摘要：目的研究氧化锆不同设计和饰/釉瓷烧结对种植全瓷冠内部和边缘适合性的影响。方法采用Cercon计算机辅助设计及制作(CAD/CAM)系统制作3组黏结固位氧化锆种植全瓷冠,每组8颗(n=8)。A组(常规氧化锆烤瓷全冠组):常规边缘氧化锆基底冠+饰瓷,B组(360°氧化锆颈环烤瓷全冠组):360°氧化锆颈环冠边缘基底冠+饰瓷,C组(全解剖式氧化锆全冠组):解剖形态氧化锆全冠+釉瓷。饰/釉瓷烧结前和烧结后采用硅橡胶分别复制氧化锆基底冠、氧化锆全瓷冠在基台就位后的内部及边缘间隙,Micro-CT扫描硅橡胶获得内部及边缘间隙图像,测量基底冠、氧化锆全瓷冠边缘垂直间隙(MG)、冠边缘水平间隙(HMD)、肩台区间隙(CA)、轴面中点间隙(AW)、轴面和面交界处间隙(AOT)。采用SPSS 17.0软件对测量结果进行统计学分析。结果不论饰/釉瓷烧结前还是烧结后,A组HMD均大于B组和C组(P0.05),A、B、C三组间MG、CA、AW、AOT均无统计学差异(P>0.05)。饰/釉瓷烧结后,A组MG较烧结前明显减小(P0.05)。结论 360°氧化锆颈环烤瓷全冠和全解剖式氧化锆全冠的边缘适合性优于常规氧化锆烤瓷全冠,饰瓷烧结对常规氧化锆烤瓷全冠垂直间隙的影响最明显。

摘要：目的　利用寡核苷酸芯片平行分析乙肝病毒表面抗原区S、前核心抗原pre C区、X区、聚合酶P区 12个已知的突变位点。方法　针对S、pre C、X、P区的 12个突变位点 ,设计位于乙肝病毒反义链的 2 4条寡核苷酸探针和两对PCR引物 ,探针长度为 14～ 18bp ,其 5′端连有氨基己烷和T15间隔子 ,合成后经点样仪点到醛基化玻片上。两对PCR引物分别用于扩增S与P区内的 5个突变位点和X、前C区内的 7个突变位点 ,其中上游引物含有荧光标记。不对称PCR扩增所得到的荧光标记的单链DNA与寡核苷酸阵列杂交、清洗后经扫描分析实验结果。结果　在对 12个乙肝阳性样品前核心抗原C和X区的突变检测中 ,存在 176 2A→T ,176 4G→A联合突变的有 2例、1896G→A突变的 3例、同时存在 176 2A→T、176 4G→A联合突变和 1896G→A突变的 1例、未存在任何突变的样品 6例。在 12个乙肝阳性样品的表面抗原S的突变检测中 ,未发现有突变出现。部分样品的随机测序结果与寡核苷酸阵列杂交结果一致。结论　寡核苷酸芯片适于快速、平行。

摘要：目的研究氧化锆和纯钛基底冠材料及饰瓷烧结对种植全冠内部和边缘适合性的影响。方法制作计算机辅助设计/计算机辅助制作(CAD/CAM)氧化锆烤瓷种植全冠(A组)和纯钛烤瓷种植全冠(B组)各8个(n=8)。分别用硅橡胶轻体复制饰瓷烧结前基底冠和饰瓷烧结后全冠的内部和边缘间隙,采用Micro-CT扫描硅橡胶,建立三维图像,测量冠边缘垂直间隙(MG)、冠边缘水平间隙(HMD)和冠内部轴面中点间隙(AW)。采用SPSS17.0软件对测量结果进行统计学分析。结果饰瓷烧结前,A组基底冠MG、HMD和AW均大于B组(P0.05)。饰瓷烧结使A组MG减小(P0.05)。结论氧化锆烤瓷种植全冠边缘适合性优于纯钛烤瓷种植全冠;饰瓷烧结对氧化锆和纯钛烤瓷种植全冠适合性均会产生影响。

摘要：目的建立快速检测脑脊液标本中常见病原菌的微型寡核苷酸芯片。方法根据脑脊液中常见病原菌16S rRNA基因序列设计通用引物和检测探针;探针固定于尼龙膜上制成寡核苷酸芯片;通用引物扩增病原菌DNA并标记生物素,产物与芯片进行反向杂交检测;对该体系的敏感性和特异性进行了测试,并检测了32例临床病原菌感染的脑脊液标本。结果所有实验菌株均只与芯片上相应探针杂交。该法最低可检测出10 CFU/ml的大肠埃希菌;32例临床本的检测结果与常规鉴定法完全一致。结论该寡核苷酸芯片法能够准确、敏感、快速地检测脑脊液标本中的病原菌。

摘要：目的:利用pEGFP质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA表达的质粒,筛选有效的抑制序列后,研究其对HSC-T6中TGF-β1、CTGF及细胞外基质表达的影响。方法:1.分别设计3对针对CTGF的有小发夹结构的两条DNA序列及1对非特异对照序列,构建重组体成功后转染HSC-T6,24h后通过RT-PCR及Western blotting分析HSC-T6 CTGFmRNA及蛋白表达水平,筛选出有效抑制CTGF表达的序列。2.将已构建并筛选出有最高抑制效率的pEGFP-CTGFshRNA转染HSC-T6,培养24、48h后用RT-PCR和/或Westernblotting检测各组细胞中TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因的表达;放免法分析细胞上清液中Ⅲ型前胶原、IV型胶原、透明质酸和层黏连蛋白的含量。结果:将构建成功的3组pEGFP-CTGFshRNA转染肝星状细胞后,筛选出两组能高效抑制CTGF表达的序列;pEGFP-CTGFshRNA能明显抑制HSC-T6CTGF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达,降低上清液中Ⅲ型前胶原、IV型胶原、透明质酸和层黏连蛋白的含量(P<0.01或P<0.05),而对TGF-β1的基因表达则无影响。结论:pEGFP-CTGFshRNA能高效抑制肝星状细胞中CTGF及细胞外基质的表达;CTG-FshRNA介导的RNA干扰有望对慢性肝病所致肝纤维化具有治疗潜力。

摘要：目的探讨电磁导航系统在辅助显微手术切除颅内不同位置海绵状血管瘤中的价值。方法采用电磁导航系统辅助显微手术切除颅内不同位置海绵状血管瘤，43例患者47个海绵状血管瘤，3例为多发海绵状血管瘤，其中1例3个，另2例2个；包括大脑皮层深部25个（包括小脑深部4个），大脑皮层浅部20个，眶尖2个。本组47个血管瘤中中央区深部4个，语言中枢深部4个，枕叶视觉中枢深部2个。结果本组43例患者47个海绵状血管瘤，定位准确性100％，手术全切率为100％，其中18个用小直切口切除病灶。术后神经功能障碍无加重病例，无死亡病例，术后发生正常灌注压突破出血1例，经保守治疗后治愈；30例术后1周内出院，34例术中出量少于50ml。术中导航注册的精确度为（1．6±0．4）mm。结论电磁导航系统术前可以帮助设计手术切口及手术入路；术中可以实时指导术者操作，准确切除病变同时避开脑功能区，保护正常脑组织，减少术后并发症。电磁导航系统特别适合颅内海绵状血管瘤的微创手术切除。

摘要：目的:利用pEGFP质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达的质粒.方法:分别设计3对有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆至带有U6启动子的质粒载体pEGFP中,构建重组体,转化DH5α菌株,提取质粒行酶切鉴定后,进行测序分析.结果:CTGF的sRNA片段被成功克隆到pEGFP质粒载体中,3个重组质粒shRNA编码序列与设计的片段完全一致,经酶切与测序证实构建成功.结论:成功构建了能表达CTGFshRNA的重组体,为下一步探索肝纤维化基因治疗的新途径打好基础.

摘要：背景:移植气管再血管化是气管移植外科需要解决的首要问题。目的:观察同种异体气管移植后长段气管再血管化过程中气管软骨支架的生长情况,以实现长段气管的在血管化。设计、时间及地点:动物实验观察,于2007-06/2008-06在山东省胸科医院胸外科完成。材料:健康新西兰兔20只,由山东大学医学院实验动物中心提供,随机抽取10只家兔做供体,剩余10只家兔作为受体。方法:将同种异体供体家兔气管去除气管黏膜及膜部平滑肌,形成仅余气管软骨及部分环状韧带的气管支架,在气管软骨环之间将环状韧带剪开或密集打孔,使气管软骨支架裂隙化或网孔化,但要保留气管软骨环两端及正中部环状韧带,以保持气管软骨支架的完整连接状态。受体游离并切取带血管蒂的空肠,其长度略长于备用供体的软骨支架的长度,将大网膜环绕贴附于备用供体的气管软骨环外面充当外膜。将构建好的模拟气管置于腹腔中。主要观察指标:气管外膜的网膜及气管软骨的生长情况。结果:2周后打开腹腔,大体及病理切片观察:重建的气管替代物管腔无塌陷,按压管壁弹性良好,夹裹气管软骨的肠黏膜与大网膜血运好,异体气管软骨无坏死及吸收。结论:实验在受体腹腔内成功完成了一期气管替代物重建,实现了同种异体气管移植长段气管的再血管化。受体带蒂肠黏膜、大网膜夹裹供体网孔化或裂隙化的气管支架使移植体不再受长度的限制,是实现长段气管再血管化的关键。

摘要：目的:利用Pgenesil-1质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA表达的质粒,并筛选有效的抑制序列。方法:分别设计3对有小发夹结构的两条DNA序列及1对非特异对照序列,经退火成互补双链,再克隆至带有U6启动子的质粒载体Pgenesil-1中,构建重组体,转化DH5α菌株,提取质粒行酶切鉴定后,进行测序分析。将构建成功的4组重组体转染HSC-T6 24 h后,通过半定量RT-PCR分析HSC-T6 CTGFmRNA的表达水平,与空白对照及仅加转染试剂组比较分析。结果:CTGF的shR-NA片段被成功克隆到Pgenesil-1质粒载体中,经酶切与测序证实构建成功,转染HSC-T6 24 h后,与空白对照组相比,通过半定量RT-PCR分析发现有两组细胞CTGFmRNA水平明显下降,24 h抑制效率分别为(74±5)%,(P<0.01);(61±3)%,(P<0.05)。转染非特异shRNA组及仅加转染试剂组CTGFmRNA表达水平无明显变化。结论:成功构建了能表达CTGFshRNA的3组重组体,并筛选出能高效抑制CTGF表达的shRNA序列,为进一步探索肝纤维化基因治疗的新途径奠定了实验基础。

摘要：器官培养法保存角膜是角膜供体材料保存的主要方法之一,已在欧美国家许多眼库广泛应用[1-3].传统的保存方法是利用缝线连接角膜片和硅胶瓶盖,使角膜片悬垂在100 ml输液玻璃瓶中[4](图1).此法存在操作复杂、易污染及保存期间不能动态观察角膜质量等缺点.本研究采用新设计的角膜培养瓶,对角膜进行培养保存,取得了良好的效果。