摘要：目的了解云南大理在校大学生蓝氏贾第鞭毛虫、人芽囊原虫、毕氏微孢子虫的感染情况,为青少年肠道寄生原虫病的防治工作提供参考依据。方法采集426份云南大理在校大学生粪便样本,提取DNA,根据设计的引物序列进行PCR扩增,通过测序和序列比对,确定其基因型并构建遗传进化树。应用软件SPSS 19.0进行统计学分析。结果426份在校大学生粪便样本中PCR扩增出25份阳性样本,3种原虫感染率分别为:蓝氏贾第鞭毛虫4.23%(18/426)、人芽囊原虫1.41%(6/426)、毕氏微孢子虫0.23%(1/426);蓝氏贾第鞭毛虫感染率在不同性别、民族之间差异均无统计学意义(P>0.05),来自农村的学生感染率5.57%显著高于城镇学生0.83%(P0.05),少数民族感染率1.99%略高于汉族感染率0.57%,但不同民族、生源地之间差异均无统计学意义(P>0.05)。经鉴定蓝氏贾第鞭毛虫、人芽囊原虫、毕氏微孢子虫的基因型分别为AⅠ亚型、ST1型、EbpC型,且均为人兽共患基因型。结论大理在校大学生存在蓝氏贾第鞭毛虫、人芽囊原虫、毕氏微孢子虫感染,具备潜在的传播风险。学校应加强对青少年学生的卫生宣传教育,培养学生养成良好卫生习惯,提高学生自我保健能力。

摘要：为了了解云南省独龙牛环孢子虫(Cyclospora)的分子流行病学情况,试验分四个季节从云南省怒江流域(鸠门当、古泉村、茨开镇、亚左洛村)和独龙江流域(独龙江乡)共五个地点采集1129份独龙牛粪便样本,根据环孢子虫的18S rRNA基因序列设计引物进行巢式PCR扩增,以限制性内切酶BspEⅠ进行限制性片段长度多态性(RELP)分析。利用BLAST工具对测得的序列与NCBI上已发表的环孢子虫18S rRNA基因序列进行比对分析,通过生物学软件MEGA 6.0计算遗传距离并采用邻接法(NJ法)构建遗传进化树,以统计学软件SPSS对感染率进行分析。结果表明:从1129份粪便样本中共检测出17份环孢子虫阳性样本,对测得序列进行同源性分析发现,5份样本与人环孢子虫亲缘关系较近(98.5%~99.4%),11份样本与广州牛源环孢子虫亲缘关系较近(94.4%~98.8%),1份样本与其他种类环孢子虫亲缘关系较远。独龙牛环孢子虫的总感染率为1.51%(17/1129),怒江流域和独龙江流域的感染率分别为1.00%(9/903)和3.54%(8/226),两者比较差异显著(P0.05)。说明云南省独龙牛存在环孢子虫感染,地点是独龙牛感染环孢子虫的影响因素,独龙江乡的感染风险较高,当地应做好防控工作。

摘要：为了了解云南省怒江州独龙牛芽囊原虫的感染情况及基因型,试验分4个季节从怒江州怒江流域(古泉村、亚左洛村、鸠门当、茨开镇)及独龙江流域(独龙江乡)5个地点采集到987份独龙牛粪便样本,基于芽囊原虫的18S rRNA基因序列设计引物,采用常规PCR方法对粪便DNA进行扩增,琼脂糖凝胶电泳后对阳性样本进行测序分析。使用Clustal X 1.83软件和BLAST程序对测得序列在GenBank上与芽囊原虫参考序列进行同源性比对,通过MEGA-X软件计算序列之间的遗传距离,采用邻接法(NJ)构建系统进化树,以SPSS 19.0软件对感染率进行统计分析。结果表明:共得到119份芽囊原虫阳性样本,与GenBank中单峰驼芽囊原虫SSU rRNA基因序列(KC148207.1)相比,同源性为97.06%~98.92%;与牛芽囊原虫SSU rRNA基因序列(KC148205.1)相比,同源性为96.86%~98.19%,鉴定出ST10、ST14两种基因亚型。独龙牛芽囊原虫的总感染率为12.06%,其中古泉村、亚左洛村、鸠门当、茨开镇、独龙江乡感染率分别为7.28%、12.30%、19.27%、12.28%、9.20%,鸠门当采样点芽囊原虫的感染率与其他采样点比较差异显著(P0.05)。春夏秋冬4个季节芽囊原虫感染率分别为8.03%、11.39%、10.94%、18.22%,春季芽囊原虫感染率最低,冬季最高,两者比较差异显著(P<0.05)。说明怒江州独龙牛存在芽囊原虫感染,不同采样点的芽囊原虫感染率存在差异,冬季芽囊原虫感染率最高,需采取相应措施进行预防。