摘要：优化以包涵体形式表达的抗Ⅳ型胶原酶单链抗体与力达霉素辅基蛋白融合蛋白Fv-LDP制备过程。通过单因素或正交设计优化其包涵体制备与溶解、固定化金属螯合层析和分步透析复性过程,Sephadex G-75层析精细纯化蛋白,基于流式细胞术的饱和结合实验检测其抗原结合活性。优化后,Fv-LDP包涵体纯度为63.9%,溶解度为95.7%;纯化后Fv-LDP纯度达95%以上,复性后单体含量占60%,精细纯化后提升为85%,比初始复性条件提高5.6倍,能够与人肺腺癌PAa细胞和肝癌BEL-7402细胞结合。Fv-LDP制备过程被成功优化,为其生产和研发奠定了实验基础,也为其他以包涵体形式表达的基于单链抗体的小型化抗体药物制备提供了比较实用的方法。

摘要：目的：评价伊潘立酮片在中国健康受试者中的药代动力学特征。方法随机、开放、双周期交叉试验设计。16名健康志愿者随机分成2组，每组8人，男女各半，分别单次口服伊潘立酮片1，3 mg，用HPLC-MS/MS法测定给药后不同时间伊潘立酮的血药浓度，用WinNonlin 6.1软件计算药代动力学参数。结果单次口服伊潘立酮片1，3 mg 后主要药代动力学参数如下：t1/2分别为（54.06±49.61），（34.92±28.42）h，ρmax分别为（0.72±0.33），（7.26±4.47） ng· mL-1，tmax分别为（2.04±0.66），（1.43±0.33） h，AUCinf分别为（14.30±7.81），（71.90±36.48） ng· h· mL-1。结论单次口服伊潘立酮片1～3 mg后，伊潘立酮在中国健康受试者体内的药代动力学过程符合非线性动力学过程。

摘要：P-糖蛋白(P-gp)是ATP结合盒转运体家族中重要的外排转运体。诱导作用可上调细胞外排转运体的表达并增强其功能,从而减少外源性有害异物造成的伤害,对维持细胞内环境稳态有重要作用。本文结合课题组的研究,综述了近年来P-gp的诱导模型、实验方法及其在新药研究中的应用。重点总结了多种P-gp的体外细胞诱导模型和体内动物诱导模型,检测P-gp基因、蛋白表达水平和外排转运功能的实验方法,以及P-gp与代谢酶、其他转运体的共同调节作用。同时介绍了以P-gp诱导进行临床解毒治疗的策略以及计算机辅助设计的P-gp诱导药效基团模型。本综述为临床前药物设计、新合成化合物诱导活性的筛选和潜在临床药物相互作用的预测提供一定的指导。

摘要：目的为了研究硫色满-4-酮衍生物对乙酰胆碱酯酶的活性作用。方法采用取代的苯硫酚为原料,经取代反应和浓硫酸环合反应制备了6-羟基硫色满-4-酮,与苄基哌嗪反应制备3-(4-苄基哌嗪-1-甲基)硫色满-4-酮Mannich碱类盐酸盐,并将其用于乙酰胆碱酯酶(AChE)体外活性抑制实验。结果目标化合物具有AChE抑制活性,在微摩尔范围内,化合物8a的IC50=0.96μmol·L-1,优于对照组利斯的明。结论 3-(4-苄基哌嗪-1-甲基)硫色满-4-酮Mannich碱对乙酰胆碱酯酶有抑制活性,有进一步研究意义。

摘要：目的研究3种盐酸二甲双胍肠溶药物在比格犬体内的相对生物利用度,并对其在不同溶出介质中的溶出曲线进行比较。方法用转篮法测定3种药物在p H 1.2盐酸溶液、p H 4.5醋酸盐溶液、p H 6.0和p H 6.8磷酸盐溶液中的溶出度曲线。按三药物三周期交叉实验设计,6只比格犬分别空腹和餐后喂服盐酸二甲双胍肠溶片(A药)、肠溶片(B药)或肠溶胶囊(C药)500 mg。用HPLC法测定二甲双胍的血药浓度,用DAS 2.1.1软件计算药代动力学参数和相对生物利用度。结果 A药、B药和C药在p H 1.2盐酸溶液和p H 4.5醋酸盐溶液中几乎不释放,在p H 6.0和p H 6.8磷酸盐缓冲液中的释放曲线差异有统计学意义,但在p H 6.8磷酸盐缓冲液中45 min内释放均达75%以上。空腹时,A药、B药和C药的主要药代动力学参数如下:t_(max)分别为(1.63±0.86),(1.96±0.90)和(2.83±1.66)h;C_(max)分别为(15.87±9.30),(18.06±6.96)和(13.49±10.42)μg·m L^(-1);AUC_(0-24) h分别为(48.79±26.98),(71.18±49.73)和(46.74±17.88)μg·m L^(-1)·h。3种药的相对生物利用度分别为(148.3±38.4)%(B/A),(121.1±77.2)%(C/A)和(83.2±46.8)%(C/B)。餐后的血药浓度较低,没有计算药代动力学参数。结论食物对盐酸二甲双胍肠溶药物的吸收有显著影响,且在p H 6.0磷酸盐溶液体外溶出条件下能较好地区分盐酸二甲双胍肠溶药物的体内吸收情况。

摘要：抗体药物偶联物(ADCs)是由单克隆抗体、连接子和小分子细胞毒素构成的多结构域分子。ADCs通过单克隆抗体特异性地结合肿瘤细胞表面高表达的靶抗原,经抗原介导的内化作用进入细胞并释放细胞毒素,可提高疗效并降低细胞毒素对正常组织、细胞的毒性。与常规单克隆抗体一样,ADCs作为蛋白药物,具有免疫原性。此外,由于偶联引入了新的抗原表位,ADCs药物有可能诱导机体产生更为复杂的免疫反应,从而可能影响药物的有效性和安全性。对ADCs诱导的抗药抗体(ADA)进一步表征,尤其是中和活性试验,有助于分析和预测因ADA的产生而可能导致的对有效性和安全性的影响。由于ADCs药物结构和作用机理的特殊性,针对不同结构域而产生的ADA均可能具有中和活性,通过多种机制阻断ADCs药物内化,或阻碍细胞毒素分子释放,从而降低细胞杀伤效应或导致脱靶毒性。因此,ADCs药物的中和抗体检测方法的设计和开发不同于常规抗体类药物,且具有较大的挑战。本文简述了ADCs药物免疫原性分析中中和活性检测方法及目前存在的挑战,以期对该领域的相关研究提供借鉴和参考。

摘要：目的:评价空腹单剂量口服硫酸氨基葡萄糖胶囊受试制剂与参比制剂在中国健康人体中的生物等效性。方法:本研究采用随机、开放、单剂量、三周期、部分重复、三交叉试验设计,共入组健康男性和女性30例,单剂量空腹口服受试制剂和参比制剂硫酸氨基葡萄糖胶囊0.25 g。采用LC-MS/MS测定给药后血浆氨基葡萄糖药物浓度。使用WinNonlin 6.3软件计算非房室模型药动学(PK)参数,采用参比制剂标度的平均生物等效性(RSABE)方法,使用SAS企业版7.1版软件进行等效性评价。结果:经基线校正后的受试制剂和参比制剂中氨基葡萄糖Cmax分别为(585.0±282.2)和(641.0±293.6) ng·mL^(-1),Tmax分别为1.5 h(0.5,5.0 h)和1.5 h(0.5,5.0 h),t1/2分别为(1.8±1.4)和(1.5±0.5) h,AUC0~t分别为(2 089.2±749.5)和(2 298.2±928.4) ng·h·mL^(-1),AUC0~∞分别为(2 095.3±749.7)和(2 303.1±929.0) ng·h·mL^(-1)。受试制剂和参比制剂的AUC0~t,AUC0~∞和Cmax的几何均数比值(受试制剂/参比制剂)的90%置信区间介于拓宽的等效范围74.9%~133.6%和70.1%~142.7%,同时介于未拓宽的等效范围80.0%~125.0%。结论:硫酸氨基葡萄糖胶囊受试制剂与参比制剂在空腹服用的情况下生物等效。

摘要：目的评价中国小细胞肺癌患者中单次给药和多次给药后氨柔比星及其活性代谢产物氨柔比星醇的药代动力学特征。方法用多中心、开放、单次和多次给药的试验设计。12例广泛期小细胞肺癌患者,每日静脉推注盐酸氨柔比星40 mg·m-2,连续3 d,并在第1 d静脉输注顺铂60 mg·m-2。用LC-MS/MS法测定原型药物和活性代谢产物在血浆、全血和血细胞中的浓度,用WinNonlin非房室模型计算药代动力学参数。结果单次和多次给药后,氨柔比星的主要药代动力学参数,乙二胺四乙酸三钾(EDTAK3)抗凝血浆:cmax分别为(3460±1273),(4080±1895)ng·mL-1,AUC0-t分别为(2050±408),(2190±411)h·ng·mL-1;肝素抗凝血浆:cmax分别为(3660±1382),(4360±2065)ng·mL-1,AUC0-t分别为(2100±363),(2220±404)h·ng·mL-1;全血:cmax分别为(3240±1133),(3920±1582)ng·mL-1,AUC0-t分别为(2150±465),(2560±853)h·ng·mL-1;血细胞:cmax分别为(2100±544),(2500±796)ng·mL-1,AUC0-t分别为(2030±465),(2340±653)h·ng·mL-1。氨柔比星醇的主要药代动力学参数,EDTAK3抗凝血浆:cmax分别为(18.2±3.3),(30.1±3.8)ng·mL-1,AUC0-t分别为(258±43),(992±182)h·ng·mL-1;肝素抗凝血浆:cmax分别为(17.9±3.8),(30.9±5.7)ng·mL-1,AUC0-t分别为(259±51),(978±190)ng·h·mL-1;全血:cmax分别为(50.3±12.8),(81.9±19.3)ng·mL-1,AUC0-t为分别(723±198),(2610±656)h·ng·mL-1;血细胞:cmax分别为(83.6±19.9),(153.0±25.2)ng·mL-1,AUC0-t分别为(1290±319),(4400±831)h·ng·mL-1。结论氨柔比星醇在多次给药后发生蓄积,蓄积程度与文献报道的日本人相同,单次和多次给药后的血浆AUC0-24与日本人近似,血细胞cmax与日本人相似,但血浆cmax呈低于日本人的趋势。

摘要：细菌耐药性问题日益严重,越来越多的致病菌对现有抗生素产生了耐药性。开发新靶点的抗生素迫在眉睫。FtsZ是介导细菌细胞分裂的关键蛋白,由于与人类微管蛋白序列的差异,有可能设计选择性作用于细菌FtsZ而不干扰宿主细胞的抑制剂,FtsZ蛋白有希望成为抗菌药物研究的新靶点。本文从人类微管蛋白抑制剂、GTP类似物、天然产物和化合物库广筛等方面综述了以FtsZ为靶点的抗菌药物研究的最新进展。

摘要：免疫检查点抑制剂作为新兴的肿瘤治疗方法,因其良好的疗效而受到广泛的关注。大量研究表明针对细胞毒性T淋巴细胞相关抗原(cytotoxic T lymphocyte-associated protein-4,CTLA-4)和程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)/程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)的免疫检查点抑制剂对实体肿瘤具有免疫调控的作用,从而表现出抗肿瘤作用。随着各类免疫检查点抑制剂的上市,对免疫检查点疗法的机制以及免疫治疗相关不良反应(immune-related adverse events,ir AEs)的研究也更加深入。本文就免疫检查点抑制剂作用机制、临床前毒性反应及ir AEs的研究进展作一综述,以归纳总结其不良反应,为其临床前安全性评价、临床试验的设计提供参考。