摘要：枸杞是茄科枸杞属的重要经济植物,广泛分布于我国西北地区,环境适应性强。本研究分析了枸杞基因组中SSR的分布特征,并基于宁杞1号全长转录组开发SSR分子标记,对28个枸杞种质进行遗传多样性分析和亲缘关系分析。用MISA软件搜索全长转录组中SSR位点,设计并筛选多态性好的SSR引物,对206对引物经过毛细管电泳筛选后最终选出23对引物对28个不同分布区的枸杞种质进行遗传多样性分析,遗传相似系数用非加权组平均法(UPGMA)聚类。23对引物共扩增得到240个等位基因,每个位点的等位基因数范围为4~17,Shannon信息指数范围为1.177~2.487,期望杂合度和观测杂合度的范围分别为0.635~0.909和0.250~0.964,PIC的范围是0.580~0.902。遗传距离聚类分析显示28份枸杞种质在遗传相似系数为0.71时被分为4类,宁夏枸杞为Ⅰ类,中国枸杞为Ⅱ类,黑果枸杞为Ⅲ类,Ⅳ类中只有中国枸杞种的枸杞岛种质。利用全长转录组序列可以高质量实现枸杞SSR标记开发,新开发的23对引物后续可用于枸杞种质遗传多样性分析和分子标记辅助育种工作。

摘要：为了研究株距和行距对宁夏干旱区苜蓿种子产量及构成因素的影响,以苜蓿品种“甘农4号”(Medicago sativa *** No.4)作为试验材料,于2017~2020年连续4年采用再裂区试验设计,主区为行距(60、80和100 cm),裂区为株距(15、25和35 cm),再裂区为生长年份(2017、2018、2019和2020年),运用PCA主成分分析进行综合评价,确定苜蓿最优的株行距配比。结果表明,随着株距和行距的增加,苜蓿单株种子产量呈增加趋势。行距对每花序小花数、单株花序数、每荚种子数、单株种子产量以及单位面积种子产量均有极显著影响(P<0.01);株距对单株花序数、生殖枝数和每荚种子数以及单株和单位面积种子产量均有极显著影响(P<0.01);生长年份对产量构成因素及种子产量均有极显著影响;行距和株距相互作用对种子产量及其构成因素有显著或极显著作用;经通径分析得出,影响种子产量的主要因素是每花序结荚数、单株花序数和千粒重以及每荚种子数。回归最优模型得出,行距为100 cm,株距为35 cm时,单株种子产量最高,为27.910 kg/hm^(2),株距为15 cm,行距为100 cm时,单位面积种子产量最高,为1545.088 kg/hm^(2)。因此,宁夏干旱区进行苜蓿种子生产时,株距15 cm,行距为100 cm为最佳配比。

摘要：本研究以小麦淀粉分支酶(starch branching enzyme, SBEIIa)为研究对象,选取SBEIIa基因外显子5’端的第一及第二个外显子区域的4个SBEIIa-gRNA参试靶点进行靶位点活性检测,确定最佳基因敲除靶点。采用试剂盒法,以选定基因敲除靶点序列设计gRNA引物,通过oligo二聚体(Oligoduplex)合成、oligo二聚体插入载体、转化及鉴定等步骤,构建具有表达小麦淀粉分支酶gRNA (guide RNA)的CRISPR/Cas9基因敲除系统,获得小麦淀粉分支酶基因敲除载体。根据载体中插入序列,进行测序分析;测序结果能够确认gRNA已经完整准确地连入载体。研究构建的小麦淀粉分支酶基因敲除载体能对小麦SBEIIa基因表达量进行负向调控,对后续小麦淀粉分支酶基因及向其它相关基因编辑调控研究提供科学依据。

摘要：为分析无芒雀麦(Bromus inermis)遗传多样性及对其进行分子标记开发利用,采用正交设计建立SSR-PCR扩增最优体系,通过多态性、相似系数和聚类等分析方法对16份无芒雀麦种质材料的遗传多样性进行分析,结果表明:无芒雀麦SSR-PCR扩增最佳反应体系为:DNA 15 ng,Mg^(2+)3 mmol/L,dNTPs 0.25mmol/L,引物0.2μmol/L,Taq酶1 U。通过最佳体系从22对引物中筛选出6对引物,并对其进行扩增,共扩增出57条谱带,全部为多态性。材料间的遗传相似系数的变化范围为0.438~0.877,Nei’s基因多样性指数(h^(*))平均为0.3488,Shannon’s信息指数(I^(*))平均为0.5273,聚类分析将16份种质材料分为4个类群。无芒雀麦种质资源遗传多样性丰富,本研究建立的无芒雀麦SSR-PCR反应体系稳定可靠,可为无芒雀麦物种亲缘关系鉴定和分子遗传育种等提供科学参考。

摘要：为了探究影响哺乳动物毛色的黑色素皮质受体-1基因(MC1R)和转录因子25基因(TCF25)与滩羊毛色的关系,本研究利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术,对15只不同毛色滩羊(纯白、褐斑、黑斑)皮肤组织中MC1R基因和TCF25基因的mRNA表达量进行研究。结果显示,MC1R基因和TCF25基因在3种不同毛色滩羊中均有表达。MC1R基因在不同毛色滩羊皮肤组织中表达量为黑斑>褐斑>纯白,其中黑斑组极显著高于纯白组(P褐斑>黑斑,组间差异不显著(P>0.05)。试验表明了目的基因表达量与滩羊毛色间的关系,为今后滩羊毛色选育与品种改良提供参考。

摘要：【目的】探明粳型优势生态型水稻中各品种(系)在Rf1a基因位点的差异,为粳型杂种优势群的利用提供基础数据。【方法】利用缺失设计引物Rfa-7F/Rfa-7R在粳稻恢复系中可扩增出957bp的片段,在保持系中可扩增出383bp的片段,对日本粳、台湾粳、韩国粳、巴西稻、美国粳、非洲IRAT粳、华北粳、非洲ITA粳、西北粳、东北粳、欧洲粳11个不同生态类型共60份材料进行PCR扩增检测。【结果】有14份材料是Rf1a/Rf1a基因类型,占所有材料的23%;日本粳、台湾粳、华北粳、西北粳和东北粳的所有材料是rf1a/rf1a基因类型,韩国粳、非洲ITA粳和欧洲粳有小部分材料是Rf1a/Rf1a基因类型,巴西粳、美国粳和非洲IRAT的大部分是Rf1a/Rf1a基因类型。【结论】粳型生态型水稻在Rf1a基因位点的差异,可以用引物Rfa-7F/Rfa-7R检测出不同基因类型,为粳型杂种优势群利用提供依据。

摘要：为了研究日粮不同蛋白水平下钙蛋白系统基因在滩羊肌肉组织的表达差异,采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)方法,根据GenBank已发表钙蛋白酶1(calpain 1)基因CAPN1、钙蛋白酶2(calpain 2)基因CAPN2和钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)基因CAST的序列设计特异性引物,以滩羊肌肉组织总RNA为模板,分析了CAPN1、CAPN2和CAST基因在滩羊背最长肌的基因表达水平。结果发现CAPN1和CAPN2基因在高蛋白组中上调表达,qPCR扩增中CAST基因没有明显的扩增曲线,CAST基因的表达没有检测到。基因表达水平与肌肉剪切力值相关性分析表明,CAPN1、CAPN2与剪切力值均显著负相关(P<0.05),相关系数分别为-0.864和-0.896。

摘要：本研究以宁薯4号叶、根和匍匐茎茎尖为材料构建链特异性文库进行转录组测序并对测序数据重新拼接。应用SSR检索软件从74.8 Mb测序数据中(51 006 Unigenes)发掘到1 867个SSR位点,平均发生频率为1/41 kb。重复基序中以三核苷酸、六核苷酸和二核苷酸为主,分别占总SSR位点数的58.2%、12.8%和10.7%;56种三核苷酸重复基序中以(GAA/TTC)n为主,占总SSR重复基序比例的4.1%;160种六核苷酸重复基序中以(AGCCAC/GTGGCT)n、(AGATGA/TCATCT)n、(GCAGGT/ACCTGC)n、(AAACCC/GGGTTT)n和(GGTGGA/TCCACC)n为主,分别占总SSR重复基序比例的0.2%。对1 867个SSR位点序列设计了1 692对EST-SSR引物,从中抽取100对引物进行有效性和多态性验证。结果表明,76对(76%)引物能扩增出预期目标片段;40对能扩增出目标片段的EST-SSR引物中有19对引物在分析47份马铃薯种质资源遗传多样性中表现出多态性差异,多态性引物比例为47.5%;共检测到80个等位基因,平均每对引物检测到4.2个等位基因;多态性信息含量(PIC)值变化在0.343~0.819之间,平均为0.658,属于高多态位点。本研究可为分析马铃薯种质资源遗传结构、构建精细遗传图谱、克隆定位功能基因和分子标记辅助育种等研究提供了标记基础。

摘要：由于CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)系统具有多功能基因编辑工具,研究人员能更精确、简便地编辑特定基因组元件.CRISPR技术可对特定位点的DNA或RNA序列进行识别和切割.由于DNA链断裂会启动细胞修复程序,结合CRISPR技术导致靶位点处可设计的基因插入、敲除或替换等.对CRISPR系统的分类进行简介,对CRISPR技术在医学、农业、畜牧领域及高通量筛选领域中的应用进行综述.

摘要：进一步鉴定现有水稻材料的耐盐性,为水稻耐盐育种提供种质资源和耐盐亲本。以通过花粉管通道技术获得的耐盐品系和当地水稻育成品种共21份为试验材料,评价各材料在盐胁迫下发芽期和苗期的耐盐性。结果表明:在150 mmol/L NaCl处理下,各材料发芽率及芽的生长均受到不同程度抑制,其中,材料D-1,D-3,D-4,D-7,D-13‘,长白10号’‘,节9’和‘D10’在盐处理下的发芽率较高,相对盐害率较低,耐盐性均表现为极强,耐盐级别为1级,芽长盐处理(T)与非盐处理(CK)的比值较高,说明其受到盐的抑制较小,芽期耐盐能力较强;用100 mmol/L NaCl对各材料幼苗处理8天后,材料‘长白10号’、D-10、‘节10’、D-13、‘天井4号’、D-14、D-11、D-2、‘D10’和D-8的相对死叶率较低,盐处理地上部和地下部含水量与未用盐处理的相比下降幅度较小,可溶性糖积累量较多,说明其渗透调节能力较强,属于苗期较耐盐的材料。