摘要：本研究采用改良的CTAB法提取元宝枫基因组DNA,并使用L16(45)正交试验设计。通过5因素4水平实验,筛选Taq DNA聚合酶、dNTPs、引物浓度、Mg2+、模板DNA浓度及其用量,建立并优化元宝枫(Acer truncatum)的最佳SSR-PCR反应体系,即总体积20μL,Taq DNA聚合酶、dNTPs、引物、Mg2+和模板DNA浓度分别为1 U/20μL、0.2 mmol/L、0.6 mmol/L、1.25 mmol/L和75 ng/20μL。扩增实验结果表明,该反应体系稳定性较好,可重复性高,具有较好的分辨率。可从59对引物中筛选出14对适用于元宝枫并具有较明显的多态性的SSR引物,为进一步研究元宝枫的分子标记辅助育种、SSR遗传多样性分析和遗传图谱构建提供了良好的基础。

摘要：为了确定毛梾SSR-PCR最佳的反应体系,本研究采用L16(45)正交设计试验方法对毛梾SSR-PCR反应体系的各影响因素进行了优化筛选,利用改良CTAB法提取毛梾叶片基因组DNA为模板,对模板DNA、dNTPs、Mg^2+、引物、Taq DNA聚合酶5个因素的用量进行了4个水平的优化筛选试验。结果显示,适用于毛梾的SSR-PCR最佳反应体系为:总体系20μL,dNTPs浓度0.25 mmol/L,Mg^2+浓度1.25 mmol/L,模板DNA用量为75 ng,Taq DNA聚合酶1 U/20μL,引物浓度为0.5 mmol/L。利用优化后的反应体系对毛梾SSR引物进行筛选,可从34对引物中筛选出9对具有多态性的SSR引物,进一步验证了毛梾SSR-PCR反应体系具有较好的稳定性和可重复性。本研究为毛梾的种质资源分析、分子标记辅助育种、遗传多样性分析等方面的进一步研究提供了技术支持。

摘要：为探究球毛壳ND35微生物菌剂对楸树幼苗生长及土壤肥力的作用机制,本研究楸树幼苗为研究对象,采用室内盆栽试验,设计0(CK),10(T1),15(T2),20(T3)4种微生物菌剂施用量,测定幼苗生长情况、土壤微生物组成结构、土壤酶和土壤养分等特征。研究结果如下:(1)球毛壳ND35微生物菌剂可显著促进楸树幼苗的生长,株高、地径、地上及地下生物量显著提高(P<0.05),T2处理下促生效果最好。(2)施用球毛壳ND35微生物菌剂可显著提高土壤中有机质、硝态氮、铵态氮含量及脲酶、磷酸酶、蔗糖酶活性(P<0.05)。(3)球毛壳ND35微生物菌剂可显著影响土壤细菌群落组成,提高细菌群落的丰富度和多样性,使土壤中β-变形菌纲(Betaproteobacteria)、γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)的相对丰度显著下降,α-变形菌纲(Alphaproteobacteria)、δ-变形菌纲(Deltaproteobacteria)的相对丰度呈显著提高,可使土壤中鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)的相对丰度显著提高21.88%—103.56%(P<0.05),芽孢杆菌属(Bacillus)的相对丰度提高66.28%—65.97%(P<0.05),酸杆菌属(Acidibacter)的相对丰度提高12.76%—38.06%。(4)冗余分析(RDA)结果表明,土壤硝态氮、铵态氮、有机质是影响土壤细菌群落分布和多样性的重要环境因子,土壤细菌群落结构的改变会显著影响土壤脲酶、蔗糖酶、碱性磷酸酶的活性。因此,施用球毛壳ND35微生物菌剂可通过影响植物根际土壤的化学性质及生物性质,促进楸树幼苗的生长。这一研究结果为楸树繁育提供了新的指导方向,亦为将其用于困难立地及退化生态系统植被恢复提供基础理论指导。