摘要：目的分析1个脂蛋白肾小球病家系的载脂蛋白E（apolipoprotein E，apoE）基因突变。方法用盐析法提取该家系4名成员和2名正常人的外周血基因组DNA，PCR扩增apoE基因第4外显子、第3外显子以及多态性片段，扩增产物纯化后分别构建到pTA2载体中，克隆载体转化至大肠杆菌DH5α感受态中，经蓝白斑和抗菌素筛选后集菌，提取重组子质粒，EcoRⅠ酶切鉴定是否转化成功，鉴定正确的菌液行双向测序。PCR-限制性片段长度多态性检测apoE基因多态性。结果家系中先证者及其母亲和姐姐apoE基因第4外显子第484～492位9个碱基（CAAGCTGCG）缺失，为杂合缺失，其导致apoE氨基酸序列第143～145位KLR的3个氨基酸缺失。第3外显子测序未发现异常。apoE基因多态性分析结果与测序结果一致。结论该家系的脂蛋白肾小球病因可能为apoE基因第484～492位9个碱基（CAAGCTGCG）缺失。

摘要：背景：椎间盘炎概念的最初含义是化脓性感染。而实践中越来越多人开始关注其自身免疫反应因素。目的：通过手术破坏纤维环和软骨终板建立椎间盘炎的动物模型,探讨自免疫状态表达变化过程。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-06/12在天津医科大学总医院骨科生物力学实验室完成。材料：选择健康成年新西兰大耳白兔50只,雌雄不限,随机分为3组：模型组30只;设立假模型组10只及对照组10只。方法：随机取30只兔麻醉后,暴露L3~4,L4~5,L5~6椎间盘,以自制鹅头穿刺针刺入椎间盘,破坏纤维环和软骨终板建立兔腰椎间盘炎模型。假模型组同模型组取相同手术入路,暴露椎间盘但不破坏纤维环和软骨终板。模型组与假模型组分别于术后1,2,4,8,12周分批处死动物,取手术区椎间盘标本。主要观察指标：①常规苏木精-伊红染色,形态学比较及淋巴细胞的表达。②应用免疫组织化学技术和免疫荧光技术观察标本CD4阳性、CD8阳性T淋巴细胞,免疫球蛋白IgG、IgM的表达。③细菌学培养。结果：光镜下可见模型组椎间盘内、外层纤维环紊乱,失去正常结构,炎症反应以及纤维化。假模型组及对照组则无上述表现。免疫组织化学染色显示模型组CD4阳性淋巴细胞在术后1,2周取材的标本表达较多,CD8阳性淋巴细胞则在术后2,4周取材的标本表达较多。而假模型组则极少量淋巴细胞表达,对照组未见淋巴细胞表达。免疫荧光显示模型组可见手术椎间盘近边缘区免疫球蛋白IgG、IgM呈阳性反应,于1周少量表达,术后2,4,8周大量表达。假模型组及对照组均可见IgG极少量表达,未见IgM表达。细菌培养为阴性。结论：①运用前外侧入路手术破坏纤维环及软骨终板可以建立椎间盘炎动物模型。②纤维环及软骨终板受破坏后,髓核等自身抗原可与血液循环接触引发机体自身免疫反应,可表现在细胞免疫和体液免疫两方面。③自免疫反应在椎间盘炎的发病机制和病理演变过程以及症状产生过程中起重要作用。

摘要：目的：探讨专题讨论会在慢性心力衰竭患者健康教育中的应用效果。方法选取2014年1月—2015年12月收治的126例慢性心力衰竭患者为研究对象，采用随机数字表法随机分为观察组（ n＝63）和对照组（ n＝63），对照组给予口头讲解结合定期知识讲座的常规健康教育，观察组给予口头讲解结合专题讨论会的健康教育，均持续6周。比较干预前后两组自行设计的慢性心力衰竭相关知识调查问卷表和WHO生存质量测定简表（ WHOQOL-BREF）评分。结果干预前两组的基线资料、慢性心力衰竭相关知识调查问卷表和WHOQOL-BREF评分比较，差异无统计学意义（ P〉0.05）。干预后，观察组的慢性心力衰竭相关知识调查问卷表和WHOQOL-BREF评分均显著高于对照组，差异均有统计学意义（ P〈0.05）。结论与常规健康教育相比，以专题讨论会的形式开展健康教育能显著提高慢性心力衰竭患者对相关知识的认识程度，改善其生活质量。

摘要：背景:传统的组织工程导管制造方法存在复杂外形制造困难和内部空间结构无法控制的缺陷,不能满足一些微导管所要求的精确性和空间结构复杂性。目的:设计一种人工仿生脊髓导管,并研究其性能。方法:采用Solid Works制图软件建立导管数据模型,在3D打印机上生成平台扫描路径,以丝素蛋白和胶原蛋白为原料,制作人工仿生脊髓导管,检测导管的吸水率、孔隙率、力学性能及细胞相容性。将人工仿生脊髓导管置入SD大鼠背部皮下,置入后1,2,3,4周取出导管,观察导管降解情况。结果与结论:人工仿生脊髓导管的微观孔隙分布均匀,大小不等,孔径为10-240μm,孔隙率为(53.6±1.0)%,吸水膨胀率为(1 347.0±19.4)%,压缩弹性模量为(0.60±0.12)MPa;神经干细胞可在人工仿生脊髓导管孔隙中生长,呈球形或梭形,在导管表面密集生长,有些细胞伸出伪足附着在导管表面。人工仿生脊髓导管置入SD大鼠背部皮下1周后降解20%,2周后降解59%,3周时降解74%,4周后完全降解。结果表明人工仿生脊髓导管具有良好的细胞相容性及降解性。

摘要：背景:目前国内广泛使用的种植模板是在石膏模型上制作完成,由于无法明确植入区颌骨的三维结构,因此不能准确地指导种植体植入,容易导致植体植入并发症。目的:利用CT技术、计算机辅助设计/计算机辅助制作技术设计制作口腔种植模板,以准确定位种植体植入的位置和方向。方法:CT扫描带有定位标记的上颌游离缺失石膏模型。在软件MIMICS中进行三维重建和种植模拟。根据受植区颌骨的解剖结构兼顾修复学和美学的要求设计种植方案,并将虚拟种植体放置在理想的位置上。设计模板形态同时将虚拟种植体位置角度信息转移到模板上,导入快速成型设备制作树脂模板。在模型上完成种植然后评价模板的精度。结果与结论:种植体植入后顶端偏差为.(0.87±0.21)mm,底端偏差为(0.82±0.16)mm。种植体在垂直方向上的偏差较颊舌向和近远中向略大。采用此方法可以将种植前设计准确地转移到种植模板中,从而更有效地指导种植,有助于提高种植的安全性、准确性和成功率。

摘要：为了在分子水平上研究拟除虫菊酯抗性家蝇靶标抗性机制 ,根据昆虫para型钠通道Ⅱ区S4至S6及Ⅱ与Ⅲ连接区的保守区域 ,设计简并引物 ,利用降落RT PCR ,克隆拟除虫菊酯kdr (R品系 )家蝇para型钠通道 70 4bp的cDNA ,根据此序列用PrimerPremier5 0设计特异引物 ,分别扩增敏感 (SS品系 )、super kdr(RR品系 )家蝇各 6 5 1bp的cDNA。结果SS无有义突变 ,R和RR在ⅡS6CTT到TTT的替换导致Leu 10 14到Phe的保守性突变 ,RR在ⅡS 4～ 5细胞内片段接头处没有与超 -kdr抗性相关的Met到Thr突变 ;另外首次发现kdr (R品系 )家蝇在Ⅱ与Ⅲ连接区出现 39bp的选择性剪接 ,构成家蝇para钠通道亚型 (命名为xych ,GenBank登陆号为AF4 114 5 2 )。

摘要：目的 分析天津市区孕妇孕期和产后抑郁筛查结果及筛查阳性的危险因素。方法 2010年9月至2013年5月在天津市中心城区64个社区卫生服务中心早孕检查的孕妇于早孕期填写自行设计的孕期调查问卷，并采用抑郁自评量表（Self-rating Depression Scale，SDS）进行抑郁筛查。孕28-32周再次采用SDS进行筛查。产后14-28 d填写自行设计的产后随访问卷，并采用爱丁堡产后抑郁自评量表（Edingburgh Postpartum Depression Scale，EPDS）筛查产后抑郁。SDS评分〉53分、EPDS评分〉9分为筛查阳性。SDS评分≥60分或EPDS评分≥13分的孕产妇建议接受专业的心理干预。采用χ^2及趋势χ^2检验、两独立样本t检验和Logistic回归分析筛查阳性的影响因素。结果 4 389例孕妇完成调查问卷和量表筛查，早孕期、晚孕期和产后抑郁筛查阳性率分别为19.9%（875/4 389）、9.8%（431/4 389）和7.2%（317/4 389）。孕期2次筛查阴性组、孕期1次筛查阳性组、孕期2次筛查阳性组产后抑郁筛查阳性率逐渐上升，分别为6.0%（199/3 313）、10.0%（85/846）和14.3%（33/230），χ^2趋势=33.484，P=0.000。孕期2次抑郁筛查均为阳性的孕妇占5.2%（230/4 389），其危险因素分别为家族遗传病史（OR=4.002，95%CI：1.201-13.333）、近1年发生与人际关系有关的负性生活事件（OR=3.013，95%CI：1.691-5.370）、初中及以下受教育程度（OR=2.733，95%CI：1.542-4.842）、孕期被动吸烟≥3 d/周（每天≥15 min）（OR=1.930，95%CI：1.351-2.757）、早孕期体重指数〈18.5（OR=1.792，95%CI：1.209-2.655）、近1年发生与工作有关的负性生活事件（OR=1.656，95%CI：1.055-2.599）、近1年住房装修（OR=1.638，95%CI：1.213-2.212）、年龄〈25岁（OR=1.612，95%CI：1.031-2.520）和异常妊娠史（OR=1.357，95%CI：1.013-1.818）；保护因素是本科及以上受教育程度（OR=0.731，95%CI：0.539-0.991）和轻体力劳动（OR=0.682，95%CI：0.511-0.910）；P值均〈0.05。以孕期2次筛查均阴性为对照组，2次筛查均阳性组、1次筛查阳性组产后抑郁筛查阳性的校正OR值（95%CI）分别为2.467（1.615-3.768）和1.721（1.265-2.343）。结论 孕期抑郁筛查阳性是产后抑郁筛查阳性的危险因素，尤其是孕期2次筛查均阳性。围产保健应重视心理问题的纵向跟踪。

摘要：研究一种新型非融合人工椎体(AVB)的疲劳寿命,为投入临床应用提供参考.利用AVB样件进行疲劳试验,采用500万次2 Hz 0.3 k N的正弦轴向压力对其进行疲劳实验,观察其疲劳特性,实验前后清洗AVB,用电子称来检测其机械磨损量,在Workbench中对人工椎体模型进行受力分析与疲劳分析,然后将仿真结果与实验结果对比.结果显示:由钛合金与医用硅胶组装而成的AVB的结构合理,在200~300万次疲劳试验后,力学性能趋于稳定,500万次疲劳试验后,没有出现裂纹破坏等失效,机械磨损量小,应力远低于其屈服强度;有限元仿真显示其有较高的疲劳寿命.研究认为,此非融合AVB结构合理,能够满足长期植入人体的设计要求.

摘要：目的构建原核表达PAPP-A重组蛋白,并对蛋白质进行纯化。方法根据DNAstar软件分析获得的编码PAPP-A特异抗原表位,利用Primer Premier 5.0软件设计引物,以PAPP-A c DNA-质粒转化菌液为模板,进行PCR扩增。PAPP-A的DNA和p ET42a质粒分别双酶切,经琼脂糖凝胶电泳及胶回收后进行连接反应,转化至大肠埃希菌Top10,筛选阳性克隆经测序鉴定正确后,转化至大肠埃希菌BL21,诱导产生PAPP-A重组蛋白,利用镍柱初步纯化及离子交换层析柱进一步纯化,用SDS-PAGE及DEAE层析鉴定重组抗原蛋白。结果筛选出抗原表位集中区,在大肠埃希菌BL21中高效表达了重组的PAPP-A蛋白,经过镍柱及离子交换层析纯化后,PAPP-A浓度为0.22 g/L,DEAE层析分析证实其纯度较高。结论成功筛选出PAPP-A的抗原表位集中区,并制备了重组抗原蛋白,为PAPP-A的后续临床研究提供依据。

摘要：目的构建一种高效"沉默"碱性成纤维细胞生长因子的小干扰RNA重组腺病毒载体,并为该载体在基因研究中提供相关资料。方法设计、合成优选的靶向bFGF特异性siRNA序列。采用限制性内切酶消化和T4 DNA连接酶连接的方法,将bFGF-siRNA序列克隆至腺病毒穿梭质粒pGStrack上,然后将重组穿梭质粒pGStrack-bFGF-siRNA和腺病毒骨架质粒pGSadeno体外LR位点进行特异性重组,将bFGF-siRNA基因转移至腺病毒骨架质粒pGSadeno上,最后重组骨架质粒pGSadeno-bFGF-siRNA。鉴定正确后经Pac Ⅰ酶切,转染HEK 293细胞,包装成重组腺病毒rAd5-bFGF-siRNA。同时在HEK 293细胞中进行病毒扩增,利用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,用微量全细胞病变法检测腺病毒滴度,用Western blot方法验证所构建载体作用效果。结果 PCR鉴定重组腺病毒rAd5-bFGF-siRNA构建成功;扩增后检测腺病毒滴度约为5×108 PFU/ml,Western blot结果显示目的基因蛋白沉默效率大于90%。结论应用LR重组法能成功构建携带靶向bFGF基因的siRNA重组腺病毒,该载体转染胶质瘤U251细胞株后目的基因蛋白沉默效率较高,为进一步的相关研究奠定可靠的基础。