摘要：上热的主要病机为肺胃热盛、心肝火旺;下寒的病机主要是脾气虚弱、肾阳衰微。治疗原则为清上温下、疏化三焦,常用方剂有白虎汤、肾气丸、柴胡桂枝汤、交泰丸、引火汤、半夏泻心汤、黄连汤等,外治法有针刺、温灸等。上热下寒证是一类虚实相兼、病机复杂的临床证候,治疗上并非清热、温阳药物的简单叠加,而是需要深入分析病机后,再予恰当方药。关于临床诊治疗效,目前文献报道多是独立病案,以经验用药为主,疗效评价标准不统一,缺乏严谨性。今后应加强科研设计,多开展大样本、多中心的随机对照研究,执行统一、规范的试验步骤,以提高研究结果的真实性、客观性、可重复性。

摘要：目的:从黄曲霉侵染对黄芪药材有效成分影响的角度评价真菌污染过程对黄芪质量的影响,并考察黄芪最佳储藏条件。方法:采用人工侵染接种的方法使黄芪染菌,通过采用Q-TOF HDMS质谱仪建立黄芪中9种有效成分(毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷和异黄芪皂苷Ⅰ)的同步分析谱,对比研究染菌前后有效成分的变化趋势。随后,采用中心组合设计—响应面法考察储藏环境温度和湿度对黄芪中真菌毒素产生的影响,优化最佳储藏条件。结果:在黄芪药材上接种曲霉孢子培养10 d后,黄芪霉变严重,其中黄酮苷成分显著减少,而黄酮苷元和皂苷成分变化较小。通过建立的温湿度与黄曲霉毒素含量相关性模型以及响应面曲线图,优化得到避免黄芪药材染菌产毒的最佳储藏环境为温度低于20℃,湿度小于85%。结论:本研究首次探索了黄曲霉染菌过程对黄芪药材质量的影响,并筛选出黄芪最佳储藏条件,为建立中药储藏过程防霉变体系提供依据。

摘要：目的:研究及评价姜黄挥发油的纳米脂质体系,以用于抑制黄曲霉菌生长及产毒,为纳米抗菌剂研究和开发奠定基础。方法:以安全性好的卵磷脂、胆固醇为膜材,采用乙醇注入结合超声乳化法,采用单因素考察与正交设计结合的方法优选姜黄挥发油脂质体制备工艺,并对所得脂质体进行理化表征和抗黄曲霉菌作用的评价。结果:采用卵磷脂与胆固醇比例10∶1,加药量与脂质比例1∶5,乙醇滴加速度1 m L/min,超声5 min,制备所得姜黄挥发油脂质体包封率、粒径分布、稳定性均较好。采用2 m L脂质体/25 m L培养基浓度,与黄曲霉菌共培养10 d,可完全抑制霉菌生长和黄曲霉毒素的产生。结论:将姜黄挥发油制备成纳米脂质体,既增加其体系稳定性和均一性,又保证了其抗黄曲霉菌性效,具有极大开发前景。

摘要：儿童参加临床试验是促进儿童用药健康发展和用药安全的重要手段,但邀请儿童参加临床试验面临的风险高于成人。为了保护儿童的利益,使其免受伤害,作为保护受试者权益重要措施的知情同意和知情同意书,在遵循一般医学伦理学原则基础上,还应考虑儿童心理、思维发育尚未完全的特点,本着保护儿童这一弱势群体合法权益、尊重儿童意愿的精神进行设计与操作。

摘要：目的:设计用于表达新型小发卡RNA(sh RNA)的慢病毒载体,并考察其用于抗乙型肝炎病毒(HBV)的可行性。方法:对慢病毒载体骨架SapⅠ位点进行突变,并将用于表达新型sh RNA的结构亚克隆到改造后的慢病毒载体;设计靶向HBV保守序列的sh RNA并克隆到该慢病毒载体,包装含有sh RNA序列的重组慢病毒并定量,考察单个及多个sh RNA结构串联对慢病毒滴度的影响;将重组慢病毒感染HBV稳定转染肝细胞系Hep ***(MOI=3),用杀稻瘟菌素筛选稳定克隆1周后,将其重新消化,并以1×105/孔接种于24孔板,于铺板96 h后取细胞上清检测HBs Ag、HBe Ag表达水平和HBV DNA的含量。结果:构建了一种用于表达新型sh RNA的慢病毒载体,并通过设计靶向HBV保守序列的sh RNA实现了HBV复制的高效抑制;发现多个sh RNA串联效果优于单个sh RNA。结论:构建的新型sh RNA慢病毒表达载体可作为防治慢性病毒感染如HBV感染的潜在有效手段之一,值得进一步研究。

摘要：科学哲学发展过程中的“证实”和“证伪”方法论,从一个问题的两个方面认证理论假说的科学性。我们可以从中得到启示:在中医药科学实验中不仅仅需要证实,还需要证伪。而后者对于一个实验假说的确证更重要。本文对此进行了讨论。结果表明一个实验设计的受试部分属于“证实”的相关内容,其余则属于“证伪”的范畴,即所谓的“对照”(Control)。证伪设计的充分与否直接关系到证实部分结果的确证性,也就是关系到实验假说的正确性。证伪对照设计的多少取决于该实验假设全称逻辑表述中内涵的多少。证伪属性的对照越充分,实验假设理论的检验也越确证。充分认识这些对于中医药科学实验设计水平的提高有积极的意义。

摘要：目的设计、合成14个咪唑酮类化合物并进行抗肿瘤活性研究。方法运用微波辅助方法完成咪唑酮类新化合物的合成,采用MTT法测定目标化合物体外抑制多种肿瘤细胞的增殖活性,并初步探究其构效关系。结果与结论化合物15c、15e等在体外抑制SGC-7901等瘤株增殖实验中呈现较好活性,其IC50<10μmol·L-1,为进一步的研究奠定了基础。

摘要：目的初步筛选微滤与超滤联用精制淫羊藿水提液的主要工艺参数。方法以总黄酮透过率、溶液固溶物去除率为指标运用单因素平行试验对微滤膜孔径、GE有机超滤膜的截留分子量进行筛选;采用正交设计,以平均膜通量为评价指标,对膜微滤过程中的料液浓度、操作压力、膜面流速三个主要工艺参数进行优化筛选;并检测药液膜精制前、后的粘度、浊度、电导率及p H等理化性质。结果初步确定以0.05μm无机陶瓷膜微滤,前料液生药浓度控制为0.1g生药/m L,膜前操作压力0.15 Mpa、膜面流速为4.0 m3/h,微滤液再进一步用截留分子量为800 Da的GE有机膜进行超滤。结论膜微滤-超滤联用技术对淫羊藿水提液具有良好的精制纯化效果,可有效去除杂质,保留有效成分,改善溶液理化性质。

摘要：人工设计合成规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)序列特异性引物,将从临床分离的大肠埃希菌株作为模板,采用PCR扩增方法筛选含有CRISPR系统的大肠埃希菌;利用噬菌斑法从医院未经消毒处理的污水中分离大肠埃希菌噬菌体,经过PEG沉淀的方法浓缩得到高滴度的噬菌体,再用该筛选噬菌体感染上述含有CRISPR的大肠埃希菌以筛选耐受该噬菌体的大肠埃希菌菌株。最后从70株大肠埃希菌中筛选到42株含有CRISPR序列的菌株,然后采用噬菌斑法分离到1株大肠埃希菌*** 147-30的裂解性噬菌体IME-EC1,在此基础上利用*** 147-30筛选到1株耐受噬菌体IME-EC1的大肠埃希菌菌株,命名为*** 147-30R1。

摘要：黄酮类化合物由于其较好的抗炎、抗氧化、抗肿瘤等作用,其研究一直备受关注。目前,黄酮类化合物的提取主要以有机溶剂提取为主,而使用绿色安全的溶剂作为溶媒的研究相当有限。因此,该研究通过绿色合成不同类型的低共熔溶剂（deep eutectic solvents,DESs）,考察其对夏枯草中黄酮类化合物提取的影响并优化其工艺,同时,考察DESs溶剂回收利用效率和总黄酮的回收方法。该研究以总黄酮提取率作为评价指标,以中心组合设计（central composite design,CCD）响应面法来优化DESs提取条件。结果表明,总黄酮的最佳提取最优条件为水与DESs（氯化胆碱-甘油1∶4）的体积比为27%,液固比为15m L·g（-1）,提取温度83℃,提取时间42 min。在此条件下,提取率的平均值（Y=75.05）与预测值相（Y=77.86）符合。而且,DESs法所得结果较先前报道的传统提取方法具有更高效、经济和环保等优势,此外,运用AB-8大孔树脂可对夏枯草总黄酮达到97.88%吸附率;采用5倍树脂量的100%乙醇可达到88.12%解吸附剂,收集上述处理后的DESs溶液按照同样方法提取样品,可达到95.23%重复提取率,说明大孔树脂的方法可进行高效简单的回收以及重利用,该项研究表明,DESs可作为一种可持续和高效的天然产物提取介质用于夏枯草等中药中黄酮类组分的提取。