摘要：目的 研究CPG15 mRNA和蛋白在发育期正常和单眼形觉剥夺（MD）大鼠视皮层中的表达,探讨其与视觉发育的相关性.方法 实验研究.80只健康Wistar大鼠分为正常组和MD组,根据发育的不同时限,正常组观察时间点分别为生后7、14、21、28、45 d,MD组分别为生后21、28和45 d,每个时间点10只大鼠.MD组大鼠于出生后14 d行右侧眼睑缝合制作单眼形觉剥夺模型.所有大鼠在同等环境下饲养.采用SYBRgreen Ⅰ荧光定量RT-PCR和免疫组织化学方法检测CPG15mRNA和CPG15阳性细胞数及蛋白表达的IOD值在发育期正常和MD大鼠视皮层中的表达变化.正常组和MD组间数据行单因素方差分析,同一时间点的两组数据采用成组设计的t检验进行统计学分析.结果 生后7、14、21、28、45 d时,正常组大鼠视皮层中CPG15 mRNA相对表达量分别为0.152±0.011、0.234±0.052、0.527±0.047、0.846±0.067、0.445±0.220,MD组大鼠则在生后21、28、45 d时相对表达量分别为0.412±0.015、0.501±0.019、0.381±0.030,组间比较差异均有统计学意义（F=177.52,36.93;P＜0.01）.两组大鼠视皮层中CPG15 阳性细胞数及蛋白表达的IOD值组间比较也均有统计学意义（F=26.001,12.207,76.914,58.397;P＜0.01）.CPG15 mRNA和蛋白表达的IOD值均在视觉发育关键期的中期P28和MD28达高峰.MD组与正常组大鼠视皮层中CPG15mRNA和CPG15 阳性细胞数及蛋白表达的IOD值在生后21、28、45 d比较差异均有统计学意义,MD组其表达量均明显减少.结论 发育期正常和MD大鼠视皮层中CPG15 mRNA和CPG15阳性细胞数及蛋白表达的IOD值随视觉发育呈阶段性变化,其表达与视觉经验和年龄因素相关,在视觉发育关键期呈高水平表达,单眼形觉剥夺明显影响视皮层中CPG15 mRNA和蛋白的表达,推测CPG15参与视皮层神经元的发育和成熟,它可能是参与视觉发育可塑性变化的分子基础之一.

摘要：背景:不同种类人工晶状体的材料和光学设计影响其光学特性,临床数据难以分析不同人工晶状体在眼内位移产生的人工晶状体眼调节。目的:观察不同人工晶状体种类在眼内位移过程中产生的人工晶状体眼调节变化。方法:在Zemax光学设计中构建Liou-Brennan眼模型,分别用材料和设计不同的不同种类人工晶状体替换自然晶状体,采用光线追迹原理计算人工晶状体前移产生的人工晶状体眼调节。结果与结论:随着人工晶状体前移距离增加,人工晶状体眼调节增加。丙烯酸和聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体前移产生的调节接近;凸平型和等双凸型设计人工晶状体前移产生的调节差别不显著;球面人工晶状体前移产生的调节略大于非球面人工晶状体。结果说明人工晶状体在眼内的位移引起焦点偏移,提供了一定调节,与人工晶状体眼的高阶像差、角膜的近视性散光和多焦性等因素共同构成人工晶状体眼的表观调节。人工晶状体种类对人工晶状体眼调节影响不显著。

摘要：背景已证实甲状腺相关眼病（TAO）患者常伴有干眼相关症状，并认为与眼球突出造成的泪液蒸发过快有关。但临床工作中发现多数未伴有TAO的甲状腺功能异常患者也可伴有严重的眼表炎症症状，深入研究甲状腺功能异常与眼表损害的关系对其有效的临床诊疗有重要的临床意义。目的观察无TAO的甲状腺功能异常患者的眼表功能变化，探讨甲状腺功能异常与眼表损害的关联性。方法采用前瞻性队列究设计，纳入2015年1月至2016年5月在天津医科大学第二医院初次发现甲状腺腺功能异常但不伴有TAO的患者31例，同期选择16名性别和年龄匹配的健康体检者作为对照。采集受检者周围静脉血行血清游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺激素（FT4）、促甲状腺激素（TSH）、和促甲状腺激素受体抗体（TRAb）测定，然后根据测定结果将甲状腺功能异常者分为TSH增高组（13例）和TSH降低组（18例）及TRAb阴性组（11例）和TRAb阳性组（20例），对组间患者甲状腺功能学指标、眼球突出度、基础泪液分泌试验（SIt）、泪膜破裂时间（BUT）、角膜荧光染色评分、眼表疾病指数（OSDI）评分和角膜炎症指数评分等检查结果进行比较，并分析甲状腺功能学指标结果与眼表功能相关检查结果的关系。结果甲状腺功能异常组与对照组间患者眼球突出度和sIt结果的差异无统计学意义（t=0．037，P=0．971；t=0．815，P=0．419）。甲状腺功能异常组与对照组患者的BUT值分别为（7．74±1．45）S和（10．56±1．40）s，角膜荧光染色评分分别为5．00（1．50）和2．50（2．38），OSDI评分分别为45．58±9．23和19．47±6．25，角膜炎症指数分别为0．11（0．22）和0．00（0．06），差异均有统计学意义（均P〈0．01）。TSH增高组和TSH降低组患者的眼球突出度、SIt、BUT和角膜炎症指数评分的差异无统计学意义（t=0．473，P=0．640；t=0．650，P=0．521；t=1．634，P=0．113；Z=0．270，P=0．787），TSH增高组和TSH降低组患者角膜荧光染色评分分别为4．00（1．75）和5．75（1．53），OSDI评分分别为（39．85±7．59）和（49．72±8．16），差异有统计学意义（均P〈0．01）。TRAb阴性组与TRAb阳性组间患者眼球突出度、SIt、BUT和角膜炎症指数评分的差异无统计学意义（均P〉0．05），TRAb阴性组和TRAb阳性组患者角膜荧光染色评分分别为4．00（1．50）和5．50（1．50），OSDI评分分别为39．18±6．25和46．78±8．76，差异均有统计学意义（t=2．533，P=0．017；Z=3．572，P=0．000）。角膜炎症指数评分与TSH呈正相关（R^2=0．520，P=0．000），角膜荧光染色评分、OSDI评分、角膜炎症指数评分与TRAb均呈明显正相关（R^2=0．587，P=0．000；R^2=0．329，P=0．024；R^2=0．400，P=0．005）。结论不伴有TAO的甲状腺功能异常患者存在眼表功能异常，血清TSH及TRAb异常可能影响眼表功能。

摘要：通过检测外周血AFPmRNA可确定原发性肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)表达高低与肝癌复发、转移及预后密切相关[1～3]。本文建立了一种具有内参照的定量检测AFPmRNA的竞争性RT-PCR方法,并初步对肝癌组织及癌旁组织中AFPmRNA的表达进行定量分析,现报道如下。1材料与方法1.1临床资料选取我院2002年3月～2003年1月确诊的HCC患者24例,男16例,女8例;年龄35～67岁,平均51岁。手术中切取少量新鲜的肝癌组织及癌旁肝组织,迅速放置-80℃冻存。病理均为原发性肝细胞癌。1.2肝癌、癌旁组织总RNA的提取采用异硫氰酸胍一步法提取组织中的总RNA。1.3引物设计参照文献[4],设计AFP野生型及突变内参引物序列,见表1。表1AFP野生型及突变内参引物序列1.4竞争性内参RNA的合成以肝癌组织总RNA的逆转录产物为模板,以引物对EX1/M2和M1/EX2分别扩增合成两小段产物;扩增产物纯化后混合,由于突变引物M1与M2互补,经变性、复性,产生杂合链;再经外引物对EX1/EX2扩增,生成与野生型AFP仅有一个碱基差异的内参DNA片段;制备克隆,提取质粒DNA,用R...

摘要：目的建立小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)铁过载(IO)模型,并对铁过载模型小鼠进行去铁及抗氧化治疗,探讨铁过载对小鼠BM-MSCs的损伤作用及活性氧(ROS)在该损伤中的作用机制。方法采用随机区组设计,将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、铁剂(右旋糖酐铁,25mg/ml)组(IO组)、铁剂+去铁治疗(DFX,125mg/kg)组(Fe+DFX组)、铁剂+抗氧化治疗(NAC,40mmol/L)组(Fe+NAC组),每组10只。从小鼠密质骨中分离BM-MSCs培养至P1代,检测BM-MSCs内铁颗粒、不稳定铁(LIP)及ROS水平;利用倍增时间及CCK-8试剂盒检测BM-MSCs增殖情况;采用碱性磷酸酶染色(ALP)、茜素红染色、成骨分化基因检测等方法评估BM-MSCs成骨分化能力;采用油红O染色检测BM-MSCs成脂定向分化能力。结果与对照组相比,铁剂组BM-MSCs内存在明显铁颗粒,LIP及ROS水平明显增高(P<0.05),倍增时间明显延长(2.07±0.14d vs 1.03±0.07d,P<0.01)。DFX组及NAC组倍增时间较铁剂组有所缩短,分别为1.52±0.07d与1.68±0.03d(P<0.05)。与对照组比较,铁剂组BM-MSCs矿化能力及向成骨细胞分化能力下降,成骨基因ALP、RUNX2、OSN表达增强,而成脂定向分化能力增强。在去铁及抗氧化治疗后,上述改变发生部分逆转。结论铁过载可影响小鼠骨髓MSCs的增殖及定向分化能力,其机制可能与铁过载所致ROS升高有关。

摘要：目的比较两种不同设计的一片式非球面人工晶状体（intraocular lens，IOL）植入后1个月和3个月的倾斜和偏心及全眼和眼内高阶像差成分、不同空间频率下的调制传递函数（modulation transfer function，MTF），指导临床两种非球面IOL选择。方法临床病例对照研究。选取2013年3～5月在天津市眼科医院行白内障超声乳化联合IOL植入术的单纯性老年性自内障患者80只眼，根据角膜球差，40只眼植入Tecnis ZCB00 IOL（眼力健公司）；另40只眼植入ADAPT-AOIOL（博士伦公司），分别于术后1个月和3个月行iTrace视觉功能分析仪和Pentacam眼前段分析仪检查。记录6ram瞳孔下两种IOL的全眼及眼内高阶像差成分及MTF值，采用Image-pro plus图像分析软件计算出IOL的偏心值和倾斜度。组间采用独立样本f检验、组内采用配对f检验进行分析比较，各组倾斜度和偏心值行Pearson相关分析。结果2组术后1个月和3个月倾斜和偏心均无相关性差异无统计学意义（P〉0．05）。在倾斜和偏心上，术后1个月和3个月，2组组内及组间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。术后1个月和3个月，在全眼及眼内总高阶像差、彗差和球差上，2组组内比较差异无统计学意义（P〉0．05），但2组相比在全眼及眼内总高阶像差和球差上差异有统计学意义（P值分别为0．005，0．012，0．000，0．000，0．023，0．041，0．014，0．002），P〈0．05；但在眼内彗差上2组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。在MTF上术后1个月和3个月，两组组内及组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论AO与ZCB00两种不同设计的一片式非球面IOL术后1个月和3个月均表现出良好的稳定性和居中性，在视觉质量上，ZCB00定程度上优于AO，但长远效果仍需进一步观察。

摘要：目的分析天津地区不同职业男性不育症患者精液质量状况,为男性不育症的病因研究、预防干预及生殖健康服务工作提供依据。方法对178例男性不育症患者(不育组)和70例正常生育男性(正常组),按自行设计的调查表进行问卷调查,依据世界卫生组织《人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)标准,采用伟力精液质量检测系统,对不同职业接触者的精液质量进行检测和分析。结果不育组精液量、精子浓度和前向运动力(PR)值均低于正常组(P0.05)。精子浓度和PR值在驾驶员组、室内装修工人组、厨师组、石材从业亚组和正常组间分别比较,差异均有统计学意义(P0.05)。4个不同职业亚组的精子浓度、PR值分别低于正常组(P<0.01)。结论从事驾驶员、室内装修工、厨师和石材从业职业者易引起精液质量低下,从而导致男性不育。建议采取积极的职业防护,以降低职业有害因素对男性生殖健康的影响。

摘要：目的观察不同剂量伽玛刀照射正常动物三叉神经后三叉神经体感诱发电位（TSEP）的变化特点，以进一步探讨伽玛刀照射剂量与三叉神经受照后变化的关系。方法将15只新西兰兔按随机数字表法分为60Gy照射组、80Gy照射组、100Gy照射组、120Gy照射组及对照组，每组3只。前4组采用Gamma Plan5．34剂量计划系统进行照射靶点设计及剂量规划，照射靶点置于三叉神经脑干进入区，双侧照射，中心剂量分别为60Gy、80Gy、100Gy和120Gy。在照射前及照射后6个月采用神经电检诊仪监测各组实验兔双侧TSEP的潜伏期、峰间潜伏期及波幅，详细记录监测数据并行统计学分析。结果60Gy照射组P1、N1、P2波潜伏期及P1-N1、N1-P2峰间潜伏期以及波幅在照射后6个月与对照组比较差异均无统计学意义（P〉O．05）；80Gy照射组、100Gy照射组、120Gy照射组P1、N1、P2波潜伏期及P1-N1、N1．P2峰间潜伏期以及波幅在照射后6个月与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05），且随剂量增加变化增大。结论TSEP的变化与伽玛刀照射剂量密切相关，随剂量增加变化增大，其中80Gy为三叉神经产生变化的最低剂量。

摘要：目的 明确脓毒症血小板表达Toll样受体4（TLR4）变化与血小板活化的关系及对预后的影响.方法 前瞻、对照的临床试验设计.选天津市第一中心医院ICU 2008年5月至2009年12月收治的脓毒症患者64例,除外恶性肿瘤、免疫系统疾病、心肺复苏后、终末期肝或肾功能衰竭及入院24 h内死亡等患者.门诊查体健康志愿者15例为对照组,比较健康对照组和脓毒症组入院时和第3,5,9天外周静脉血血小板计数（PC）及参数（MPV,PDW）、血小板TLR4表达、血小板活化膜糖蛋白GPIⅠb/Ⅲa的PAC-1表达、血浆sCD40L及TNF-α浓度变化及关系;脓毒症组中分为血小板减少症即TCP组（至少1次低于150×109 L-1,27例）和非TCP组（37例）,比较两组治疗前后（入院时及入院第9天）TLR4,PAC-1,sCD40L和TNF-α及APACHEⅡ评分、ICU住院时间、出血发生率以及28 d死亡率差异.基于时间测量组间数据比较采用可重复测量的单因素方差分析,两组间参数的比较采用独立样本t检验,计数资料进行x2检验.结果 与健康对照组比较,脓毒症组PC减低（P=0.006）,伴随MPV,PDW增大（P=0.046,P＜0.001）;血小板FLR4及PAC-1表达同时上调（P＜0.001）,且两种受体变化正相关;血浆中sCD40L和TNF-α浓度显著上升（P＜0.001）.TCP组PAC-1表达、TNF-α浓度治疗前后均高于非TCP组（P=0.023,P=0.011）;治疗后TCP组sCD40L、血小板TLR4表达显著高于非TCP组（P=0.047,P=0.001）.TCP组比非TCP组出血发生率高（P=0.024）、ICU住院时间长（P=0.013）、APACHEⅡ评分高（P＜0.01）、28 d病死率高（P=0.048）.结论 脓毒症患者血小板TLR4表达上调及伴随的血小板活化与脓毒症血小板减少症发病密切相关,脓毒症并发TCP可能是预后不良标志.

摘要：目的观察微小RNA（miRNA，miR）-83a表达对体外骨髓间充质干细胞（BMSC）的诱导分化和生物学功能的影响。方法将实验分为3组：A组：PEF-miR-83a和PSV2neo共转染组；B组：未转染组；C组：PEF和PSV2neo共转染组。A组为实验组，B、C两组为对照组。按照说明书进行转染，加入400 μg PmlG419筛选，经3周后形成阳性克隆，扩增培养，应用基因转录方法检测miR-83a表达对体外BMSC的抗分化作用和生物学功能的影响；通过免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）技术检测miR-83a在细胞中的表达，Real-time PCR测定转染后A549细胞中Ras、Raf、蛋白激酶B（Akt）和细胞外信号调节激酶（ERK） mRNA水平表达变化，并通过噻唑蓝（MTT）法、划痕实验、苏木素-伊红（HE）染色、显微镜等观察比较转染miR-83a的细胞的的迁移能力，诱导分化和形态学改变。结果Real-time PCR和免疫组织化学检查结果证实转染后细胞中miR-83a稳定表达；阿辛兰染色结果：培养第7天，诱导分化组细胞内充满了大量的棕色特异性染色颗粒，未诱导分化组未见特异性染色颗粒。Real-time PCR结果：A组细胞Ras、Raf、Akt mRNA相对表达量分别为0.97±0.27、0.54±0.18和0.99±0.31, B组细胞为1.79±0.36、1.70±0.33和2.06±0.42，C组细胞为1.68±0.30、1.58±0.25和1.89±0.31。和B、C组比较，A组细胞中Ras、Raf和Akt mRNA水平显著降低（t=1.531、1.838，P=0.016、0.011） 。MTT结果表明随着miR-83a与细胞效靶作用时间延长，抑制率明显增强，作用24、48、72 h后，细胞的凋亡率分别为（23.49±4.64）%、（45.73±8.72）%和（59.25±13.16）%，不同作用时间比较差异有统计学意义（χ^2=5.203、2.146，P=0.013、0.045）。划痕实验结果显示：miR-83a转染的细胞迁移能力低于正常细胞。miR-83a作用于细胞24 h后，形态学观察细胞发生凋亡或坏死。结论miR-83a转染对体外BMSC具有抑制分化和促进凋亡作用，它可能是通过抑制表皮生长因子受体（EGFR）和EGFRvⅢ信号传导通路中的RAS-RAF-丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和磷酸肌醇3激酶（PI3K）-Akt两条重要信号通路分子的活性来发挥作用。