摘要：目的 探讨S期激酶相关蛋白 2（Skp2）表达变化对系膜细胞增殖的影响.方法 设计合成大鼠Skp2 siRNA和对照siRNA、pIRES-GFP-Skp2质粒和pIRES-GFP质粒.采用脂质体转染法进行细胞转染.半定量PCR和Western印迹法检测Skp2的mRNA、蛋白表达.原代培养的大鼠系膜细胞以每孔3000个接种于96孔板,分为以下6组：（1）无血清组;（2）20%胎牛血清（FCS）组;（3）10%FCS＋pIRES-GFP质粒转染组;（4）10%FCS＋pIRES-GFP-Skp2质粒转染组;（5）20%FCS＋对照siRNA组;（6）20%FCS＋Skp2 siRNA组.四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞相对活力和相对细胞数;BrdU标记法检测S期细胞;流式细胞仪检测细胞周期.结果 半定量PCR法结果显示,与阴性对照siRNA组相比,Skp2 siRNA转染后Skp2 mRNA表达显著下调.Western印迹结果显示,与pIRES-GFP质粒转染组相比,pIRES-GFP-Skp2质粒转染后Skp2蛋白表达显著上调.MTT、BrdU和细胞周期分析显示,与相应对照组相比,Skp2质粒转染后相对细胞数增加（A值：0.419±0.088比0.305±0.036,P＜0.01）、S期细胞数增多（BrdU阳性细胞：0.21±0.04比0.15±0.03,P＜0.01;S期细胞数：20.18±0.64比14.33±0.37,P＜0.01）;Skp2 siRNA转染后相对细胞数减少（A值：0.328±0.069比0.482±0.133,P＜0.01）;S期细胞数减少（BrdU阳性细胞：0.17±0.01比0.24±0.00,P＜0.01;S期细胞数：16.52±0.75比23.81±1.25,P＜0.01）.结论 Skp2过表达促进系膜细胞增殖,下调Skp2表达可抑制系膜细胞增殖.

摘要：背景:研制一种生物相容性好、可降解、体内释药时间长、来源充分、使用安全的抗生素局部释药系统是目前国内外骨髓炎治疗领域的一个重要发展方向。海藻酸钠和壳聚糖具备优良的生物特性,可以作为抗生素局部释药系统的良好载体。目的:观察海藻酸钠/壳聚糖作为万古霉素缓释载体局部用药的可行性与安全性,并与全身用药比较。设计、时间及地点:体内药物浓度测定,配对分组实验,于2008-08/2009-03在大连大学附属中山医院动物实验室、骨科实验室完成。材料:将海藻酸钠溶液与万古霉素溶液均匀混合后加入CaCO3和柠檬酸钠溶液凝胶化后,利用微胶囊制备仪将上述混合液制备成万古霉素-海藻酸钙凝胶珠。取适量胶珠加入到配好的壳聚糖/万古霉素混合液中反应后收集微胶囊,加醋酸纤维素赋形制备成所需要的载药载体。方法:40只实验兔制作左侧股骨中段局部骨缺损模型,随机分为2组,每组20只。局部用药组于骨缺损中放入一定载药量的复合万古霉素海藻酸钠/壳聚糖缓释载体;全身用药组自兔耳缘静脉注射10%万古霉素(10mg/kg)。主要观察指标:局部用药组术后0.5,1,6,24,72h及1,2周,用高效液相色谱仪检测血清和骨组织中万古霉素浓度。全身用药组注射后10min,0.5,1,6,24,72h测定不同时间点血清、骨组织及肌肉组织中万古霉素浓度。制作局部用药组各重要脏器组织学切片以确定植入物的全身毒性反应。结果:全身用药组24h前各时间点的血药浓度均明显高于局部用药组,24h时全身用药组的血药浓度低于局部用药组;局部用药组的骨骼及肌肉组织药物浓度各时间点均显著超过全身用药组,局部用药组在2周时药物浓度仍然保持较高水平,而全身用药组在持续24h后即出现血药浓度低于最低抑菌浓度的情况。未发现全身毒性的组织学证据。结论:复合万古霉素海藻酸钠/壳聚糖缓释载体局部用药具有一定可行性及安全性,作用效果优于全身用药。

摘要：将筛选自仿刺参Apostichopus japonicus肠道的乳酸菌L-2、芽孢杆菌K-3和芽孢杆菌J-9以3种不同浓度(0、103、105cfu/mL)按正交实验设计分为9个处理的配比添加到饲料中,进行仿刺参饲养试验。经过30 d养殖后测定仿刺参肠道内蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、氧化物歧化酶和溶菌酶的活性。结果表明:添加益生菌剂可以提高仿刺参消化酶的活性,尤其是蛋白酶和淀粉酶的活性,并且对提高动物免疫功能有积极作用,其中处理6组的蛋白酶活力为对照组的5倍,淀粉酶活力是对照组的两倍,各处理间的纤维素酶活力变化不明显;处理6组的超氧化物歧化酶和溶菌酶活性在所有处理中最高;统计分析表明,处理6组为最佳配比,即乳酸菌L-2添加量为103cfu/mL,芽孢杆菌K-3添加量为105cfu/mL,芽孢杆菌J-9添加量为0。

摘要：现有研究表明由于航运业使用了大量的化石能源,已经成为港口城市空气污染最重要的来源。但是在利润最大化的驱动下,有限理性的港口企业不会自主选择绿色港口发展模式。因此,政府必须通过适当的机制设计促进港口企业进行绿色港口建设。基于这一目的,文章构建了由政府、港口企业参与的演化博弈模型,并在模型中参数化港口城市居民的行为,基于均衡分析的结果设计政府促进绿色港口建设的方式。模型的结论显示:目前的政府介入形式不是最优的选择,通过立法赋予民众监督权,对民众进行环保教育以及鼓励加快绿色港口技术的发展可以起到比政府直接介入更好的效果,即达成政府不检查而港口企业采用绿色生产模式的纳什均衡。

摘要：为研究旅游对旅游目的地的影响,将模糊综合评价的方法应用到居民旅游影响感知的研究之中,设计居民旅游影响感知的评价指标体系,采用层次分析法确定指标权重,经过聚集各指标模糊矩阵和去模糊的过程,对居民的旅游感知进行测量,并以九寨沟居民对旅游影响的感知为例对该方法给予说明。