摘要：通过人工合成猪附红细胞体MSG1基因的编码序列,以提高目的基因在大肠杆菌中的高效表达。根据Gen-Bank注册的AM407404的544～942氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了12条寡核苷酸片段。用重叠区扩增法(PAS)全基因合成MSG1部分目的基因,克隆入pjet1.2/blunt载体。经测序证实正确后,构建原核表达载体pET-28c/MSG1,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,获得含重组表达质粒的转化子,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE分析。测序、酶切鉴定等结果表明,表达载体构建成功,诱导表达后大约在16000的位置出现明显的蛋白条带。

摘要：通过重叠区扩增法(PCR-based accurate synthesis,PAS)人工合成猪附红细胞体ORF2基因,并使其在大肠杆菌(DE3)中高效表达。根据GenBank注册的AJ504999的ORF2基因序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成11对寡核苷酸片段,用PAS方法,人工合成ORF2基因。基因克隆入pMD18-T载体,经测序证实正确后,连接到表达载体PET-28a,获得重组表达质粒PET-28a/ORF2,导入大肠杆菌BL21(DE3),在37℃,IPTG终浓度1mmol/L的条件下诱导表达,经SDS-PAGE分析,Western-blot鉴定,在35 000附近出现目的片段。同时通过生物信息学软件对其蛋白二级结构及抗原表位等方面进行预测。

摘要：为确定最优的盾构分体始发方案,以济南R1线王府庄站—大杨庄站区间风井为工程背景,研究了3种不同风井长度时盾构机分体始发方案,并分析了各方案的优缺点;从施工工效和经济成本两方面进行综合比选,认为83m分体始发方案具有最好的综合效益。研究结论可为类似工程提供参考和借鉴。

摘要：系统总结了地下工程预制装配式结构在国内外的应用和发展现状,着重介绍了地铁工程中预制装配式结构的应用;分析了预制装配式结构在地下工程应用中面临的设计计算理论不成熟、构件形式选择及划分考虑不全面、接头构造受力不明确、结构防水性能和抗震措施不完善等主要问题,并论述了目前的研究进展;最后从新型机械设备和新材料的研发,施工工艺以及组合形式等方面探讨了预制装配式结构的发展前景和方向,以期为推动地下工程产业化进程,促进地下工程一体化、绿色化施工提供一定借鉴。