摘要：诱导广谱有效的中和抗体被认为是预防性疫苗成功的关键,HIV中和抗体检测方法的建立和标准化为HIV疫苗评价和设计提供指导,也为不同HIV疫苗的比较提供了平台。本文从方法的建立、假病毒株的选择、评价标准的制定、评价策略的确定、该方法在HIV其它研究领域的应用等方面,对目前应用最广泛的以假病毒为基础的中和抗体评价方法进行了综述。

摘要：目的建立一种准确地鉴定肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)基因的方法。方法比对11种KPC型碳青霉烯酶基因,在保守区设计引物和探针,优化PCR反应体系,评价特异性、灵敏度和重复性,对样本分离株进行检测,通过测序、药敏实验等验证该方法的正确性。结果该方法可准确、特异地鉴定KPC型碳青霉烯酶基因,其他不携带该基因的菌株均无阳性结果;阳性质粒、纯培养细菌和模拟样本的灵敏度分别为10 copies/μL、10 CFU/mL和102CFU/mL;检测489株临床痰液样本分离菌,产KPC型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌阳性7例,大肠埃希菌阳性11例、枸橼酸杆菌阳性1例,与测序结果完全一致。结论荧光定量PCR法能准确、特异、快速地鉴定KPC型碳青霉烯酶基因,操作简便,可用于产KPC型碳青霉烯酶菌株的临床诊断及流行病学调查,同时,检测结果表明浙江地区目前以携带产KPC-2型碳青霉烯酶为主的菌株。

摘要：目的研究AP-1和ETS-1转录因子结合位点（TFBS）缺失对树突状细胞特异性胞间黏附分子-3结合非整合素（DC—SIGN）启动子活性的影响，探讨DC—SIGN表达的机制。方法从人外周血中提取全基因组DNA，设计DC-SIGN启动子序列上下游引物、转录因子结合位点两侧的引物及其相应的连接引物，利用PCR方法，通过不同的引物组合扩增出转录因子结合位点两侧的片段，再用连接引物连接两片段，得到转录因子结合位点缺失的DC—SIGN启动子序列，通过双酶切、连接的方法，将得到的DC—SIGN启动子序列定向克隆入荧光素酶报告质粒，将上述质粒通过脂质体转染Hacat和293细胞，48h后检测荧光素酶的活性。结果体外扩增得到的转录因子结合位点缺失的DC—SIGN启动子序列以及重组的荧光素酶报告质粒经双酶切、基因测序鉴定正确，荧光素酶活性检测结果显示AP-1位点缺失使DC—SIGN启动子活性下降20％（293细胞）和10％（Hacat细胞），带增强子的DC—SIGN启动子活性下降了40％～50％；ETS—1位点缺失的普通型和带增强子型DC—SIGN启动子的活性几乎消失。结论ETS-1转录因子结合位点在DC—SIGN启动子活性表达中起重要作用，AP-1转录因子结合位点作用不大。

摘要：目的了解肺结核(TB)患者的心理健康状况及其影响因素。方法在中国5个省(直辖市)中的1个地市级结核病专科医院及该市所辖的1个区(县)结防机构中抽取非耐药肺结核患者176例,采用自行设计的调查问卷和凯斯勒心理疾患量表10(K10)进行面对面问卷调查。结果肺结核患者的K10分值平均为(14.20±5.97)分,27.3%的患者心理健康状况相对较差(K10分值在16～50分);单因素和多因素分析结果显示,非当地户籍、因治疗TB贷款或借款、距初次确诊年限长是肺结核患者K10分值高的独立危险因素(均为P<0.05),R2为0.104。结论肺结核患者的心理健康状况较差,经济状况是最主要的影响因素。

摘要：[目的]建立一种高效、简便制备双脱氧核苷(ddATP、ddTTP、ddGTP和ddCTP)封闭寡聚核苷酸的方法。[方法]选取乙醛脱氢酶(ALDH)基因,设计特异性上、下游引物。使用末端转移酶和碱性磷酸酶对引物进行双脱氧核苷修饰,利用荧光定量PCR对制备的封闭引物进行验证,并结合校读PCR对突变体进行检测。[结果]经过ddNTP封闭的引物,在普通荧光PCR体系中无法进行引物延伸;在校读PCR体系中则可以区分ALDH2的两种等位基因。[结论]该方法可以高效合成4种双脱氧核苷封闭的寡聚核苷酸,并且这种封闭的引物可以结合校读PCR对单核苷多态性进行检测。

摘要：目的监测2008年我国不同地区15所教学医院医院感染患者中分离的肠杆菌科细菌的耐药性。方法按设计方案收集非重复的1 357株医院感染患者中分离的肠杆菌科细菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定15种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),数据输入WHONET5.6软件进行统计分析。结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌敏感率较高的药物有美罗培南(97.6%～100%)、帕尼培南(79.8%～98.4%)、亚胺培南(64.9%～98.1%)、厄他培南(91.3%～97.4%)、哌拉西林-他唑巴坦(87.2%～97.4%)、头孢美唑(82.1%～97.0%)和阿米卡星(89.9%～93.8%)。肠杆菌属细菌敏感率较高的抗菌药物有美罗培南(98.7%)、帕尼培南(96.4%)、亚胺培南(95.4%)和阿米卡星(85.7%)。弗劳地枸橼酸杆菌和黏质沙雷菌敏感率较高的药物有碳青霉烯类抗生素(92.0%～100%)、哌拉西林-他唑巴坦(93.1%～99.1%)、阿米卡星(89.0%～94.3%)和头孢吡肟(86.2%～93.1%)。结论碳青霉烯类抗生素、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星对医院分离的肠杆菌科细菌保持了较高的抗菌活性,头孢美唑对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌表现出良好的抗菌活性。

摘要：目的参照文献建立一种快速、灵敏、准确的生殖支原体（Mg）的检测方法，并应用该方法调查生殖支原体在广西贺州暗娼中的流行情况。方法参考文献中以生殖支原体Pa基因为靶基因设计的引物和Taqman MGB探针进行实时定量PCR，以生殖支原体标准菌株G37制备标准品，对广西贺州暗娼人群的宫颈拭子标本进行生殖支原体的检测。结果建立的Taqman MGB实时定量PCR方法检测的线性范围好（1×10—10^6拷贝／μl，R^2=0．993，重复性好，（批内变异系数=0．7％，批间变异系数：1．09％），敏感性高，检测限（LOD）为10拷贝／μl，定量限（LOQ）为50拷贝／μl。采用该方法检测404份拭子标本，生殖支原体的检出率为12．1％。结论针对生殖支原体Pa基因的TaqmanMGB实时PCR可以快速、灵敏地对生殖支原体进行定性及定量的检测。

摘要：目的 建立结合多重反转录巢式PCR技术检测HIV RNA的小型集合NAT,用于MSM人群急性感染的筛查诊断.方法 利用2008年10月至2009年3月期间从3名HIV窗口期感染者、30名HIV慢性感染者、97名健康人采集冻存的EDTA抗凝血浆建立小型集合NAT.将10份待测标本混合组成1个集合,离心富集病毒,提取RNA 针对HXB2的nt5783-nt6228和nt1235-nt2012区分别设计2对引物 采用多重RT-PCR、巢式PCR扩增2个目标区的核酸片段,对结果阳性的集合中标本进一步分别检测.确定小型集合NAT的灵敏度,并进行验证.应用建立的方法对1 005份与上述标本同一时期收集的MSM人群的HIV抗体阴性血浆进行检测.结果 （1）成功扩增出目标区的2条特异性片段,灵敏度为162拷贝/ml （2）对3份HIV窗口期感染者标本用小型集合NAT方法盲法验证的结果和预期一致 （3）用多重RT-PCR和巢式PCR对30份HIV抗体阳性标本检测,阳性率100%（30/30） （4）发现1 005份血浆标本中有1份为HIV RNA阳性,追踪随访发现HIV-1抗体转阳.结论 本研究中建立多引物小型集合RT-PCR、巢式PCR结合的小型集合NAT的敏感性好,可用于MSM人群HIVG感染窗口期筛查检测.

摘要：人B组轮状病毒曾在我国发生过散发和暴发流行,近年来在世界多个国家也均有报道。为建立一种灵敏和特异的人B组轮状病毒荧光定量RT-PCR检测方法,本研究针对人B组轮状病毒NSP3片段保守区设计和筛选特异性引物和探针,优化反应体系和反应条件,并对该方法的灵敏性、特异性、稳定性进行评价。结果显示,该方法针对人B组轮状病毒检出限可以达到6.28拷贝/μL;与多种常见和罕见的人腹泻病毒没有交叉反应;批内和批间等重复性试验变异系数均小于5%。本研究建立的人B组轮状病毒荧光定量RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性强、稳定性好、检出率高,可作为一种新的技术手段应用于人B组轮状病毒的快速筛查与诊断。

摘要：指出跨学科与转化研究模式的兴起为图书情报学领域提供了新的挑战与机遇,并分析国外图书馆或情报学机构支持转化研究的实践或行动,包括:①转化型研究文献的检索;②临床数据管理;③生物信息学工具与方法支持;④研究合作支持;⑤转化研究的追踪与评估。在此基础上提出国内图书情报服务支持医学转化研究的优先努力方向:①应用文献分析方法测度和揭示转化研究进程;②帮助科研人员寻找最佳的合作研究者;③建立科学家的科研合作信息平台;④设计适合国内转化研究的绩效评估体系。