离肾脏总蛋白，Westernblot法验证显著差异蛋白。结果（1）与SHR空白组比较，卡托普利组（10-24周龄）血压下降明显（P〈0．01，P〈0．05）；天麻钩藤饮组在血压升高初期（10～12周龄）降压效果明显（P〈0．01），随着高血压进程的发展，降压效果不明显（P〉0．05）。（2）与SHR空白组比较，天麻钩藤饮组肠系膜上动脉血管舒张度得到明显改善（P〈0．05），WKY对照组肠系膜上动脉及胸主动脉血管舒张度明显优于SHR空白组（P〈0．01P〈0．05）；而卡托普利组各指标差异均无统计学意义（P〉0．05）。（3）肾脏蛋白的双向电泳分析：双向电泳发现16个显著差异肾蛋白，主要涉及一氧化氮系统、氧化应激及细胞骨架蛋白。Westernblot结果显示：天麻钩藤饮对Cu—Zn超氧化物歧化酶（***）、4-α-氨甲喋呤脱水酶1（PCBDl）、精氨酸二甲基氨基水解酶2（DDAH2）的表达有明显改善作用（P〈0．05）。结论天麻钩藤饮对SHR大鼠肠系膜上动脉舒张功能具保护作用，其对高血压早期肾损伤的干预机制可能与调节一氧化氮系统与抗氧化应激相关。

摘要：目的分析硬核白内障在接受复明手术人群中的分布特点、术中主要并发症的发生率和视力预后。设计回顾性病例系列。研究对象上海爱尔眼科医院完成的市级白内障防盲复明项目中接受白内障手术的1061例白内障患者中,四级以上硬核白内障267例(267眼),其余794例非硬核白内障患者作为对照。方法对研究对象的术前眼部特点、术中、术后并发症发生率和术后视力进行回顾性分析,计算其脱盲率和脱残率,并与本复明项目的非硬核白内障者进行比较,脱盲的标准为矫正视力>0.05;脱残的标准为矫正视力>0.3。主要指标临床特征、并发症、术后视力。结果 267例硬核白内障患者中,术前矫正视力低于眼前指数者124例(46.3%),≤0.1者89例(33.3%),0.1以上者54例(20.4%)。白内障伴晶状体不全脱位2例,既往青光眼滤过手术史6例(1.2%)。接受超声乳化手术254例(95.1%),13例综合考虑术前检查结果、术中具体情况改行白内障囊外摘除术。主要手术并发症:后囊膜破裂14例(5.24%),发生率明显高于同批非硬核白内障患者(13/794例,1.64%)(χ2=10.33,P0.05者261例,脱盲率97.4%;矫正视力>0.3者234例,脱残率87.6%。其中72例(27.0%)矫正视力高于0.6,视力状态与术前相比存在显著差异(χ2=367.51,P<0.01)。结论本防盲复明项目中,硬核白内障的手术比例高,手术难度高于常规白内障手术。对术眼复杂状态的充分预测和估计、术中及时转换术式能提高大批量复明手术中硬核白内障的手术成功率,改善患者的生活质量。

摘要：目的研究慢病毒介导RNA干扰树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(DC-specific ICAM-3grabbing nonintegrin,DC-SIGN)分子表达及干扰后对树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟度及功能的影响。方法分离健康人外周血单核细胞,用GM-CSF和IL-4刺激诱导DCs。培养第4天分3组:RNA干扰组、阴性对照组和空白对照组,按实验设计加入病毒共孵育12h后换液,继续培养60h后用荧光显微镜观察转染效率及荧光强度,培养第6天加LPS刺激成熟。第7天收集细胞用RT-PCR检测DC-SIGN mRNA水平,Western blot检测DCs总DC-SIGN蛋白表达水平,流式细胞仪检测DCs表面DC-SIGN水平,ELISA检测DCs培养上清液中IL-12、IL-10水平,混合淋巴细胞反应检测DCs对CD4+T淋巴细胞刺激增殖能力的影响。结果①荧光显微镜显示感染复数(MOI)为20时,DCs感染病毒的效率达85%。②RT-PCR证实RNA干扰后DC-SIGN mRNA表达水平(0.2525±0.1396)显著低于另2组(0.5722±0.1909、0.5487±0.1193),差异有统计学意义(F=8.142,P0.05)。⑥ELISA结果显示各组DCs培养上清液中IL-10、IL-12水平差异无统计学意义(P>0.05)。⑦混合淋巴细胞反应结果显示各组DCs诱导CD4+T淋巴细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢病毒介导的RNA干扰能有效抑制DCs表面DC-SIGN分子表达,抑制DC-SIGN表达对DCs成熟度及DCs功能无影响。

摘要：目的探索将测序技术应用于缺失型脊髓性肌萎缩症(SMA)基因诊断的可行性。方法设计2对引物,PCR扩增SMA致病基因运动神经元生存基因(SMN1)与其同源基因SMN2之间5个不同碱基所在区域,第1对引物正向扩增SMN1内含子6至7间长度为501 bp片段,包含4个不同碱基位点g.31957、32006、32154及32269;第2对引物反向扩增SMN1外显子8区域,长度为189 bp,包含1个不同碱基位点g.32734。根据测序图谱区分SMA患者与携带者和(或)正常人。将此方法应用于7个临床疑似SMA家系的诊断,并与聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法进行比较。结果 6例测序图谱显示SMN内含子6至外显子8之间5个SMN1和SMN2差异位点g.31957、32006、32154、32269及32734均只有SMN2特有碱基a、T、g、g和A,患儿父母(携带者)相同位点显示为a/g、T/C、g/a、g/a和A/G。说明患者缺失SMN1基因,缺失范围包括内含子6至外显子8;携带者则既有SMN1基因,又有SMN2基因,与患者能区分开。1例检测结果为a、T、g、g和A/G,说明其缺失范围不含外显子8。测序法与PCR-RFLP方法结果一致。结论测序技术在缺失型SMA患者的基因诊断上优于经典PCR-RFLP法,更方便快捷,结果更明确,建议替代常用的PCR-RFLP法。