摘要：目的:建立新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法。方法:分析新疆出血热病毒核酸S片段序列的保守性,设计新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR引物和探针。以体外转录后的RNA作为阳性对照模板,摸索出实时荧光RT-PCR检测的最佳引物浓度、探针浓度和反应体系条件,并进行灵敏度和特异性分析。结果:建立的新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法最佳反应体系为:正向引物CCHFV-FP终浓度250 nM,反向引物CCHFV-RP终浓度500 nM,探针CCHFV-Probe终浓度500 nM;扩增程序为:50℃10 min,95℃10 min;95℃5 s,57℃20 s 45次循环。该方法最低检测限约为2 copies病毒/反应,与森林脑炎病毒和汉坦病毒无交叉反应。结论:该方法灵敏度高、特异性强,适用于新疆出血热病毒的快速检测。

摘要：根据沙门氏菌属高度保守的fimY基因序列设计了2对特异性引物,采用环介导等温扩增方法(LAMP)建立了食品中沙门氏菌的LAMP快速检测方法。结果表明,建立的LAMP方法具有高度特异性,经对40种共68株细菌进行扩增,所试32株沙门氏菌均为LAMP阳性,其他菌株为LAMP阴性。建立的LAMP方法对培养的沙门氏菌的检测灵敏度为5CFU/管,对污染食品中沙门氏菌的检测灵敏度为9CFU/管,60min内即可完成检测。用建立的LAMP方法对802份肉类、蛋、奶及其制品和动物腹泻物、人工污染样品等进行检测,共检出165份LAMP阳性样本,与国标(GB/T4789.4-2008)方法的检测结果一致。建立的LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。

摘要：为快速和准确检测炭疽杆菌,本研究以炭疽杆菌染色体上的BA5345基因和pXO1质粒上的PA基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立了炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与常规PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示,所建立方法特异性强,与蜡样芽胞杆菌群中其他芽胞杆菌无交叉反应;对BA5345基因和PA基因的最低检测限分别为8.0和7.8拷贝·μL^-1,标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5%。对35份污染皮毛样品检测显示BA5345基因和PA基因的检出率分别为80.0%和82.9%,与常规PCR检测方法相比,敏感性更高。本研究为炭疽杆菌的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法。

摘要：针对压力变送器生产过程中对其综合静态性能的检测要求,利用高精度压力控制器和数据采集卡设计开发了一套高精度压力变送器综合性能测试系统。为提高系统的抗干扰能力,提出了新型递推滤波软件算法,保证获得数据的可靠性和稳定性。实验结果表明,该系统满足检测精度和生产节拍的要求,实现了综合性能的自动检测。

摘要：小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellowmosaic virus,ZYMV)是葫芦科作物上的一种重要病毒,近几年来已成了我国葫芦科作物上的一种重要病原物。根据已知的ZYMV基因组序列分别设计了2对特异性引物,在优化RT-PCR条件的基础上,成功建立了ZYMV的RT-PCR检测方法。引物ZYM1/ZYM2用于扩增整个CP基因序列(片段长度949 bp),而引物ZYM3/ZYM4用于扩增部分CP基因序列(片段长度449 bp),其中,引物ZYM3/ZYM4的检测灵敏度比引物ZYM1/ZYM2的检测灵敏度高。把所建立的方法用于南瓜(Cucurbita mos-chata)、丝瓜(Luffa cylindrica)病叶的检测,结果在这些病叶中也检出ZYMV。因此,该方法可用于ZYMV的快速、灵敏检测及分子流行病学的调查研究。

摘要：设计了太赫兹时域光谱(terahertz time-domain spectroscopy,THz-TDS)快速检测系统,用于研究皮质类固醇类激素黄体酮在太赫兹波段的光学特性。在室温下获得样品在0.2~2.0 THz波段内的吸收光谱,然后采用密度泛函理论(density functional theory,DFT)对样品物质的结构和振动频率进行模拟,对分子的太赫兹特征吸收峰进行分析指认。结果表明黄体酮在此波段内存在多个特征吸收峰,试验结果与理论计算结果吻合较好,可以根据吸收峰的强度估计黄体酮的含量。黄体酮在太赫兹波段的指纹谱验证了THz-TDS技术用于皮质类固醇激素检测的可行性,为化妆品非法添加皮质类固醇激素的检测提供了新方法。

摘要：目的肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7是一种重要的人畜共患病致病菌,主要通过被污染的食物传播,引起出血性结肠炎,建立其快速检测方法具有重要意义。方法基于EHEC O157∶H7保守的rfbE基因序列,设计4条引物,利用环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermal amplification,LAMP),成功建立了EHEC O157∶H7LAMP快速检测方法 ,60min内即可完成致病菌检测。结果利用该LAMP方法对30种共38株细菌进行检测,所试EHEC O157∶H7均为阳性结果 ,说明该方法具有高度特异性。本方法对纯培养的EHEC O157∶H7检测限为12CFU/mL,污染食品中EHEC O157∶H7的检测限为18CFU/g。实践应用表明,对1121份进出口肉类、奶类制品及人工污染样品等进行检测,检出57份LAMP阳性,与采用AOAC标准检测结果的符合率为100%。结论该LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。

摘要：为了建立牦牛肉源性检测的实时荧光PCR方法,本研究基于比较牦牛与黄牛、鸡、猪、羊、鸭等动物的Cytb基因序列差异,设计其特异性引物。特异性实验结果表明,猪肉、鸡肉和黄牛肉的DNA均不与引物发生交叉反应;灵敏度实验表明方法的最低检出限可达0.004 ng/μL;抗干扰实验结果表明,当牦牛肉的添加量为1%时仍可检出;对市场上的20份不同种肉样进行检测,除牦牛肉样品检测结果呈现阳性外,其余肉样均为阴性。本实验所建立的实时荧光PCR方法为牦牛源性成分鉴别提供一种快速、准确、专属性强的检测方法。

摘要：建立肉及肉制品中鸭源成分快速检测的可视化核酸试纸条法。设计鸭特异性引物,建立鸭成分检测可视化核酸试纸条方法,验证方法的特异性与灵敏度,并对市售肉及肉制品进行检测。该方法检测灵敏度0.1%,能够从鸭肉样品扩增出291 bp特异性DNA片段,而鸡、鹌鹑、猪、马、牛、羊、驴、鹿、骆驼、胡萝卜、白菜等动植物样品无扩增条带。建立的鸭源成分检测可视化核酸试纸条法特异性好,灵敏度高,简便,快速,是鸭源成分检测的有效方法。

摘要：针对产品仿真分析中,只考虑单一物理场对于产品设计的影响,往往导致产品的一种性能的提升,而其他的相应性能降低。为解决这个问题,提出一种基于计算流体力学软件(STAR-CD)和声振软件(Sysnoise)的流场与声场耦合仿真分析新方法,综合分析流场和声场对于产品设计的影响。将消音器的局部设计作为应用研究对象,分析产品的噪声指标和整机功效的变化,在噪声的传递损失没有显著变化的前提下,降低消音器内部流场的压降损失,优化整机的功耗比。数值试验表明该方法对于产品的优化设计是有效的。