摘要：【目的】建立一种快速的PCR基因诊断方法,用以检测中国人常见的非缺失型α地中海贫血HbCS和HbQS。【方法】根据突变扩增系统(ARMS)的基本原理,自行设计了一套含4条等位特异性引物的PCR反应体系(4P-ASPCR法),分别用以检测中国人常见的HbCS和HbQS的点突变类型。通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法和DNA序列分析对检测结果进行验证。【结果】该方法检测到的HbCS突变、HbQS突变,与PCR-酶解法和DNA序列分析得出的结果一致。【结论】该新型PCR法检测HbCS和HbQS点突变快速、准确,适于推广应用,该设计思路亦可用于检测其它点突变。

摘要：以半固体ＬＡ和营养琼脂为基础培养基，分别加入葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、甘油等４种成分，研究糖分对椰酵假单胞菌产毒性能影响。结果表明，椰酵假单胞菌在营养琼脂和ＬＡ半固体基础培养基上基本不产毒或产毒量很低，而葡萄糖和甘油的加入使椰酵假单胞菌的产毒能力大幅度提高，产毒量不低于在马铃薯葡萄糖琼脂（ＰＤＡ）中，提示了糖代谢在椰酵假单胞菌生长和产毒过程中的重要作用。建议将ＬＤＡ（含葡萄糖的ＬＡ，新设计）半固体做为一种新的椰酵假单胞菌产毒培养基。

摘要：目的　探讨反义技术阻断人类端粒酶催化亚单位 (hTRT)基因表达对前列腺癌细胞生物学行为的影响。方法　设计、合成异硫氰酸荧光素标记的hTRT基因反义寡核苷酸 (ASODN) ,在脂质体介导下转染前列腺癌细胞系PC3 M ,运用荧光显微镜观察ASODN在癌细胞内的分布 ,MTT比色分析、流式细胞仪、克隆形成实验检测癌细胞体外生长活性 ,RT PCR和PCR ELISA法检测hTRT基因表达及端粒酶活性。结果　 0 5～ 2 0 μmol/LASODN转染 12～ 36h后 ,ASODN逐渐聚集于细胞核 ,PC3 M细胞增殖活性抑制 34 1%～ 79 6 % (P <0 0 1) ,细胞周期阻滞于G0 /G1期 ,克隆形成能力抑制 6 1 2 6 % (P <0 0 1) ,hTRTmRNA水平降低 2 4 4 8%～ 86 73% (P <0 0 1) ,端粒酶活性抑制 2 4 74 %～ 76 72 % (P <0 0 1)。结论　运用ASODN阻断hTRT基因表达 ,降低端粒酶活性 。

摘要：目的:优选甘草汁最佳制备工艺,为探讨甘草制吴茱萸的炮制机理奠定基础。方法:采用液体真空浓缩煎药机,设计L9(34)正交试验,以岀膏率、甘草苷、甘草酸铵含量为指标,考察加水量、煎煮温度、煎煮时间及煎煮次数4因素,对炮制辅料甘草汁的制备工艺进行优选。结果:最佳制备工艺为:甘草饮片加入10倍量水,煎煮3次,温度为100℃,时间为2 h。结论:本研究建立在中试生产水平上,该工艺可以用于炮制辅料甘草汁的生产制备。

摘要：“重塑中国疾病预防控制体系研究”项目设计简介包括立题背景、目的、经费来源、调查内容、样本收集方法和范围。该项目研究历时6年,首期从1999年始,秉国家杰出青年基金资助,选用政策制定科学程序作为指导性研究方法,旨在明确我国疾病预防控制体系中存在的焦点问题,论证焦点问题的根源、作用机制,研制针对根源的政策思路和改革策略。二期从2003年始,秉卫生部科研基金资助,针对重塑我国疾病预防控制体系中涉及的三大关键技术,包括公共职能界定、人力配置标准和财力配置标准等进行了专题研究。围绕着研究目的,项目首期调研了华东地区3省(市)的12县(市、区)、49乡镇、174村和9781户农户。项目二期调研了全国8省、80市和80县的疾病预防控制中心,调查内容包括中心人、财、物基本情况,以及中心领导和中心职工意向。

摘要：目的研究去唾液酸糖蛋白受体H1亚基糖识别区(CRD)在大肠杆菌中的诱导表达,为从噬菌体抗体库中筛选其特异性抗体提供靶分子。方法以pET3-CRDH1为模板设计引物,通过PCR扩增CRDH1基因,采用分子克隆技术将其定向克隆至原核表达载体pET-32c中。将含CRDH1/pET-32c的BL21单菌落接种至LB肉汤培养基中培养,并通过IPTG诱导表达。表达产物经Ni2+螯合柱亲和纯化,采用免疫印迹技术(WB)分析融合蛋白的免疫反应性。结果表达产物经SDS-PAGE在35 kd左右显示条带,符合CRDH1与表达标签融合蛋白的理论值,并证明以包涵体的形式表达;通过Ni2+亲和柱纯化获得的CRDH1重组融合蛋白经WB证实,重组CRDH1融合蛋白能被羊抗人ASGPR血清特异性地识别。结论rCRDH1在原核系统获得高效表达,亲和纯化的rCRDH1具有较强的免疫反应性,为进一步从噬菌体抗体库中筛选特异性单链抗体奠定了基础。

摘要：目的　对单管 套式多重聚合酶链反应 (PCR)鉴定间日疟原虫基因型方法的应用价值进行研究。方法　以间日疟原虫环子孢子蛋白 (CSP)基因为模型 ,综合套式多重PCR、等位特异PCR和标签引物扩增等技术 ,使用PrimerPremier 5 0软件和NCBI的BLAST网络改进与优化引物设计 ,并用矩阵试验法优化反应条件和程序 ,同时 ,用单管 套式多重PCR和套式PCR对 71份间日疟患者血标本的间日疟原虫基因型鉴定结果作比较。结果　单管 套式多重PCR可同时扩增出 3种不同长度的基因型 /族特异片段 ,且基本消除了二聚体等噪音。用单管 套式多重PCR鉴定检测 71份间日疟患者血标本 ,6 2份与套式PCR鉴定结果一致 ,并新发现 6份不同基因型和PV Ⅱ型的混合感染 ;还将 2份套式PCR鉴定为热带族的血标本纠正为PV Ⅱ型 ,1份阴性血样鉴定为温带族。结论　研究建立的单管 套式 /多重PCR鉴定间日疟原虫基因型的方法 ,简化了试验步骤 ,节省了试剂耗材 ,消除了PCR噪音 ,提高了检出间日疟原虫混合感染和低度感染的敏感性 ;

摘要：目的评估重症角结膜干燥症颌下腺移植术后板层角膜移植的临床疗效。设计回顾性病例系列。研究对象15例重症角结膜干燥症颌下腺移植术后患者。方法15例颌下腺移植成功且术后有完整记录患者因角膜病变行板层角膜移植术,术后进行随访观察。主要指标角膜移植片透明性。结果15例行板层角膜移植者2年的随访期间,5例植片保持透明,10例逐渐发生混浊。结论自体颌下腺移植联合角膜移植是治疗重症角结膜干燥症行之有效的方法,但部分病例术后角膜移植失败的原因仍需进一步研究。

摘要：目的探讨褪黑素（Mel）对过氧化氢（H2O2）氧化损伤的人视网膜色素上皮（hRPE）细胞的保护作用及其作用机制。方法实验研究。采用600μmol／LH2O2建立体外培养的hRPE细胞氧化损伤模型。实验分为6组：溶剂对照组、600μmol／L H2O2＋溶剂组（H2O2损伤模型组）、600μmol／L H2O2＋10^-7mol／L Mel组、600μmol／L H2O2＋10^-6mol／L Mel组、600μmol／L H2O2＋10^-5mol／L Mel组、600μmol／L H2O2＋10^-4mol／L Mel组。通过四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞活性；测定细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量以反映细胞氧化损伤程度；分别用DNALadders电泳法和流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。溶剂对照组与600μmol／L H2O2组间均数比较采用随机区组设计的t检验；600μmol／L H2O2组以及600μmol／L H2O2＋不同浓度Mel组间均数比较采用单因素5水平设计的方差分析，组间两两比较采用LSD—t检验。结果H2O2模型组较对照组细胞活性明显降低、SOD活性降低、MDA含量增加、凋亡率升高，差异均有统计学意义（t=2．25，39．50，68．42；P〈0．05）；Mel干预组较模型组细胞活性升高、SOD活性升高、MDA含量减少、凋亡率降低，差异有统计学意义（P〈0．05），并与药物浓度的变化呈正相关趋势。结论Mel对H2O2诱导的RPE的氧化损伤具有保护作用，其机制可能与影响细胞活性、增强抗氧化酶活性。

摘要：目的 探讨复杂寰枢椎脱位的临床特点和处理方法.方法 回顾性分析自2005年2月至2008年10月收治的54例含有复杂因素、不能有效采取常规治疗方法的复杂寰枢椎脱位患者的临床特点和复杂因素,其中男性26例,女性28例,年龄4～65岁,平均34岁.根据不同的复杂因素采取不同的特殊处理方法,主要包括Ⅲ型经口寰枢椎复位钢板（TARP-Ⅲ）内固定术、计算机辅助设计与快速成型（CAD-RP）指导下的深部磨削减压技术、CAD-RP个性化置钉导板技术及经口扩大入路技术.结果 平均随访时间24个月,54例患者中48例获得解剖复位,6例接近解剖复位;受压颈髓减压充分,脊髓减压改善率达86.0%,神经功能改善率达77.8%.2例术后发生颅内感染,均治愈.结论 通过应用TARP-Ⅲ手术、CAD-RP指导下的深部磨削减压操作技术、CAD-RP个性化置钉导板技术和扩大手术人路等四项技术,一些复杂的寰枢椎脱位患者能够得到有效治疗.