摘要：为了建立绿脓杆菌的SYBR Green I实时定量PCR检测方法,以便更加快捷、方便的检测绿脓杆菌,根据16S rDNA高度保守的特性,在绿脓杆菌16S rDNA保守区设计1对引物,利用普通PCR技术扩增出绿脓杆菌16S rDNA保守区277 bp的片段,并克隆到pMD-18 T载体上,纯化的质粒作为模板进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了绿脓杆菌的荧光定量PCR检测方法。并对方法的灵敏性、特异性、重复性进行评价,又进一步在临床实践中进行检验。结果显示,所建立的方法对标准样品的最小检出浓度为28拷贝/μL。并且特异性检验结果显示与常见的菌群没有交叉反应,重复性良好。在临床中检测疑似绿脓杆菌感染病料55份,用所建立的荧光定量方法检测出阳性病料40份,而普通的PCR方法检测出阳性病料32份。表明建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可以在临床中用于绿脓杆菌的检测。

摘要：使用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,在pH值7.6,蛋白用量10～15μg/mL条件下,制备形成4种葫芦科植物病毒多克隆抗体的稳定胶体金蛋白复合物;设计了双向复合试纸条,使用微定量喷头在试纸条两侧的硝酸纤维素膜上分别喷2条病毒检测线和1条质控线,组装制成免疫层析检测试纸条。结果表明经过条件优化后制备的双向复合试纸条特异性好,可在10min内同时检测4种葫芦科植物病毒,且对不同病毒阳性材料的检测灵敏度可达到稀释103倍以上。

摘要：以矿井架空人车尾轮为研究对象,在UG软件平台对尾轮进行参数化三维建模,利用ANSYS Workbench软件对尾轮进行静态分析,根据分析结果采用DOE方法,以质量和应力2个输出参数为约束条件对尾轮进行多目标优化设计,有效减轻了尾轮的重量,降低了最大等效应力。

摘要：以喷射虹吸式陶瓷坐便器为研究对象,按照国标GB/T 3768—1996《声学声压法测定噪声源声功率级反射面上方采用包络测量表面的简易法》规定的声学通用性导则,依据包络声源测试原理,探索建立了平行六面体和半球测量表面两种声学监测数学模型,制定了测量表面、测点阵列、测试参数、测试环境、测试步骤、安装条件、仪器设备、数据处理和不确定度评定等一系列关键技术内容;并采用单因素方差分析法,考察了在上述两种测量表面条件下同一坐便器声源样品冲洗噪声测量结果之间的离散性差异程度。研究表明,当显著性差异水平为5%时,按照平行六面体及半球测量表面法对5件陶瓷坐便器样品进行连续3次冲洗噪声测定后,每件样品的6个平均声压级及声功率级测量结果间均无显著性差异。

摘要：通过对阻燃防护服产品质量和性能指标的分析和研究,提出了影响产品质量的3个因素,即穿着服用质量因素、阻燃防护质量因素和功能舒适质量因素。建立了可量化的质量评价分指数和综合指数及计算模型,并对5种产品的质量进行评价。结果表明,该模型可用于对阻燃防护服产品质量进行量化比较和分析,为设计研发、工艺调整和质量控制提供科学的分析依据。

摘要：选择包含系统的约束条件和梯度信息的最优性条件(necessary conditions of optimality,NCO)作为控制系统的实现目标,可以从结构设计角度有效地提高生产过程的经济性能.针对NCO在线不易直接测量、离线估计不及时和不准确等问题,提出了一类基于高斯过程的NCO建模、预测及控制方法.通过生产过程实时数据在线动态更新高斯过程模型,实时准确预测NCO的值,以决策下一时刻的最优控制率,实现生产过程对经济性能最优值的跟踪.对一个化工过程实例进行了仿真,结果验证了该方法的有效性.

摘要：本研究利用环介导等温扩增技术,建立了进境苜蓿种质的LAMP快速鉴定方法。选取叶绿体基因组中的条码基因mat K设计的1组特异性引物,进行反应条件优化,从而建立起了苜蓿种质的LAMP鉴定方法。该方法检测速度快,灵敏度比PCR法高10倍,可有效区分几种同为豆科的牧草;通过观察仪器输出的实时荧光曲线即可判断是否发生了扩增,大大提高了检测速度。本研究为进境苜蓿种质鉴定提供了一种较为快速、可行的方法。

摘要：为建立番茄黑环病毒(Tomato black ring virus,TBRV)的液相芯片检测技术,对GenBank中的TBRV核苷酸序列进行分析,设计其特异性探针并用生物素标记。探针偶联荧光编码微球后与TBRV的RT-PCR产物进行杂交,用液相芯片检测仪检测荧光信号。结果表明:建立的方法具有良好的特异性,能够有效区分侵染马铃薯的TBRV、马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)、马铃薯A病毒(PVA)及番茄斑萎病毒(TSWV);检测灵敏度约为1pg/μL总RNA,与常规RT-PCR灵敏度相当。实际样品检测结果表明该方法可用于TBRV的日常检测。

摘要：【目的】新菠萝灰粉蚧Dysmicoccus neobrevipes Beardsley是近年来口岸中经常截获的检疫性有害生物,其与近似种形态差异小,极易随进境果蔬及种苗传播蔓延,但却难以快速准确鉴定。【方法】以新菠萝灰粉蚧为靶标,进境水果中常截获的其他6种粉蚧为对照,利用扩增粉蚧的28SrDNA通用引物扩增7种粉蚧基因部分序列,同时应用Primer Premier 5软件设计新菠萝灰粉蚧28S rDNA种特异引物1对(***-28SF/R)。【结果】获得了新菠萝灰粉蚧及其他6种粉蚧的28SrDNA基因部分序列;种特异引物(***-28SF/R)能稳定扩增出片段大小为235 bp条带,且该引物只对新菠萝灰粉蚧具有扩增能力,对其他6种粉蚧不具有扩增效果;对不同寄主来源新菠萝灰粉蚧亦具有同样的扩增效能。【结论】利用基于28S rDNA种特异性PCR方法,建立了新菠萝灰粉蚁快速分子检测技术。该技术方法完全可用于新菠萝灰粉蚧的准确识别,对有效阻截其进一步扩张蔓延具有重要实践意义。

摘要：根据施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)S基因节段设计一对引物和TaqMan探针,建立了检测SBV核酸的荧光定量RT-PCR方法。通过优化反应体系和反应条件,该方法对101~107半数组织培养感染量(TCID50)的SBV核酸呈现良好的线性关系。利用德国FLI制备和保存的SBV核酸阳性(n=140)、SBV核酸阴性(n=132)和辛波血清群相关病毒核酸样品(n=16),对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了验证。结果表明,所建立方法与FLI研制的SBV荧光定量RT-PCR具有相近的敏感性,两者对140份SBV核酸阳性样品的检测符合率达96.4%(135/140);可灵敏地检测出1TCID50的SBV RNA,并具有良好的重复性;除道格拉斯病毒(Douglas virus)外,与辛波血清群相关病毒核酸无交叉反应。用该方法对采自内蒙古呼和浩特市某养殖场的绵羊血清(n=47)和澳大利亚进口绵羊血清(n=47)的RNA进行了检测,结果未发现SBV核酸阳性样品。SBV荧光定量RTPCR检测方法的建立为应对施马伦贝格病提供了有效的检测手段。