摘要：背景：进行一些以心肌细胞学为基础的检测技术，首先必需采用心肌细胞分离方法提取心肌细胞，由于使用器械的限制或分离方法的缺陷，往往提取不到足够数量和高质量的心肌细胞。采用超低温液氮保存的成年大鼠心室肌细胞分离法是解决这一技术问题有效的方法之一。 目的：探讨成年大鼠心室肌细胞超低温液氮保存分离法制备心肌细胞悬液的可行性。 设计：以实验动物为观察对象的心室肌细胞分离方法。 单位：广州中医药大学第一附属医院心内科和广州医学院第二附属医院中医科。 材料：实验于2001-10／2002-04在广州中医药大学第一附属医院内科实验室及细胞分子生物技术实验室完成。选用200～220g SD大鼠30只；Krebs-Henseleit缓冲液(pH7．4)：NaCl 118mmol，L，KCl4．8mmol／L，MgSO_41．2mmol／L，KH_2PO_4 1．2 mmol／L，NaHCO_3 25 mmol／L，Glucose 11 mmol／L。 方法：麻醉大鼠开胸后，迅速取出心脏，置于冷Krebs-Henseleit液中，洗去残存的血液，弃去大血管、心房和右心室，将左心室肌剪成两块，然后置于含600mL／L甘油的DMEM的冻存管中，程序冷冻，即4℃30min，-20℃30min，-80℃30min，最后保存于-196℃的液氮中备用。分离心肌细胞时，从液氮中取出冻存的左心室肌，迅速放入40℃水浴中解冻；用DMEM清洗心脏；将左心室肌剪碎成1mm^3的小块，于冷Krebs-Henseleit液中吹打10min，以分离心室肌细胞；将含心肌细胞的悬液用100目网筛过滤，800r／min，离心5min。弃上清，0．1mol／L磷酸盐缓冲液清洗沉淀2次，800r／min离心5min；必要时可再次吹打左心室肌碎片以获得更多的左心室肌细胞；将沉淀轻轻加入40g／L的Ficoll上，400r／min离心4min，弃上清，沉淀即为高纯度的杆状的心肌细胞。 主要观察指标：是否分离出高纯度的符合质量的心肌细胞。 结果：采用成年大鼠心室肌细胞超低温液氮保存分离法，成功地分离出足够数量符合质量的杆状心肌细胞。 结论：运用液氮冻存的大鼠心室肌来分离心室肌细胞的方法是可行的，可作为以细胞学为基础一些分子生物学甚至基因组学、蛋白组学研究中的一种最基本的实验方法。该方法具有无需特殊昂贵设备、简单易行、消耗低廉、耗时短、适于大样本研究。

摘要：背景:脑醒喷鼻剂由川芎和石菖蒲等中药组成,《神农本草经》谓其“主脑卒中入脑”之功效。目的:观察脑醒喷鼻剂对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织自由基及一氧化氮合酶变化的影响,并与经典西药尼莫地平相比较。设计:随机对照实验。单位:一所中医药大学医院的内科。对象:清洁级成年雄性Wistar大鼠70只,随机分为7组:脑醒喷鼻剂高剂量组(高剂组),脑醒喷鼻剂中剂量组(中剂组),脑醒喷鼻剂低剂量组(低剂组),尼莫地平腹腔注射组(尼莫地平组),生理盐水喷鼻剂组(生理盐水组),溶酶喷鼻剂组(溶酶组),假手术组,每组10只。方法:除假手术组外,其他6组阻断大鼠左侧大脑中动脉建立大鼠局灶脑缺血再灌注模型。在造模前3d及再灌注期间,脑醒喷鼻剂高、中、低剂组分别以含川芎嗪和石菖蒲生药5.4,2.7,1.08mg/(kg·d)和1.35,0.54,0.27g/(kg·d)的剂量滴鼻,3次/d;生理盐水组和溶酶组以生理盐水、溶酶喷鼻剂0.18mL/(kg·d)滴鼻,3次/d;尼莫地平组用尼莫地平注射液0.8mg/(kg·d)腹腔注射,2次/d;假手术组按常规饲养至实验取材。用比色法检测丙二醛、超氧化物歧化酶及一氧化氮合酶。主要观察指标:①不同剂量脑醒喷鼻剂及其他组动物脑组织丙二醛、超氧化物歧化酶及一氧化氮合酶活性变化。②将不同剂量脑醒喷鼻剂组与尼莫地平组做比较。结果:造模时死亡8只动物,进入结果分析62只。①丙二醛含量:高剂组、尼莫地平组明显低于生理盐水组[(0.92±0.32),(0.87±0.39),(1.35±0.34)μmol/g,P<0.05],但高剂组和尼莫地平组间无差异。②超氧化物歧化酶活性:高剂组、尼莫地平组明显高于生理盐水组[(35.64±11.67),(33.88±7.15),(20.70±3.88)NU/mg,P<0.05],但高剂组和尼莫地平组间无差异。③一氧化氮合酶活性及超氧化物歧化酶活性:高剂组、尼莫地平组明显高于生理盐水组[(4.64±1.22),(5.00±1.10),(3.08±1.12)mkat/g,P<0.05],但高剂组和尼莫地平组间无差异。④中、低剂组和溶酶组超氧化物歧化酶及一氧化氮合酶活性有所升高,丙二醛含量有所降低,但与生理盐水组比较无差异。结论:脑醒喷鼻剂高剂量组能防止脑缺血缺氧所致的脂质过氧化,使丙二醛生成减少,清除自由基损害,并增加一氧化氮合酶活性,对脑组织的缺血再灌注损伤有保护作用,与尼莫地平的作用相当。

摘要：目的:观察头穴不同留针时间治疗脑性瘫痪的疗效差异。方法:采用随机对照设计及靳三针疗法,进行头针留针1小时与30分钟治疗脑性瘫痪的疗效对比观察。结果:经治2个月后,留针1小时组对运动功能的改善优于留针30分钟组。结论:延长头针留针时间以达到足够刺激量是针刺治疗脑瘫取得较好疗效的重要因素。

摘要：目的:针刺是临床治疗脑性瘫痪的一种重要手段,但留针时间存在重大分歧,探讨不同头针留针时间治疗脑性瘫痪的疗效差异。方法:2003-05/2003-12,在广州中医药大学第一附属医院针灸特诊室及广州市靳三针治疗中心,收集确诊为脑瘫,已接受两个月靳三针基础治疗而再诊患儿43例,采用随机对照设计及靳三针疗法,进行头针留针1h与30min治疗脑性瘫痪的疗效对比观察。结果:采用GMFM测评,治疗前留针1h组2,3,4功能区得分各为1562.8±592.6,2452.1±723.5,1573.8±513.4,各区实际得分为152.9±39.2,162.2±61.4,144.73±29.2,治疗后各功能区得分为2989.7±451.3,3897.9±652.1,2341.7±317.9,实际得分为231.5±41.5,271.4±85.8,228.6±38.3。留针30min组2,3,4功能区得分各为1696.8±215.3,2509.5±385.4,1495.3±203.7,实际得分为159.7±32.4,155.6±49.3,131.9±21.3,经治两个月后,其相应功能区得分为2386.5±423.5,3372.1±592.6,1968.2±295.6,实际得分为197.3±42.5,207.2±71.5,180.5±20.5。治疗后两个针刺组运动功能均有所提高,经统计学分析差异显著,组间比较头针留针1h组对跪爬、坐、站几个运动功能区的改善优于留针30min组。结论:延长头针留针时间以达到足够刺激量是针刺治疗脑瘫取得较好疗效的重要因素。

摘要：目的:优选半仿生法提取莲子心中总生物碱的工艺条件。方法:采用均匀设计法优选半仿生提取工艺;以总生物碱含量、干 浸膏得率为指标,考察药材的提取时间、溶媒量、pH值等因素对提取工艺的影响。结果:优选工艺为莲子心加8倍量水提取3次,3 煎用水的pH值分别为5．0、6．0、8．0,煎煮总时间为4h。结论:本法为莲子心的提取提供了理论依据。

摘要：目的:研究灵芝孢子粉提取物对裸鼠移植性人肝癌血管生成的影响,并初步探讨其抑瘤机制。方法:建立裸鼠移植性人肝肿瘤模型,采用随机区组设计法随机分为空白对照组、5-氟尿嘧啶组及灵芝孢子粉提取物组,观察裸鼠肿瘤生长。采用苏木精-伊红染色法、SP免疫组织化学法及病理Imagepro Plus 5.0彩色图像定量分析法检测裸鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)。结果:灵芝孢子粉为2.1 g生药/kg时,对裸鼠移植瘤的抑制率为57.0%,与空白对照组比较有极显著差异(P<0.01)。镜下观察,灵芝孢子粉组与空白对照组相比,肿瘤坏死组织较多,细胞异型性较小。灵芝孢子粉组VEGF、MVD表达水平较空白对照组有明显下降。结论:高浓度及大剂量的灵芝孢子粉对肝肿瘤有明显的抑制作用,并能抑制肿瘤新生血管生成,其机制可能与对VEGF表达的抑制有关。

摘要：目的评价中药结肠洗液对慢性肾功能衰竭(CRF)患者血肠源性尿毒素的清除作用和安全性,为进一步优化CRF中医综合疗法的方案提供基础。方法采用非随机同期对照试验设计方法,将96例2010年3—12月广东省中医院肾病科住院CRF患者按照其意愿分为灌肠治疗组(治疗组,56例)和对照组(40例)。两组均按照CRF非透析期临床治疗方案给予基础治疗,治疗组加用中药结肠洗液灌肠治疗,每天1次,疗程2周。观察两组治疗前后临床症状、血清肠源性尿毒素水平硫酸吲哚酚(IS)、BUN、UA及SCr水平,监测治疗期间不良反应,评价该疗法的临床疗效及安全性。结果最终完成观察研究84例,治疗组48例,对照组36例。治疗组治疗后SCr、BUN、IS水平均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组治疗后IS较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后疲倦乏力、腰膝酸软、大便干结以及水肿比例均降低(P<0.05,P<0.01),治疗组治疗后纳差呕恶比例降低(P<0.05),且治疗组患者在灌肠治疗期间均能保持每日排便1次以上,以软烂便为主。治疗过程中无严重不良事件发生。结论中药结肠洗液联合基础疗法治疗CRF可使血清肠源性尿毒素(IS、BUN)水平在短期内降低。

摘要：目的 :观察白蒺藜高、中、低三种给药剂量大鼠不灭活血清对酪氨酸酶 ( TYE)活性的影响 ,以期指导临床用药。方法 :重复测量设计 ,应用多巴氧化速率法检测不同时间点 5组不同大鼠血清对反应体系中吸光度值的变化 (△ OD)。结果 :白蒺藜低剂量 ( 1 0 g)对 TYE具有抑制作用 ,高剂量 ( 30 g)对 TYE活性有激活作用 ( P<0 .0 5) ;中剂量 ( 2 0 g)和补骨脂素对 TYE的作用倾向于激活作用 ,与空白血清对照无统计学意义。结论 :白蒺藜对酪氨酸酶活性的影响与大鼠给药剂量有关 ,有低浓度抑制 ,高浓度激活的双向调节作用 ,临床应用白蒺藜治疗色素障碍性疾病时 ,除应辨证用药外 ,色素沉着性疾病宜用低浓度 。

摘要：背景：MRI在膝关节色素沉着绒毛结节性滑膜炎中具有特异性影像征象，并具有极高的临床价值。目的：分析膝关节色素沉着绒毛结节性滑膜炎的MRI影像学特征及诊断价值。设计、时间及地点：单一样本观察，于2007—02／2009-03在汕头大学医学院第一附属医院完成。对象：选择汕头大学医学院第一附属医院骨外科手术病理证实的色素沉着绒毛结节滑膜炎患者15例，男9例，女6例，年龄18-67岁，病程3个月～7年。7例行关节镜下滑膜切除，8例行开放性滑膜切除。方法：采用Philips 1．5T Power 6000MR超导型MRI扫描仪对患者膝关节表面矢状位、冠状位扫描。主要观察指标：色素沉着绒毛结节性滑膜炎患者MRI征象及病理所见。结果：局限型2例，弥漫型13例。色素沉着绒毛结节性滑膜炎主要表现为滑膜不规则结节状增生或弥漫性增生，增生的滑膜内含铁血黄素沉着（T2WI低信号）、邻近半月板和（或）骨侵蚀、关节腔积液等。结论：MRI能为早期诊断膝关节色素沉着绒毛结节性滑膜炎提供依据。

摘要：背景:中医对类风湿关节炎rheumatoidarthritis,RA的认识和治疗积累()比较丰富的经验,尤其是经过近几年来的研究,取得了令人瞩目的进展,具有治疗方法多,疗效确切,毒副作用少的特点,因而从中医领域进一步探寻治疗RA更为有效的药物和方法,有着重要的科学意义和社会意义。而中药能否在RA发病中通过多途径、多靶点、多环节作用方式,抑制或阻止软骨和骨的破坏并促进他们的新陈代谢及其损伤的修复的研究更是少有报道。目的:探讨中药通痹灵抗软骨破坏的作用机制。设计:以实验动物为研究对象的完全随机设计,对照实验研究。单位:一所大学金匮教研室。材料:实验于2002-08/2003-12在广州中医药大学第一附属医院综合实验室完成。Wistar清洁级大鼠,雌性,体质量(110±20)g,35只。由解放军第一军医大学动物实验室提供,动物合格证号:2002A041。将Wistar大鼠适应性喂养3d后,随机分为正常组、造模组、通痹灵总碱组。通痹灵总碱由广州中医药大学热带病研究所植物化学分析室提取。方法:以胶原诱导型关节炎大鼠为动物模型,分组灌胃治疗后,做大鼠趾关节病理切片,常规苏木精-伊红染色,观察软骨病变;培养软骨细胞,以rrIL-1β体外刺激软骨细胞导致软骨细胞基质降解作为药理模型,加用不同浓度的通痹灵总碱,并以地塞米松作为对照组,?