摘要：非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起家猪和野猪的一种高死亡率的传染性疾病。ASFV具有庞大的基因组,其中非结构蛋白pD1133L被预测为其编码的6个解旋酶之一。本实验室应用免疫沉淀-质谱联用(immunoprecipitation-mass spectrometry,IP-MASS)技术筛选与pD1133L互作的宿主细胞蛋白,发现细胞波形蛋白(vimentin,VIM)为pD1133L互作的宿主蛋白之一,但尚不清楚宿主蛋白VIM对ASFV复制的影响。【目的】探究ASFV与VIM的相互调控作用,揭示VIM促进ASFV复制的机制。【方法】通过免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)试验验证pD1133L与VIM存在互作关系;外源过表达VIM蛋白以及设计并合成VIM的si RNA探究VIM对ASFV复制的影响;利用Western blotting以及荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)方法检测ASFV对VIM蛋白水平以及转录水平的影响;通过Western blotting、间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)探究巨噬细胞感染ASFV后VIM磷酸化水平变化以及亚细胞定位变化情况;CCK-8试剂盒检测VIM磷酸化抑制剂KN-93处理的最佳浓度,并利用Western blotting以及IFA检测KN-93对VIM磷酸化、亚细胞定位以及对ASFV复制影响。【结果】VIM过表达促进ASFV复制,敲低VIM的表达则抑制ASFV复制;ASFV感染抑制VIM蛋白水平以及转录水平表达,且呈时间依赖性;ASFV感染后VIM发生磷酸化修饰且发生亚细胞定位改变,从而促进ASFV复制。【结论】证实了ASFV与宿主蛋白VIM之间的相互调控作用;初步确定ASFV感染后VIM受到ASFV pD1133L调控,亚细胞定位发生重排向核周聚集从而促进ASFV复制的机制。

摘要：喷淋冷却是一种可以有效降低猪胴体预冷干耗的方法,但由于缺乏相关设备,生产中多采用人工作业的方式进行喷淋。针对人工作业中存在的劳动繁重、效果不稳定等问题,该文设计了一种以PLC(programmable logic controller)为处理器、触摸屏为人机界面的猪胴体喷淋冷却控制系统,该系统可实现猪胴体喷淋冷却作业的自动启停,并支持在触摸屏上人工调整喷淋作业参数等功能。干耗试验表明:人工喷淋的猪胴体24 h冷却干耗均值分别为:夏季1.59%±0.14%,冬季1.34%±0.10%,采用该控制系统分别为:夏季1.25%±0.07%,冬季1.19%±0.05%,相比于人工喷淋分别降低了21.4%、11.2%(喷淋参数:高频喷淋2 h、高频喷淋间歇时长30 min、低频喷淋4 h、低频喷淋间歇时长60 min、单次喷淋时长20 s)。该参数下,人工喷淋作业结束后,猪胴体需在预冷库内继续静置12 h才能将温度降至4℃,采用该系统完成喷淋作业后,继续静置7 h即可达到相同效果,减少了27.7%的冷却时间。该系统的猪胴体24 h降耗稳定性显著高于人工作业(P0.05),且具有操作简单,工作稳定可靠等特点,能够免除繁重劳动,降低人力成本。可适用于与生猪屠宰有关的降温降耗领域。

摘要：目的:建立一种猪支原体肺炎RT-PCR诊断方法。方法:选择云南省大理地区患有猪支原体肺炎疾病的60只猪作为研究对象,针对猪肺炎支原体的保守序列p36基因设计了引物和探针,建立猪支原体肺炎RT-PCR检测反应体系,并对其灵敏度、特异性、重复性进行分析及临床样本验证。结果:RT-PCR检测灵敏度为10^(2)拷贝、与PRRSV、PPV、FMDV、PCV、CSFV、APP等无交叉反应,批内和批间变异系数均小于2.00%,肺组织样本检出阳性数26例(86.67%),鼻拭子样本检出阳性数19例(63.33%)。结论:该研究成功建立了一种猪支原体肺炎RT-PCR诊断方法,具有较高的检测灵敏度和特异性,重复性能良好,这为后期MPS的临床精准诊断和疫病科学防控提供试验依据。

摘要：本试验旨在研究饲粮组成及抗生素对断奶仔猪生长性能和肠道健康的影响。试验采用2×2双因子试验设计,选择体况相似、胎次接近的24日龄断奶的"杜×长×大"仔猪72头,根据体重相近原则,随机分为4个处理,分别饲喂无抗复杂饲粮、无抗简单饲粮、有抗复杂饲粮和有抗简单饲粮,每个处理6个重复,每个重复3头仔猪。抗生素添加75 mg/kg金霉素和50 mg/kg吉他霉素(按有效成分计)。试验期共21 d。结果表明:1)与简单饲粮相比,复杂饲粮显著降低了试验第1~7天、第1~21天的仔猪料重比(F/G)和腹泻率(P<0.05),显著提高了试验第1~7天仔猪的平均日增重(ADG)(P<0.05),显著提高了仔猪回肠的绒隐比、空肠的杯状细胞数量(P<0.05),显著上调了空肠闭合蛋白(OCLN)mRNA相对表达量(P<0.05),显著提高了空肠白细胞介素-10(IL-10)和转化生子因子-β1(TGF-β1)含量(P<0.05),显著降低了回肠白细胞介素-1β(IL-1β)含量(P<0.05)。2)与无抗饲粮相比,有抗饲粮显著提高了试验第1~7天和第1~21天仔猪的ADG及试验第1~21天仔猪的平均日采食量(ADFI)和第22天的末重(P<0.05),显著降低了试验第1~7天、试验第1~21天仔猪的F/G和腹泻率(P<0.05),显著提高了仔猪回肠的绒隐比(P<0.05),显著提高了空肠和回肠的杯状细胞数量(P<0.05),显著降低了仔猪空肠和回肠Toll样受体2(TLR2) mRNA相对表达量(P<0.05)。综上所述,复杂饲粮可以提高断奶仔猪生长性能,降低腹泻率,增强肠道免疫屏障功能;抗生素能够有效抑制腹泻,但对仔猪肠道屏障功能有不利影响。

摘要：为了测定日粮不同纤维水平和品种对猪营养成分表观消化率的影响,试验选用8头4月龄猪,采用4×4拉丁方设计进行试验。4种试验日粮按等能等氮设计,日粮Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ粗纤维水平分别为3%、6%、9%和12%（干物质基础）,4个品种分别为莱芜猪（100%）、大莱猪（50%）、大大莱猪（25%）、大约克猪（0%）。在本试验条件下,日粮纤维在较低的范围内（3%~6%）粗蛋白质（CP）消化率随粗纤维含量的增加而提高,赖氨酸、蛋氨酸表观消化率差异不显著,CP在粗纤维含量6%时,消化率最高达到86.90%。不同品种猪对干物质、Ca、P的消化率影响极显著（P〈0.01）,但莱芜猪和大约克猪对干物质、CP消化率的影响差异不显著,莱芜猪对NDF的消化率为51.44%,大约克猪为43.51%,两者之间差异极显著（P〈0.01）。NDF和ADF的表观消化率随猪血统中莱芜猪血比例的降低而显著降低,NDF在小肠中已得到有效的分解,本试验结果证实莱芜黑猪具有耐粗饲的特性。不同品种猪对必需氨基酸（EAA）的表观消化率除赖氨酸、苏氨酸、异亮氨酸外影响均不显著。

摘要：为了测定日粮不同中性洗涤纤维水平及猪品种对猪氮代谢的影响,试验选用8头4个月龄猪,采用4×4拉丁方设计进行试验。4种试验日粮按等能、等氮设计,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组粗纤维水平分别为6%、9%、12%和15%(干物质基础),4个品种猪分别为莱芜猪(100%)、大莱猪(50%)、大大莱猪(25%)、大约克猪(0%),试验采用顿称顿喂的饲养方式。试验结果表明,ADF对IN、FN、DN、RN、氮表观消化率影响极显著(P0.05),经相关性分析I,N、UN、DN、RN、氮表观消化率与ADF含量之间为负相关,与FN之间为正相关。猪不同的品种对氮的代谢影响不同,猪品种对IN、FN、DN、RN、ABV的影响极显著(P0.05)。经相关性分析,UN、氮表观消化率与莱芜猪血源含量之间呈正相关,而IN、FN、DN、RN、ABV与之为负相关。

摘要：针对传统猪肉新鲜度检测中存在的操作复杂、时间久、易受人为因素影响等缺点,设计了基于多传感器数据融合的电子舌系统。该系统由电位传感器和伏安传感器两部分构成,通过分析计算传感器阵列对猪肉响应曲线的特征值来考量猪肉新鲜度的变化。采用电位传感器与伏安传感器特征融合的方法对猪肉进行了特征向量的提取,使用逐步判别法对所提取的特征向量进行了优化,使用Bayes判别法分析了猪肉的新鲜度变化情况。实验结果表明,该电子舌系统能够准确鉴别出5组测量间隔时间均为12h猪肉新鲜度的不同。该系统为猪肉新鲜度智能化检测提供了新的有效方法。

摘要：猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)引起的一种急性、热性传染病。自2011年底以来,PRV发生了变异,传统的PRV弱毒疫苗已不能对PRV变异株提供完全保护,这给我国PR防控带来了巨大挑战。为了解安徽省PRV流行特征及其主要毒力基因遗传变异情况。利用PCR技术、细胞接种试验、电子显微镜观察、间接免疫荧光试验及兔体接种试验等方法,对安徽省临诊病例中疑似PRV感染的病猪进行病原检测及PRV分离鉴定,并通过设计6对特异性引物对PRV分离株主要毒力基因(gE、gI、TK、gB、gC、gD)进行克隆及测序分析。2016—2018年安徽省临诊病例中共分离鉴定15株PRV;PRV分离株主要毒力基因序列均与2011年后国内PRV变异株同源性较高;与2011年前国内PRV经典株序列比对,PRV分离株gE、gB、gC及gD基因存在多个位点的一致性替换、插入或缺失,且gE、gC基因多位点突变位于其重要的抗原表位区。本研究分离的15株PRV均为变异株,变异株已成为安徽省主要的流行毒株。15株PRV分离株的gI、TK基因序列较为保守,而gE、gC蛋白抗原表位区域氨基酸的突变可能导致其毒力及抗原性发生改变。部分PRV分离株与邻近地区PRV序列同源性均为100%,可能与频繁跨省调运生猪、跨区引种等原因有关。

摘要：Sirt2是组蛋白去乙酰化酶(HDAC III)家族成员之一,对细胞周期、自噬、脂肪细胞分化、神经细胞存活等生物学过程的调节发挥重要作用.目前,Sirt2在肌肉发育过程中的研究尚未见报道.本文通过构建Sirt2慢病毒干扰载体,侵染C2C12成肌细胞,并用细胞免疫荧光化学、real-time PCR和Western印迹方法,检测其对成肌分化标志基因及相关信号通路因子的影响.结果显示,干扰质粒shRNA-663处理C2C12细胞后,Sirt2 mRNA及蛋白质表达水平与对照相比显著下调(P<0.01);C2C12细胞分化第4 d,MyoD,MyoG,MyHC mRNA及蛋白质表达均显著增加(P<0.01);PI3K,AKT,FoxO1磷酸化水平明显升高.结果表明,Sirt2可通过PI3K/AKT/FOXO1信号通路来促进成肌细胞分化,是肌生成的一个潜在调节因子.

摘要：为了对规模化和集约化型猪场猪舍环境进行监测与控制,以无线通信模块JN5148为核心,进行了基于无线传感器网络(WSN)技术的开发,设计了环境监测仪。在此基础上组成现场监控网络,对猪舍温度、湿度、氨气(NH3)浓度和硫化氢浓度(H2S)进行动态监测,并设计了对不同猪生长阶段的监控指标,通过手机电脑等智能终端进行预警提示。采用B/S(浏览器/服务器)模式,实现通过浏览器远程实时监控猪舍。经过半年时间在实际生产过程中的应用表明,该系统运行性能稳定可靠,在数据采集、传输及远程监控中均达到实际需求,适合应用于猪舍环境精准的监测。