摘要：黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)是治疗高尿酸血症及痛风的重要靶标。本文基于已上市的非嘌呤类XO抑制剂非布索坦(febuxostat)和托匹司他(topiroxostat),采用分子拼接和电子等排原理,设计合成了14个噁二唑类化合物并评价了它们对黄嘌呤氧化酶的抑制作用,其中5个化合物在10μmol·L^(-1)浓度下具有明显的体外酶抑制活性。

摘要：方法确认是保证所用分析方法达到其预期使用目的重要过程和内容。因为该概念及其相应理论的发展与完善关乎所确认的实验方法的可靠性和公认性,所以人们对该领域越来越重视。本文对近5年来关于方法确认相关内容的最新研究进展进行概述,主要包括:引入方法的"生命周期(lifecycle)"和"质量源于设计(quality by design,Qb D)"的理念,拓展了现有的"确认(validation)"概念。根据"分析目标概貌(analytical target profile,ATP)"理念和相关理论,重新整理并给出各参数确认的标准。针对方法确认所规定的参数,配套建立起对应的各参数满足标准的统计计算方法,并阐述了计算原理。阐述了一些表述不准确或不必要的参数(如linearity、LOQ)。针对生物活性测定方法的特殊性,建立起单独的确认指导原则。对新方法替代法定方法,提出"等效或优于"的相关统计比较原则。

摘要：目的采用响应面分析法优化女贞子中总三萜酸的提取工艺,以均匀实验确定纯化工艺,使总三萜酸的含量达到50%以上。方法应用HPLC-UV,建立女贞子中总三萜酸含量的测定方法,通过乙醇浓度、溶剂倍量、提取时间和提取次数等单因素考察,确定乙醇提取次数,应用响应面法优化乙醇浓度、溶剂倍量和提取时间。应用醇提水沉除去水溶性杂质;石油醚除去叶绿素、油脂等脂溶性杂质;乙醇沉淀得到女贞子总三萜酸;设计均匀实验分别确定石油醚的用量、纯化次数和时间,乙醇的浓度和用量。结果女贞子总三萜酸以齐墩果酸计,提取工艺为体积分数80%的乙醇、10倍量、提取2次,每次0.5 h。纯化工艺为12倍量石油醚,纯化1次,每次2 h;10倍量体积分数60%的乙醇沉淀,纯化1次。结论用响应面分析法和均匀实验设计法来优化女贞子三萜酸的提取纯化工艺,工艺简单,可产业化。

摘要：目的:针对双环醇片主成分的测定方法,论证含量测定类方法验证的科学性和可靠性,为今后该类方法的验证研究提供更严谨的模板或范例。方法:通过科学的实验设计,制定合理的实验方案,获得专属性、线性与范围、准确度和精密度等性能参数。结果:双环醇片中主成分与有关物质可完全分离。在标示量70%～130%的范围内线性关系良好(决定系数R^2>0.999 9,剩余标准偏差RSME=0.299 6);在80%～120%的5个浓度点下的相对偏倚均不超过0.78%,其95%置信限均不超过±2%;各浓度下的中间精密度均不超过0.89%,中间精密度的置信上限均不超过1.43%;方法的总变异在120%浓度下最大,为0.87%,所对应的95%/90%容忍区间为98.11%～102.78%,95%预测区间为98.95%～101.95%;对可接受标准为90.0%～110.0%的双环醇片,其方法能力指数均超过2,即该方法的误判率低于1/100万。结论:该方法经验证可满足其对双环醇片含量定量测定的预期用途。同时通过实验设计可获得更多科学可靠的方法性能指标,这些指标使得方法验证的结论更加可靠和直观,且能够从整体把握方法的适用性。新提供的方法容忍区间、预测区间和方法能力指数等参数,为今后判断方法确认和转移是否成功提供了依据。

摘要：目的采用Box-Behnken设计-效应面法优化元胡止痛双层渗透泵片的处方。方法选择含药层聚氧乙烯N750含量、含药层氯化钠含量和包衣增重为因素,以12 h累积释放度和药物释放曲线拟合度为考察指标,建立多元线性模型考察各因素对制剂释药行为的影响;绘制二次多项式模型效应面图,确定优化处方并进行验证。结果二次多项式为最佳拟合模型,得到最优处方为:含药层聚氧乙烯N750含量为88 mg·片-1,氯化钠含量为27 mg·片-1,包衣增重为7.7%。3批优化处方中延胡索乙素12h平均累积释放度分别为78.68%、79.01%、78.93%,释药曲线线性拟合度r2分别为0.985 2、0.982 8、0.991 8;欧前胡素12 h平均累积释放度分别为79.12%、78.96%、79.35%,释药曲线线性拟合度R2为0.984 7、0.990 2、0.985 8。影响因素实验、加速实验和长期实验表明,该制剂稳定性良好。结论 Box-Behnken设计-效应面法可用于元胡止痛双层渗透泵片的处方优化。

摘要：探索对药品主成分测定类方法可靠性评价的指标和标准。以美国药典论坛中、和USP通则指导原则为基础,以《中华人民共和国药典》2015年版二部赖诺普利含量测定项下方法为研究对象,应用统计学方法对含量测定方法进行了联合准确度和精密度、线性及范围的考察。该方法从统计学的角度,通过兼顾准确度、精密度和线性的实验设计,确保了该测定法所得到的结果具有较高的概率以达到标准中所规定的限度。该研究符合分析目标特征(analytical target profile,ATP)和决策准则(decision rules,DR)的理念,并与风险控制和科学公正检验的理念相一致。

摘要：目的通过大鼠视神经夹伤模型,研究小干扰RNA(si RNA)对视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用。设计实验研究。研究对象 SPF级SD大鼠54只。方法 54只SD大鼠随机分为A、B、C三组,每组18只。均选取右眼为实验眼,左眼为正常对照。在球后2 mm处用40 g压力微型视神经夹夹持视神经60 s,做视神经夹伤模型。建立模型后当天,A、B、C三组分别给予玻璃体注射10μg、20μg si RNA和生理盐水。视神经夹伤后10天,每组取6只大鼠用荧光金做逆行标记,14天时取标记后的大鼠双眼眼球标本做视网膜铺片并拍摄照片,RGC计数。计算RGC存活率(右眼RGC数/左眼RGC数×100%)。每组其余12只大鼠进一步用蛋白印迹法检测视网膜组织中caspase-3蛋白的表达水平。主要指标RGC存活率,caspase-3蛋白的表达水平。结果 A、B、C组RGC存活率分别为53.63%±7.35%、57.86%±6.00%、45.00%±4.37%(F=7.11,P=0.029),其中A组与C组(P=0.025),B组和C组(P=0.002)之间均有显著性差异;A组和B组之间无显著性差异(P=0.24)。A、B、C三组视网膜组织中Caspase-3蛋白与内参灰度比值分别为0.20±0.02、0.19±0.02、0.24±0.03(F=9.73,P=0.02)。其中A组与C组(P=0.005),B组和C组(P=0.001)之间均有显著性差异;A组和B组之间无显著性差异(P=0.418)。结论小干扰RNA能有效保护大鼠视神经夹伤模型的RGC,提高RGC的存活率。

摘要：目的观察珍芪滴眼液熏蒸疗法对干眼的疗效。设计前瞻性、随机、开放、阳性滴眼液平行对照的临床试验。研究对象 2013-2015年北京同仁医院眼科门诊干眼患者96例,平均年龄(60.95±12.22)岁。方法 96例受试者随机分为试验组与对照组,各48例。两组均给予玻璃酸钠滴眼液,每日4次,每次1滴。在此基础上,试验组使用珍芪滴眼液熏蒸疗法,每天1次,每次20分钟。对照组给予珍芪滴眼液点眼,每日4次,每次1滴。观察用药4周受试者干眼症状及体征改善情况。主要指标总有效率(临床显效+有效)、症状总分、Schirmer I试验(schirmer I test,SIt)、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)、角膜荧光素染色评分。结果治疗前试验组与对照组在症状总分、SIt、BUT、角膜荧光素染色计分上均无显著性差异。治疗4周试验组总有效率(81.25%)明显高于对照组(62.50%)(P=0.041)。治疗4周时试验组BUT为(7.53±3.78)s,对照组为(6.08±2.99)s,试验组明显高于对照组(P=0.041)。症状总分试验组为1.92±1.99,对照组为2.32±2.30,试验组明显低于对照组(P=0.031)。结论珍芪滴眼液熏蒸疗法能有效治疗干眼,在玻璃酸钠滴眼液的基础上,该疗法优于珍芪滴眼液点眼治疗。

摘要：目的评价不同剂量配比及制备工艺的吸附无细胞百日咳-白喉-破伤风-乙型肝炎-Sabin株灭活脊髓灰质炎联合疫苗（DTa P-Hep B-s IPV）的基础免疫效果。方法以中、低剂量s IPV与铝佐剂相互配伍的不同配方,设计4个DTa P-Hep B-s IPV联合疫苗实验组,即中剂量含铝佐剂s IPV组（A组）、中剂量不含铝佐剂s IPV组（B组）、低剂量含铝佐剂s IPV组（C组）、低剂量不含铝佐剂s IPV组（D组）,并设相应各组分的对照组和上市的联合疫苗参考组。按0、1、2月基础免疫程序,经左右腿肌肉接种Wistar大鼠,于免前及每剂免后第30天釆血,检测各组大鼠血清中各组分抗体水平、GMT及阳转率。结果大鼠经全程基础免疫后,A、B组各型别脊灰病毒中和抗体阳转率均达到100%,C、D组为80%~100%;A、C组各剂次免后所诱导的各型别脊灰病毒中和抗体GMT值均高于同等剂量不含铝佐剂的B、D组,且均达到或超过参考组;B、D组所诱导的各型别脊灰病毒中和抗体GMT值均低于同等剂量的对照组。各组百白破抗体阳转率在首剂免后均达到100%,每剂免后,实验组百白破抗体GMT与对照组相比,差异均无统计学意义（P均〉0.05）。基础免疫完成后,实验组和参考组乙型肝炎表面抗体阳转率为40%~88.9%;各实验组乙型肝炎抗体水平与对照组、参考组相比,差异均无统计学意义（P均〉0.05）。结论 s IPV中剂量含铝佐剂的DTa P-Hep Bs IPV联合疫苗可诱导大鼠在基础免疫过程中产生良好且稳定的体液免疫反应。

摘要：滴眼剂的人眼部药代动力学研究对眼科药物的开发及评价具有重要意义。本文对滴眼剂的眼部药代动力学特征、眼部药代动力学研究的设计要点、泪液及房水中药代动力学研究的设计及实施方法进行探讨。