摘要：目的研究AP-1和ETS-1转录因子结合位点（TFBS）缺失对树突状细胞特异性胞间黏附分子-3结合非整合素（DC—SIGN）启动子活性的影响，探讨DC—SIGN表达的机制。方法从人外周血中提取全基因组DNA，设计DC-SIGN启动子序列上下游引物、转录因子结合位点两侧的引物及其相应的连接引物，利用PCR方法，通过不同的引物组合扩增出转录因子结合位点两侧的片段，再用连接引物连接两片段，得到转录因子结合位点缺失的DC—SIGN启动子序列，通过双酶切、连接的方法，将得到的DC—SIGN启动子序列定向克隆入荧光素酶报告质粒，将上述质粒通过脂质体转染Hacat和293细胞，48h后检测荧光素酶的活性。结果体外扩增得到的转录因子结合位点缺失的DC—SIGN启动子序列以及重组的荧光素酶报告质粒经双酶切、基因测序鉴定正确，荧光素酶活性检测结果显示AP-1位点缺失使DC—SIGN启动子活性下降20％（293细胞）和10％（Hacat细胞），带增强子的DC—SIGN启动子活性下降了40％～50％；ETS—1位点缺失的普通型和带增强子型DC—SIGN启动子的活性几乎消失。结论ETS-1转录因子结合位点在DC—SIGN启动子活性表达中起重要作用，AP-1转录因子结合位点作用不大。

摘要：目的参照文献建立一种快速、灵敏、准确的生殖支原体（Mg）的检测方法，并应用该方法调查生殖支原体在广西贺州暗娼中的流行情况。方法参考文献中以生殖支原体Pa基因为靶基因设计的引物和Taqman MGB探针进行实时定量PCR，以生殖支原体标准菌株G37制备标准品，对广西贺州暗娼人群的宫颈拭子标本进行生殖支原体的检测。结果建立的Taqman MGB实时定量PCR方法检测的线性范围好（1×10—10^6拷贝／μl，R^2=0．993，重复性好，（批内变异系数=0．7％，批间变异系数：1．09％），敏感性高，检测限（LOD）为10拷贝／μl，定量限（LOQ）为50拷贝／μl。采用该方法检测404份拭子标本，生殖支原体的检出率为12．1％。结论针对生殖支原体Pa基因的TaqmanMGB实时PCR可以快速、灵敏地对生殖支原体进行定性及定量的检测。

摘要：目的 建立结合多重反转录巢式PCR技术检测HIV RNA的小型集合NAT,用于MSM人群急性感染的筛查诊断.方法 利用2008年10月至2009年3月期间从3名HIV窗口期感染者、30名HIV慢性感染者、97名健康人采集冻存的EDTA抗凝血浆建立小型集合NAT.将10份待测标本混合组成1个集合,离心富集病毒,提取RNA 针对HXB2的nt5783-nt6228和nt1235-nt2012区分别设计2对引物 采用多重RT-PCR、巢式PCR扩增2个目标区的核酸片段,对结果阳性的集合中标本进一步分别检测.确定小型集合NAT的灵敏度,并进行验证.应用建立的方法对1 005份与上述标本同一时期收集的MSM人群的HIV抗体阴性血浆进行检测.结果 （1）成功扩增出目标区的2条特异性片段,灵敏度为162拷贝/ml （2）对3份HIV窗口期感染者标本用小型集合NAT方法盲法验证的结果和预期一致 （3）用多重RT-PCR和巢式PCR对30份HIV抗体阳性标本检测,阳性率100%（30/30） （4）发现1 005份血浆标本中有1份为HIV RNA阳性,追踪随访发现HIV-1抗体转阳.结论 本研究中建立多引物小型集合RT-PCR、巢式PCR结合的小型集合NAT的敏感性好,可用于MSM人群HIVG感染窗口期筛查检测.

摘要：目的了解天津市诺如病毒(NV)腹泻发病状况及其临床和流行病学特征。方法在天津市不同区域设立5所医院,对就诊的成人和儿童其他感染性腹泻(除霍乱、细菌性和阿米巴性痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻)患者按设计的调查内容现场询问获得资料,同时收集患者粪便标本,采用ELISA方法检测NV抗原,并以RT-PCR方法做型别分析。结果 1 085例患者中129例检出NV抗原,阳性率为11.89%,其中≤5岁患者的阳性率达23.05%(68/295)。基因型以GⅡ为主,占80.62%(104/129)。感染不存在区域间的聚集性,冬春季节高发。散居儿童患者的阳性率达22.60%(66/292)。患者在发病15d内就诊可以检测出诺如病毒。NV腹泻患者每日腹泻的次数明显多于非NV腹泻患者,且多为水样便。便常规检测97.25%(813/836)的NV腹泻患者的白细胞数≤10/高倍镜视野(400倍)。结论天津市其他感染性腹泻患者中11.89%为NV所致,≤5岁患者该比例更高达23.05%,这已成为一个公共卫生问题。

摘要：现代信息技术被广泛应用于生物灾难事件的应急管理。本文在简要介绍国外相关典型研究成果基础上,阐述利用现代信息技术进行生物灾难事件应急管理的基本思想,继而分析设计了生物灾难事件模拟系统的架构,对系统关键模型,如城市地理模型、人群活动模型、人际交互模型、个体感染模型等进行了探讨,并构建了生物灾难事件模拟原型系统。本研究为构建综合性的生物灾难事件应急管理信息系统打下基础,为事件的应急防控提供计算实验平台。

摘要：目的:建立焦磷酸测序技术检测拉米夫定和阿德福韦酯治疗乙肝所致乙肝病毒基因耐药突变的定量检测方法,为临床乙肝耐药诊断和治疗提供依据。方法:针对乙肝病毒DNA聚合酶基因序列上4个常见基因突变位点的6种突变形式,分别克隆构建野生型和突变型质粒作为标准品,应用生物信息学手段设计目标基因通用PCR引物和各突变点的焦磷酸测序引物,建立焦磷酸测序的突变检测方法。对接受拉米夫定、阿德福韦酯治疗的慢性乙型肝炎患者血清标本进行检测。结果:构建了乙肝病毒四种常见耐药性突变的标准株和变异株克隆,建立了分别或同时检测拉米夫定、阿德福韦酯耐药突变的焦磷酸测序方法,对68例临床耐药或疑似耐药的患者血清标本进行检测,双脱氧测序验证,检出拉米夫定耐药突变32例,阿德福韦酯耐药突变5例,其中焦磷酸测序检出20例为混合突变,而双脱氧测序显示为6例。结论:成功建立了焦磷酸测序定量检测拉米夫定、阿德福韦酯耐药基因突变的方法,构建了乙肝病毒耐药基因突变的标准质粒,为临床动态监测乙肝病毒变异病毒株、指导合理用药奠定了基础。