摘要：目的利用杂交探针结合熔解曲线分析技术，建立一种适用于临床的快速、可靠的实时PCR检测载脂蛋白E（apoE）基因型的方法。方法应用Light Cyeler技术，优化主要反应条件，设计在1个PCR中可同时分析2个密码子的多态性方法。选取60岁以上中心性肥胖症133例和体检正常老年者108名为研究对象。首先以LC-Red640和LC-Red750标记两条针对突变位点为112和158的检测探针的5′端，相应的锚定探针在3′端被荧光标记，再从研究对象基因组DNA中快速循环PCR特异引物扩增apoE基因265bp片段，将其与特异探针杂交后，引发荧光共振能量转移，通过异源杂交的出现和错配碱基类型的熔解参数来完成和评价野生型和突变基因分型的特征性。结果峰值对应着序列特异的熔解温度点，各基因型的模板均呈现良好的峰形。中心性肥胖症组突变型以E2／3、E3／4基因型频率最高，与正常组比较差异有统计学意义（χ^2=4．210，P〈0．004；χ^2=6．328，P〈0．012），中心性肥胖症组和对照组分布频率分别为E2／3型37例（27．8％）和18例（16．7％）、E3／4型33例（24．8％）和13例（12．0％）、E3／3型56例（42．1％）和74例（68．5％）、E2／4型3例（2．3％）和2例（1．9％）、E4／4型3例（2．2％）和0例（0）、E2／2型1例（0．8％）和1例（0．9％）；其结果与测序结果一致；中心性肥胖症组apoE基因总浓度（101．2±73．6）表达水平也较对照组（50．6±27．1）显著升高（t=3．359，P〈0．001）。结论该方法操作简便省时，不易交叉污染；获得的各种基因类型特征性强，适用于临床和流行病学调查的快速诊断分型。apoE基因多态性与老年中心性肥胖症存在相关性，对携带E3／4型、E2／3型或E4／4型的个体，可提示决定个体老年中心性肥胖遗传易感性方面起到重要作用。

摘要：RET基因突变为遗传性甲状腺髓样癌、Ⅱ型多发性内分泌肿瘤的致癌基因。基因型与临床表型之间的关系研究颇多。以RET基因作为治疗靶点设计的分子制剂成为临床治疗该类基因突变所致肿瘤性疾病的策略。综述RET基因型检测用于临床表型、特点的预测及对处理方式的指导,包括预防性手术、基因治疗、分子靶向药物应用的进展。

摘要：目的 研究急性百草枯中毒大鼠肾损伤指标的动态变化及依达拉奉的干预效果和机制.方法 将80只清洁级SD大鼠随机分成空白对照组、百草枯中毒组、依达拉奉治疗组、依达拉奉对照组;空白对照组8只大鼠,给予0.9%氯化钠溶液1 ml,腹腔内注射1次,30 min后再次予以等量相同液体腹腔内注射;百草枯中毒组24只,给予20 mg/kg百草枯溶液1 ml腹腔内注射1次构建百草枯中毒模型,30 min后予以等量0.9%氯化钠溶液腹腔内注射;依达拉奉治疗组24只,构建百草枯中毒模型30 min后予5 mg/kg依达拉奉腹腔内注射;依达拉奉对照组24只,给予0.9%氯化钠溶液1 ml,腹腔内注射1次,30 min后予依达拉奉5 mg/kg腹腔内注射;除空白对照组,其余各组按上述方法处理,每天1次,维持7 d.处理后1、3、7、21 d留取肾组织并抽取动脉血,光学显微镜下观察各组肾脏病理变化,ELISA法检测血肌酐水平、血清与肾脏肾损伤分子1（KIM-1）及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）水平,免疫组织化学染色法观察肾脏热休克蛋白70（HSP70）表达的变化.结果 光学显微镜下可见,百草枯中毒组大鼠肾组织病理损害最严重,在第3天达高峰,而各时间点依达拉奉治疗组病理损害均较百草枯中毒组轻,同时两组在21 d时均未见肾纤维化表现.与空白对照组比较,百草枯中毒组第1天大鼠血及肾脏KIM-1表达明显增加（P〈0.05）,血肌酐及NGAL水平在第7天明显增加（P〈0.05）;百草枯中毒组大鼠肾脏NGAL水平随时间推移逐渐升高,但与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）.与百草枯中毒组相比,依达拉奉治疗组大鼠血肌酐、KIM-1、NGAL和肾脏KIM-1表达下降（P〈0.05）,肾脏NGAL差异无统计学意义（P〉0.05）.与百草枯中毒组比较,依达拉奉治疗组第3、21天大鼠肾脏组织中HSP70表达明显增加（P〈0.05）.结论 依达拉奉可促使肾脏组织HSP70表达升高,降低KIM-1和NGAL水平,对急性百草枯中毒所致的肾损伤起到一定保护作用.