摘要：目的掌握影响肝性脑病(HE)预后的危险因素。方法对国内发表资料完整、统计设计合理的11个HE研究(共1 131例)进行荟萃分析。结果HE诱因分别为:消化道出血43.8%,感染33.9%,电解质紊乱29.1%,大量利尿和/或放腹水14.5%,饮食不节14.2%,肾功能衰竭13.0%,手术/创伤6.0%,药物4.5%,输血/输复合氨基酸3.2%,腹泻2.4%,便秘1.8%,原因未明/无2.7%.与HE死亡率相关因素包括:①诱因数:单一诱因死亡率33%,二种诱因为71.4%;三种或以上诱因为92.3%;三组间差异显著(P<0.01)。②诱因纠正情况:可纠正组死亡率为18.2%,未纠正组为100%,二组间差异显著(P<0.01)。③HE分期:Ⅰ期死亡率为0%,Ⅱ期为4.9%,Ⅲ期为34.4%,Ⅳ期为85.1%,四组间差异显著(P<0.01)。④肝功能(Child-pugh分级):A级死亡率为19.8%,B级为49.8%,C级为80.8%,三组间差异显著(P<0.01)。结论重视HE预后的危险因素,警惕多种诱因并存,消除其不利影响,保护肝功能是改善HE预后的重要途径。

摘要：目的：构建靶向结肠癌细胞的人端粒酶逆转录酶HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒并对该表达体系进行鉴定。方法：根据GenBank中的HTERT启动子（HTERTp）序列设计引物，以人胚肾293细胞提取基因组DNA为模板，PCR扩增HTERTp，并将HTERTp序列克隆入pDC312质粒中，构建成HTERTp调控的腺病毒质粒pSG—HTERTp；NK4 cDNA酶切并回收克隆至pSG—HTERTp载体中，构建成pSG—HTERTp／pA—NK4穿梭质粒，脂质体法在293细胞中包装重组腺病毒；噬斑分析法筛选单克隆重组腺病毒；RT-PCR检测NK4基因的转录；Western Blot检测NK4蛋白的表达。结果：成功构建出成功构建出HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒，滴度为4．5×10^9空斑形成单位（pfu）／mL，且PCR扩增及western bolt电泳均呈阳性表达。结论：成功构建出HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒，为进一步研究NK4基因的作用机制打下实验基础。

摘要：目的了解慢性荨麻疹患者对健康教育知识的需求情况，通过对健康教育需求的调查分析，为今后有针对性地开展健康教育提供依据。方法采用自行设计的健康教育需求问卷对本所门诊178例慢性荨麻疹患者进行随机抽样调查。结果患者对发病原因及治疗效果、预后相关知识的需求率达85．3％；药物副作用与不良反应的需求率为85．9％；皮肤自我护理知识为88．7％；随访指导方面中服药提醒80．9％；健康教育指导方式中年轻患者倾向于QQ、微信，占92．7％，中医康复指导方面四季调养的需求程度高为92．7％。结论慢性荨麻疹患者对疾病相关知识普遍缺乏，秉承需要有针对性地开展个体化的健康教育，通过不同的教育方式和途径普及疾病相关知识，促进其建立健康行为和生活方式，提高生活质量。

摘要：目的探讨利用二维空气电离室矩阵MatriXX验证调强放疗计划的可行性。方法选择一患者,在美国NOMOS公司CORVOS6.2计划系统设计调强放疗计划,然后将其移植到剂量模体上。将调强放疗计划的计算结果导入MatriXX系统;执行一次完整的调强放疗计划,利用MatriXX测量其输出剂量。通过MatriXX系统的支持软件对调强放疗计划的计算结果和MatriXX测量所得数据进行分析、比较。结果MatriXX系统的支持软件分析,在感兴趣平面高剂量、低梯度区选定某点比较后,得出两者的点剂量差异为0.51%。Gamma分析结果(按3mm和3%的误差标准)95.86%通过。二维等剂量曲线及离轴比具有较好的一致性。结论MatriXX系统验证调强放疗计划简便、可行。

摘要：该文探讨circCALN1(circular RNA calneuron 1)在鼻咽癌中的表达及调控分子机制。运用生物信息软件预测circCALN1调控的miRNA及miRNA调控的靶基因;运用RT-PCR检测鼻咽癌组织及细胞株中的基因表达水平;常规培养鼻咽癌细胞株(CNE1、HNE1、SUNE-1、5-8F、6-10B),鼻咽永久上皮分化细胞株NP69,人肾小管上皮细胞株293T;设计针对circRCALN1接头处的及BCL-2的siRNA序列,运用脂质体转染细胞株;Transwell检测细胞侵袭能力;MTT检测细胞增殖抑制率;Western blot检测蛋白的相对表达水平;构建双荧光报告基因载体验证基因之间的结合作用。circCALN1、BCL-2在鼻咽癌组织及细胞株的相对表达水平上调,而miR-143-3p表达水平下调;其中,在CNE1、HNE1、SUNE-1、5-8F细胞株中,circCALN1、BCL-2在CNE1细胞株的表达水平最高,而miR-143-3p在CNE1细胞株的表达水平最低;有效降低circCALN1、BCL-2在鼻咽癌细胞株CNE1的表达水平24、48、72 h之后,抑制率分别为(16.3±1.65)%、(29.6±2.6)%、(63±3.6)%;(26.3±2.9)%、(32.6±3.8)%、(59.6±3.9)%;过表达miR-143-3p 24、48、72 h之后,抑制率为(9.6±3.6)%、(13.6±5.6)%、(36.8±2.3)%;过表达miR-143-3p及降低circCALN1、BCL-2的表达,其侵袭细胞个数分别为185±13、200±15、183±18;生物信息学结果提示:miR-143-3p与circCALN1存在结合位点,miR-143-3p与BCL-2存在结合位点。circCALN1、BCL-2-3?UTR双荧光报告基因载体质粒与miR-143-3p mimics共转梁293T细胞,荧光活性降低。降低circCALN1的表达促进miR-143-3p的表达上调,而BCL-2的表达下调。circCALN1/miR-143-3p/BCL-2调控轴影响了鼻咽癌细胞的增殖与侵袭。

摘要：目的:构建针对人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)小干扰RNA(siRNA)表达载体,并观察其对川崎病(KD)血清诱导的血管内皮细胞MMP-9高表达的干扰效果。方法:依据siRNA设计原则设计两对MMP-9基因的特异性干扰序列,体外分别合成两端含BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点的编码短发夹RNA序列的DNA单链,退火后与pSilencer3.1-HI neo线性质粒连接,转化DH5α感受态菌株,筛选阳性克隆,提取质粒进行双酶切及琼脂糖电泳鉴定。阳性重组质粒测序。将构建的两个MMP-9 siRNA质粒以KD血清作为诱导因子,用脂质法转染内皮细胞ECV-304,应用RT-PCR法测定各实验组血管内皮细胞MMP-9mRNA表达、Western blot检测各组MMP-9蛋白表达情况,对所构建的MMP-9 siRNA质粒进行效应检测。结果:DNA测序证实合成的并被克隆入pSilencer3.1-HI neo表达质粒siRNA插入序列与设计完全符合。KD血清组MMP-9蛋白及mRNA表达水平均较正常血清组明显升高(P<0.05);而所构建的两个MMP-9 siRNA及人血丙种球蛋白均能显著抑制KD血清的上述诱导作用(P<0.05)。结论:成功构建的两个MMP-9 siRNA比人血丙种球蛋白更能高效、特异地抑制MMP-9的表达,为进一步研究MMP-9基因对KD冠状动脉病变的影响及其临床应用奠定了基础。

摘要：目的探讨细胞水平的雄激素受体（AR）基因敲除方法，为前列腺疾病AR通路的功能研究提供细胞株材料。方法通过在线软件设计针对AR的sgRNA靶向序列，将设计好的sgRNA靶序列克隆到PX330载体中并测序验证。将克隆好的CRISPR-AR载体转染T293细胞，提取DNA，PCR产物酶切和测序鉴定基因敲除效率。结果 CRISPR-AR载体测序证明质粒载体构建成功，293T细胞转染和酶切鉴定实验证明CRISPR-AR载体具有95.3%的敲除效率。结论基于CRISPR/Cas9技术构建的CRISPR-AR载体可用于细胞的AR基因敲除，可进一步构建AR基因敲除的细胞株。

摘要：目的建立交叉引物恒温扩增（Cross Priming Amplification,CPA）技术对甲型H1N1流感病毒进行检测的方法,并对该方法通过临床标本进行评价。方法根据甲型H1N1流感病毒的保守序列设计特异性引物,并在同一温度下实现RNA的逆转录和DNA扩增,该扩增产物可通过全封闭式核酸检测装置进行检测。14份健康人咽拭子标本、7个其他呼吸道病毒和6个虫媒病毒株被用来检测CPA反应的特异性;已知病毒滴度的甲型H1N1毒株进行对照梯度稀释,以测试CPA的敏感性;102份甲型H1N1临床咽拭子标本为检测对象,评估其临床的检测的可行性。结果 CPA反应未出现对健康样本以及其他病毒产生交叉反应;对已知滴度的病毒进行梯度稀释检测,证明CPA的敏感性为10拷贝/μL。对甲型H1N1流感临床病例发病1~3d临床标本新建检测方法的检出率为100%,4~6d临床标本检出率为79.31%,≥7d临床标本检出率为9.09%。讨论CPA具有较高的敏感性、特异性,对设备要求低,适合基层医疗单位对甲型H1N1流感发病早期诊断使用。

摘要：目的探讨进食对布南色林在中国健康人群中药动学特征的影响程度。方法本研究采用开放、随机的双周期自身交叉设计。20名男性健康志愿者,随机均分为两组,分别在餐前或餐后30min服用布南色林片2片(8mg)。受试者于服药前(0 min)和给药后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24、36、48、60h采集静脉血。清洗1周后两组交叉用药。用LC-MS/MS法测定血浆中布南色林的浓度,并用DAS2.1.1.1程序计算药动学参数。结果 20名健康受试者空腹单次口服布南色林8mg后的主要药动学参数:ρ_(max)为(1092.08±815.34)ng·L^(-1),t_(max)为(1.06±0.39)h,t_(1/2)为(12.92±5.36)h,AUC_(0→60h)为(7341.48±4674.20)ng·h·L^(-1),AUC_(0→∞)为(7660.28±4 756.63)ng·h·L^(-1)。20名健康受试者餐后单次口服布南色林8mg后的主要药动学参数:ρ_(max)(1540.11±841.70)ng·L^(-1),t_(max)为(2.50±1.29)h,t_(1/2)为(15.12±6.39)h,AUC_(0→60h)为(12317.37±7558.19)ng·h·L^(-1),AUC_(0→∞)为(12878.34±7704.28)ng·h·L^(-1)。20名受试者给药后均无严重不良反应发生,其中7名受试者出现嗜睡,1名受试者发生一过性的尿白细胞增高,2名受试者发生一过性的肝功能异常,1周内均自行缓解。结论布南色林片空腹服用后吸收迅速,餐后服药吸收时间延迟,达峰时间显著推后,达峰浓度显著增大,进食增加药物吸收,AUC显著增大,为增加药物吸收和减少不良反应建议餐后给药。

摘要：目的:运用质量控制工具,验证本实验室的过程能力,设计最佳的室内质量控制规则.方法:参考美国临床实验室改进法案(CLIA’88)中的分析质量要求,作为临床允许总误差(total allowed error,TEa),结合本实验室的室内质控变异系数(CV%)作为分析方法的不精密度,生化室间质评的偏倚(Bias%)作为分析方法的不准确度,以方法决定图反映检测方法的过程稳定性,用Westgard质控选择表格确定候选方法,以功效函数图和操作过程规范图确定最佳的质控方案.结果:各项目据其分析方法性能特征选择最佳质控规则进行室内质量控制.结论:实验室运用质量控制工具,确定质控方案,查找本实验室存在问题,开展全面质量控制策略(TQC),保证临床实验室的质量要求.