摘要：【目的】探讨膜反向斑点杂交法在广东人G6PD基因6种常见突变同步检测中的应用。【方法】用高铁血红蛋白还原试验和G6PD/6-PGD酶活性比值法进行G6PD缺乏症筛查。应用多重PCR方法扩增G6PD基因目的片段。用Premier Primer6.0软件设计和优化针对广东人常见6种G6PD基因突变型的特异性寡核甘酸探针,用乙基-3-二甲氨基丙碳二亚胺(EDC)法处理尼龙膜并固定探针,制成G6PD基因突变检测用膜条。多重PCR扩增产物与固定在膜条上寡核苷酸探针进行杂交,通过显色反应判读结果。以G6PD基因测序为金标准,对膜反向斑点杂交法进行评价。【结果】26例标本中膜反向斑点杂交法检测结果:95A→G突变型5例,1024C→T突变型3例,1376G→T突变型8例,1388G→A突变型7例,392G→T突变型1例,未发现1311C→T突变型,有两例检测为阴性。膜反向斑点杂交法未能测出的2例标本经基因测序证实存在392G→T突变,其余24例膜反向斑点法与基因测序法的结果完全一致,符合率为92.3%(24/26)。【结论】在优化探针设计和杂交条件前提下,膜反向斑点杂交法可用于广东人G6PD基因6种常见突变型的同步检测。

摘要：目的：探讨RNA干扰技术沉默CDX2基因对人急性髓细胞白血病细胞系THP1增殖影响的意义。方法：针对CDX2mRNA序列设计合成2对编码小干扰RNA（siRNA）的DNA模板,构建pGenSil-CDX2siRNA重组质粒,转染THP1细胞。采用蛋白质印迹法检测重组质粒对CDX2蛋白表达的影响,MTT法观察THP1细胞增殖情况,Annexin-V-PI双染法流式细胞术检测转染重组质粒后细胞凋亡状况。结果：成功构建pGenSil-CDX2 siRNA重组质粒,成功转染THP1细胞,并能特异地抑制CDX2基因的表达;转染重组质粒后,THP1的活力分别降低为（39.8±5.0）%,与空质粒组组间差异有统计学意义,P=0.016。重组质粒组的THP1细胞凋亡率为37.3%~42.1%。结论：pGenSil-CDX2 siRNA重组质粒明显下调CDX2在急性髓细胞白血病细胞中的表达,并抑制肿瘤细胞生长,促进其凋亡。

摘要：目的提出一种基于混合正态模型来拟合糖尿病住院病人风险损失规律的精算方法。方法采用EM算法对混合正态风险模型进行参数估计;采用Kolmogorov-Smirnov检验对混合正态风险模型的拟合优度进行检验;采用随机抽样模拟和t检验法比较随机样本指标与模型参数之间的差异;采用逐步判别分析方法,对随机保单进行分类与甄别;设计保险条款,作为保险双方有约束力的合同。结果由训练样本拟合得到四元混合正态模型;模型的拟合精度很高(P=0·99701);按μi+1·645σi可得到4种保险等级下的总保费;样本指标与模型参数之间的差异无统计学意义。结论本文设计的面向糖尿病住院病人的医疗保险,可根据投保人因糖尿病住院风险损失额划分成4种类型保单持有者,并由此厘定出4种不同等级的保险费,因而体现了高风险损失应承担高额保险费的保险原则,有利于投保人根据自身情况选择保单类别。

摘要：目的分析精神分裂症(SCZ)患者心理弹性与认知功能水平的相关性。方法入组首发SCZ患者59例(SCZ组)和健康对照者86名(HC组),SCZ患者为2017年9月到2020年1月在中山大学附属第三医院精神科门诊及住院部患者。健康对照者经过广告招募入组,比较两组心理弹性、认知功能水平,分别对两组的心理弹性和认知功能进行偏相关分析。结果对SCZ组和HC组一般情况对比分析,两组的性别、婚姻及年龄差异无统计学意义(均P>0.05),其中SCZ组男39例,女20例,年龄(23.8±7.4)岁,HC组男47名,女39名,年龄(22.9±4.7)岁;受教育年限差异有统计学意义(P<0.05)。SCZ组的心理弹性总分[(56.9±16.7)分]及各因子分均显著低于HC组的心理弹性总分[(68.0±14.4)分]及各因子分(均P<0.05)。SCZ组的精神分裂认知功能成套测验MCCB总分[(23±12)分]及各分测验分显著低于HC组的认知功能成套测验总分[(42±11)分]及各分测验分(均P<0.05)。SCZ组的心理弹性总分及坚韧性与符号编码呈正相关[偏相关系数(PCC)分别为0.286、0.289,均P<0.05)],心理弹性总分及各因子分均与情绪管理能力呈正相关(PCC分别为0.334、0.271、0.382、0.308,均P<0.05)。HC组的心理弹性总分、坚韧性、力量性与符号编码呈正相关(PCC分别为0.268、0.225、0.291,均P<0.05),力量性、乐观性与语言记忆呈正相关(PCC分别为0.268、0.225,均P<0.05);力量性与空间广度、持续操作能力呈正相关(PCC分别为0.244、0.217,均P<0.05);心理弹性总分及各因子分均与情绪管理能力呈正相关(PCC分别为0.306、0.230、0.286、0.289,均P<0.05);心理弹性总分、力量性、乐观性均与MCCB总分呈正相关(偏相关系数分别为0.291、0.359、0.287,均P<0.05)。结论首发SCZ患者的心理弹性及认知功能均有不同程度受损,心理弹性水平与部分神经认知功能和社会认知功能中情绪管理能力相关。

摘要：目的设计并开发基于医学影像存储与传输系统 (PACS)的结构化报告模块 ,应用计算机生成图文并茂的诊断报告并实现诊断报告与图像的同步传输。方法 PACS采用 10 0 0M主干网 ,10 0M交换到桌面 ;应用Delphl6 0 ,VC ++6 0等编程语言 ,设计结构化诊断报告为基本项目区、影像征象区、诊断意见区、建议区、签名区、图像区等 6个功能模块区 ;设计通过对医学数字成像与传输标准 (DICOM)复合对象的引用 ,在诊断报告中直接插入DICOM的医学图像或者波形 ;设计并构造整个系统环境所需的基本函数库。结果基于PACS的结构化报告模块能将影像诊断报告按照计算机可以明确无误的结构方式组织起来 ,缩短诊断报告时间和周期 ,提高对报告原始资料信息的利用率。结论结构化报告模块有利于促进影像诊断工作与临床教学、科研等工作的结合 ,提高影像诊断工作质量和效率。

摘要：目的调查城镇企业员工对现场急救知识和技能知晓现状,为制订企业员工急救知识普及计划提供依据。方法采用随机抽样和横断面问卷调查方法,通过自行设计调查问卷对东莞市塘厦镇6家企业的1 600名员工的急救知识和技能进行调查。结果收回问卷1 532份,回收率95.75%;其中完整问卷1 475份,部分不完整问卷57份。企业员工对呼救常识、心肺复苏知识、创伤、意外伤害等急救知识知晓率均低于30.00%,人均得分(22.74±9.22)分。他们急救知识的主要来源是报刊及书本、广播电视、网络,分别占38.07%、31.08%、17.34%。相关分析结果显示急救知识和技能总分与被调查者是否接受过急救培训存在相关关系。结论城镇企业员工急救知识和技能知晓率低,应加强企业员工现场急救知识教育和急救技能的培训,以提高应对意外伤害的能力,降低伤残率。

摘要：目的探讨RNA干扰抑制人成骨样细胞株MG63中雌激素受体α亚基(estrogenreceptorαsubunitERα)后,对17β雌二醇(E2)诱导护骨素(OPG)表达的影响。方法利用计算机辅助设计ERα特异性siRNA,体外合成siRNA基因,并将其定向克隆入真核表达载体pSilencer41CMV。以脂质体法转染ERαsiRNA载体至人的成骨样细胞株MG63中,鉴定后分别用不同浓度的雌激素或G蛋白抑制剂苏拉明干预经ERαsiRNA转染的MG63细胞或未经ERαsiRNA转染的MG63细胞,RTPCR法检测OPGmRNA的表达水平。结果双酶切法鉴定重组质粒后,RTPCR法鉴定ERαsiRNA载体可特异地抑制MG63细胞中ERα的表达。不同浓度的17βE2上调MG63细胞OPGmRNA的表达,其中以10-7mol/L的作用最强。但经ERαsiRNA载体抑制MG63细胞ERα亚基后,17βE2上调MG63细胞OPGmRNA表达的作用消失。结论17βE2主要经ERα亚基上调MG63细胞OPG的表达。

摘要：目的构建雌激素受体α亚基（ERα）下调的人成骨样细胞模型。方法采用计算机辅助设计并合成ERα特异性小干扰RNA（siRNA）前体基因后，定向克隆人pSilencer4．1-CMV质粒中，构建重组的ERα siRNA表达载体并测序鉴定。由脂质体介导重组质粒稳定转染人成骨样细胞株MG63，潮霉素筛选阳性抗性克隆细胞。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测ERα基因在人成骨样细胞株MG63内的表达，抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合体法（ABC）分析ERα蛋白在人成骨样细胞株MG63内的表达与定位。MTT法测ERα基因被特异性下调后对MG63细胞生长的影响。流式细胞术分析ERα siRNA对人成骨样细胞株MG63细胞生长周期的影响。采用改良Gomori氏钙钴法分析ERα siRNA对人成骨样细胞株MG63表达碱性磷酸酶的影响。结果构建表达ERα siRNA的重组真核表达载体，并成功地下调了人成骨样细胞株MG63的ERα亚基基因，其中MG63细胞的G1期为68．6％，G2期为17．6％，S期为13．8％；ERα siRNA MG63细胞的G1期为68.6％，G2期为16．8％，s期为14．6％。而ERα siRNA下调人成骨样细胞株MG63的ERα亚基对细胞的生长特性无明显影响。结论成功地构建了ERα下调的人成骨样细胞模型，该模型为进一步研究雌激素及其受体对骨代谢影响的分子机制提供了基础材料。

摘要：背景:近年在整体水平上以高通量分子扫描手段为基础的基因组学、蛋白质组学以及计算机辅助设计等技术的整合及相互关联的"技术链"的应用已在乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、卵巢癌、黑色素瘤等的研究中取得了丰硕的成果,但关于口腔鳞状细胞癌的研究较少。目的:实验通过基因表达谱芯片检测口腔鳞状细胞癌组织与癌旁正常组织的基因表达谱。方法:收集广东省口腔医院2013年手术切除的口腔鳞癌及癌旁正常组织各2例,采用Roche Nimble Gen全基因组表达谱芯片进行口腔鳞癌及癌旁正常组织的基因表达谱检测。结果与结论:按差异基因筛选标准,从32 448条检测基因中筛选出口腔鳞癌肿瘤组织的差异基因共有7 872条,占筛选基因总数的24%;其中上调表达的基因有3 800条,下调表达的有4 072条。结果证实,通过基因表达谱芯片检测并根据表达差异1倍以上的筛选标准得到了7 872个表达差异的基因。由此可见肿瘤的发生发展不是单个或几个基因的作用结果,以往实验往往针对某个或某几个基因的研究有很大的局限性。同时也说明了肿瘤的产生是多基因成网络相互调节作用的结果,而且这个网络的作用关系是非常复杂的。

摘要：目的观察经特异性小干扰RNA(small interfere RNA,siRNA)下调人成骨样细胞株MG63的雌激素受体β(ERβ)后对其生长状况的影响。方法利用计算机辅助设计并合成ERβsiRNA前体基因后,定向克隆入pSilencer4.1-CMV质粒中,构建重组的ERβsiRNA表达载体并测序鉴定。由脂质体介导重组质粒稳定转染入人成骨样细胞株MG-63,潮霉素筛选阳性抗性克隆细胞。RT-PCR法检测ERβ基因在人成骨样细胞株MG-63的表达,抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合体法(ABC)分析ERβ蛋白在人成骨样细胞株MG-63内的表达与定位。MTT法测ERβ基因被特异性下调后对MG-63细胞生长的影响。流式细胞术分析ERβsiRNA对人成骨样细胞株MG-63细胞生长周期的影响。采用改良Gomori氏钙钴法分析ERβsiRNA对人成骨样细胞株MG-63表达碱性磷酸酶的影响。结果构建表达ERβsiRNA的重组真核表达载体,并成功地下调了人成骨样细胞株MG-63的ERβ基因,而ERβsiRNA下调人成骨样细胞株MG-63的ERβ对细胞的生长特性无明显影响。结论成功地构建了ERβ下调的人成骨样细胞模型,该模型为进一步研究雌激素及其受体对骨代谢影响的分子机制提供了基础材料。